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血紅蛋白檢測方法

發布時間:2022-01-07 17:39:21

1. 血紅蛋白檢測是檢測什麼

主要檢測的是你是否是貧血的,貧血嚴重的話,就會引起休克等一系列的疾病的,需要輸血穩定的,一旦發現貧血的話,就要引起重視的。。。

2. 血紅蛋白(Hb)測定的血紅蛋白測定

正常參考值
男:(120~160)g/L;女:(110~160)g/L;新生兒:(170~200)g/L。
臨床意義
血紅蛋白測定的臨床意義同紅細胞計數,但在各種貧血時,由於紅細胞中的血紅蛋白含量不同,二者可以不一致,如缺鐵性貧血時紅細胞數降低很少有時甚至升高。因此,同時測定紅細胞和血紅蛋白,對貧血類型的鑒別有重要意義。血紅蛋白又稱血色素是紅細胞的主要組成部分,能與氧結合,運輸氧和二氧化碳。

3. 糖化血紅蛋白的檢測方法

1、陽離子交換色譜法
原理:糖化導致血紅蛋白分子表面陽離子丟失。在弱的陽離子交換劑中,例如Biorex70,伴有增加的離子濃度和(或)pH下降,糖化血紅蛋白在非糖化血紅蛋白前先洗脫。這現象產生了糖化血紅蛋白最初的術語「快速血紅蛋白」。陽離子交換色譜法可用於小型、微型或大型柱層析方法或部分或全自動的PHLC/FPLC方法。因為,其他翻譯後修飾血紅蛋白,例如醛亞胺型、甲醯化、乙醯化、乙醛加合物、降解物、老化人工物品和異常血紅蛋白電荷交換也不同於正常的HbA0,所以已經列出了許多陽離子交換層析法的干擾因素。使用常規HPLC的方法。分離糖化血紅蛋白亞組分是能達到滿足需求的臨床精密度。然而,已知HbA1c的峰不是均一的而是包含一重要的非糖化血紅蛋白部分。少數糖化血紅蛋白也整合到HbA0主峰中。通過使用特殊的柱原料(poly-CATA)和30~40 min分離時間可以改善分離效果。這些方法可以作為參考步驟但不適合常規使用。所有的陽離子交換色譜法對pH和溫度的變化敏感,因此要控制pH和溫度。
說明:根據紅細胞代謝動力學推測初始HbA1c值大約每日破壞1/120(≈0.83%)。因為糖化在合適的治療下甚至健康人也產生,故這個理論值在體外不能達到。控制不理想的糖尿病患者通過加強治療而達到血糖量正常,可以發現HbA1c值最大下降率以大約每10 d下降正常血糖的1%(絕對的)。由於測定糖化血紅蛋白方法的精確性,兩次測定值HbA1c的差異大約1%就可認為具有臨床相關性。因為這些原因,在HbA1c兩次測定間至少有2周的時間,推薦4~6周的間隔。
因為升高的糖化血紅蛋白值是長期高糖血症的糖尿病患者相當可靠的指示劑,因而是可能診斷糖尿病的。在未治療的個體,正常的糖化血紅蛋白值臨床上可以排除明顯的糖尿病。但由於它不能檢測糖耐量受損,所以作為診斷和(或)篩選目的唯一的參數,使用糖化血紅蛋白是存在問題的。
2、電泳法
原理:相比於非糖化血紅蛋白,因糖化而變化的總電荷和糖化血紅蛋白的等電點變化是瓊脂糖凝膠或者pH梯度5.0~6.5的凝膠等電聚焦電泳分離的基礎。瓊脂糖凝膠電泳的血紅蛋白亞組分解析度很小,而等電聚焦可以更好地使亞組分分離。可能由於試驗的自動化程度不足,重要性已經下降。
3、親和層析法
原理:硼酸結合順式-羥基。商品化的m-氨基苯硼酸瓊脂糖共價結合的親和柱已可用於微柱分析檢測。將血樣本中的血紅蛋白加到層析柱後,所有的糖化血紅蛋白(HbA1和旁鏈糖化的血紅蛋白;總糖化血紅蛋白)與硼酸結合而非糖化血紅蛋白通過層析柱可被測量。在加入高濃度也包含順式-羥基的多羥基復合物,例如山梨醇後,糖化血紅蛋白與硼酸的結合被替換而從柱子上洗脫下來。親和層析法對經翻譯以後修飾的血紅蛋白和病理血紅蛋白的影響相對不敏感。利用親和層析法,僅能測定總糖化血紅蛋白。廣泛使用的親和層析方法,允許用經驗演算法從總糖化血紅蛋白值計算出「標準的HbA1c」。
4、免疫分析法
在纈氨酸β-N-末端糖化的血紅蛋白提供了一個容易被抗體識別的抗原表位。可以用單克隆抗體或多克隆抗體進行放射免疫分析和免疫酶學分析測定,抗體特異識別β鏈N-末端糖化的血紅蛋白最後4~8個氨基酸組成的抗原表位。異常的血紅蛋白或翻譯後經修飾的血紅蛋白無干擾。
目前的免疫化學試驗不僅檢測HbA1c,通常也同時檢測HbA2c,因為血紅蛋白A2糖化δ鏈的表位是相同的。抗體直接抗β-鏈的最後四個氨基酸的糖化表位的免疫化學試驗也可用進行檢測,例如HbS1c。在大多數情況下HbA2c意義不大,雖然鐮刀細胞病時可以准確地測定纈氨酸β-N-氨基末端糖化程度,但它仍不能100%代表HbA1c。
5、離子層析法
離子層析法精密度高、重復性好且操作簡單, 被臨床廣泛採用。檢測原理由於血紅蛋白β-鏈N 末端纈氨酸糖化後所帶電荷不同, 在偏酸溶液中總糖化血紅蛋白( GH b) 及H bA 均具有陽離子的特性, 因此經過陽離子交換層析柱時可被偏酸的緩沖液平衡過的樹脂來吸附, 但二者吸附率不同, GH b正電荷較少吸附率較低, H bA 正電荷較多吸附率較高。用不同pH 的磷酸鹽緩沖液可以分次洗脫出GH b 和H bA, 用KCN 可將H b轉化為高鐵氰化血紅蛋白, 用分光光度計測定。或者得到相應的H b層析譜, 其橫坐標是時間, 縱坐標是百分比。HbA1c值以百分率來表示。現在大部分都用全自動測定儀測定。
6、等電點聚集法
是測定GH b的新技術, 它是在聚丙烯酞凝膠中加人載體兩性介質的薄板上形成一個由陽極到陰極逐漸增加的pH 梯度, 溶血液中各個組份將移動到各自的等電點的pH 位置上, 這樣就得到比一般電泳法更好的分劃效果和比較集中的色帶, 通過解析度高的微量光密度儀掃描, 可以准確地測定出各自組份的含量。由於它能夠分辨出一級結構不同的HbA、HbAc、HbF、HbS 及HbC等, 可完全避開各種物質的干擾。
7、化學發光法
採用離子捕捉免疫分析法, 應用抗原抗體反應原理, 聯以熒游標記物, 通過連接帶負電的多陰離子復合物, 吸附到帶正電的纖維表面, 經過一系列徹底清洗等步驟後, 測定熒光強度變化率, 計算濃度。採用專用試劑包和免疫發光分析儀,其檢測系統易於規范和重復, 可減少操作技術誤差, 檢測的靈敏度和特異性高, 批內、批間變異系數小, 回收率高, 准確度高, 交叉污染率小, 影響因素少。
8、酶法
原理為用特殊蛋白酶分解Hb, 3~ 5 min內果糖基氨基酸從H b分離, 果糖基氨基酸氧化酶( FAOD )從果糖基氨基酸產生H2O2, H2O2經POD與DA- 64反應, 選擇751 nm 測吸光度改變求得GHb濃度。

