大腸菌群mpn檢測方法

⑴ 大腸桿菌試驗MPN法的特點

MPN計數又稱稀釋培養計數，適用於測定在一個混雜的微生物群落中雖不佔優勢，但卻具有特殊生理功能的類群。其特點是利用待測微生物的特殊生理功能的選擇性來擺脫其他微生物類群的干擾，
並通過該生理功能的表現來判斷該類群微生物的存在和豐度。本法特別適合於測定土壤微生物中的特定生理群（如氨化、硝化、纖維素分解、固氮、硫化和反硫化細菌等。）的數量和檢測污水、牛奶及其他食品中特殊微生物類群（如大腸菌群）的數量，缺點是只適於進行特殊生理類群的測定，結果也較粗放，只有在因某種原因不能使用平板計數時才採用。

⑵ 大腸菌群MPN計數法

不能換算，因為MPN法算出來的是活細菌的數量，而平板計數法是死的活的一起計數，平板計數法的結果一般比MPN法大。

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⑶ 食品中的大腸桿菌的檢測方法

1. 培養基配置

2. 檢樣、稀釋

3. 乳糖膽鹽發酵管觀察：（36攝氏度24小時）

   3.1不產氣 大腸桿菌陰性

   3.2產氣伊紅美藍瓊脂倒平板

   3.2.1G染色，G陽性，說明大腸桿菌陰性

   3.2.2乳糖發酵管（36攝氏度24小時），同樣不產氣，大腸桿菌陰性

⑷ 大腸桿菌與大腸菌群檢測方法

進入無菌室步驟
1． 進入無菌室前應打開紫光燈進行滅菌，時間為0。5—1小時。
2． 關燈後0•5小時後放可進入。
3． 進入更衣間更換衣服，佩帶口罩、帽子、鞋套
實驗步驟
1， 進入無菌室後，先把酒精燈點燃，然後在用酒精棉進行手部消毒。（酒精棉是用75%的酒精加入脫脂棉中製成）
2， 准備雙料管3根，單料管6根，培養皿7個。
3， 直接從原液中吸取10ml放入雙料管，（3根每根各10ml）
4， 再吸取原液1ml放入單料管中（3根每根各1ml）
5， 再吸取原液1ml放入培養皿中（2個培養皿各1ml）
6， 再吸取原液1ml放入鹽水管中製成－1梯度的樣液
7， 更換一根吸管，從－1梯度的樣液吸取1ml樣液放入單料管中（3根每根各1ml）
8， 再吸取－1梯度樣液1ml放入培養皿中（2個培養皿各1ml）
9， 再把每個培養皿中到入營養瓊脂平鋪底部搖允（注另作3個培養皿：空氣空白，把培養皿打開十分鍾倒入營養瓊脂平鋪底部搖勻。瓊脂空白，把培養皿中倒入營養瓊脂平鋪底部搖勻。鹽水空白，吸1ml生