4. 血紅蛋白的檢測原理

稀釋標本中加入溶血劑,紅細胞溶解釋放出血紅蛋白: HGB+CN-氰化高鐵血紅蛋白(棕紅色) HiCN是一種非常穩定的血紅蛋白衍生物,血液中的各種血紅蛋白成分均能被轉化,其吸收峰為540nm,其進入血紅蛋白比色系統,即可報告顯示血紅蛋白濃度。 氰化高鐵血紅蛋白比色法,是ICSH和WHO推薦的標准化血紅蛋白測定法。 紅細胞通過微孔時,形成的相應大小的脈沖,將脈沖的高度疊加,經換算可得紅細胞的比積。有的儀器先以單個細胞高度計算紅細胞平均體積,再乘以紅細胞數,得出紅細胞比積。

5. 常見的檢測紅細胞的手段有哪些

紅細胞檢查計數、血紅蛋白測定、形態檢查、比容測定、生物活性檢測、ELISA檢測、DNA聚全酶鏈反應、血流變指數檢測、甲襞微循環檢測、血細胞比容檢測等,這些都是常見的關於紅細胞的檢測手段,但大多數檢測方法都是數值,指標性的,一般老百姓也看不懂。
紅細胞影像系統此類是通過高分辨的顯微鏡,很直觀的看到紅細胞的聚集性、變形性和滾動能力。

6. 糖化血紅蛋白儀的檢測方法

糖化血紅蛋白檢測方法很多,常用的有微柱法離子交換層析、親和層析、高壓液相、免疫凝集、離子捕獲法、電泳法等。 如毛細管電泳也能分離檢測糖化血紅蛋白和血紅蛋白質的變異體,但目前尚無商品化,具有批量樣本通過能力的儀器面世,相當程度地限制了該方法的臨床應用。
金標法的糖化血紅蛋白儀,CV值小於5%。
綜上所述,糖化血紅蛋白是糖尿病患者疾病控製程度一項良好的指標,糖尿病患者應定期檢測糖化血紅蛋白,並據此制定,修正相關治療方案。各醫院可根據自身標本的多少,選擇使用有關糖化血紅蛋白的檢測儀器,開展該項目的檢測。

7. 血紅蛋白濃度(HGB)是指血液中血紅蛋白的濃度嗎如何測定

現在多用血液分析儀做.
最經典的方法當然是氰化高鐵血紅蛋白法了.但是要求比較嚴格,還涉及劇毒試劑,不易推廣.
沙利法以經淘汰.
還有鹼性血紅蛋白測定法,也需要比色計.

這有幾篇論文介紹
血紅蛋白測定方法的發展及評價.pdf

血紅蛋白測定方法的發展及評價.pdf (148.77k)

血紅蛋白測定現狀及其測定方法之管見.pdf

血紅蛋白測定現狀及其測定方法之管見.pdf (73.24k)

三種血紅蛋白測定方法的比較:介紹一種新的血紅蛋白測定法

三種血紅蛋白測定方法的比較:介紹一種新的血紅蛋白測定法.pdf (54.13k)

8. 如何測定病犬的血紅蛋白

血紅蛋白是紅細胞的主要成分,具有運輸氧和二氧化碳的功能。測定血紅蛋白的方法大致可分為比色法、比重法、血氧法和測鐵法4種。但目前臨床上常用的是沙利氏目視比色法。用該法測定血紅蛋白的基本原理:一定量的血液加入稀鹽酸後,生成棕褐色的鹽酸高鐵血紅蛋白,將之與血紅蛋白計的標准色柱比色,求得每100毫升血液中的血紅蛋白克數或百分數。沙利氏目視比色法的主要器械為血紅蛋白計。國產的血紅蛋白計,規定以100毫升血液中含血紅蛋白14.5克為100%,其測定管的兩側有刻度,從下往上,一側刻有2~24,表示100毫升血液中血紅蛋白的百分數;另一側刻有20~160,表示100毫升血液中血紅蛋白的百分數。其吸血管有容積為20立方毫米的刻度。

測定血紅蛋白的方法是先於測定管內加入1/10摩爾濃度鹽酸液(亦可用1%鹽酸代替)至刻度之處,接著用吸血管吸抗凝血至刻度20立方毫米處,用紗布拭凈吸血管尖端附著的血液,迅速地將血液吹入測定管的鹽酸內,然後將吸血管在鹽酸液內反復吸吹,洗滌數次(防止產生氣泡),再輕輕搖動測定管,或用玻璃棒攪拌,使血液與鹽酸液混合,靜置10分鍾之後,慢慢沿測定管壁滴加蒸餾水(或1%鹽酸液)隨加隨用玻璃棒攪拌,直至液體的顏色與標准色柱一致時為止,然後讀取測定管內液體凹面的刻度數,即為100毫升血液中血紅蛋白的克數或百分數。健康犬血紅蛋白的平均值為13.6%克。血紅蛋白增多見於機體脫水性疾病,如重劇嘔吐、腹瀉等;血紅蛋白減少則見於各種貧血,如營養不良性貧血、溶血性貧血和再生障礙性貧血等。

測定血紅蛋白時應注意:①吸血量要准確,血量直接影響比色的結果;②攪拌要均勻,防止血凝塊產生;③放置時間不能隨意延長或縮短,因為血液在鹽酸液中轉化為酸性高鐵血紅蛋白是逐漸進行的。據測,1分鍾可轉變為75%,5分鍾轉變為88%,10分鍾轉變為95%。因此,放置時間長短直接影響測定結果。另外,為了使測定結果更為准確,可在讀數後再加蒸餾水1滴,攪拌混勻再比色,再讀數。如色調變淡,以前1次的讀數為准;色調不變淡時,則應以後1次的讀數為准。

9. 血紅蛋白檢驗是檢查什麼正常是多少

L:110---150g/男、類型,及貧血程度血紅蛋白及紅細胞主要是看有沒有貧血:120--160g/,正常女;L

10. 血紅蛋白如何測定血紅蛋白計測出來的准確度高嗎

做血常規檢查就可以

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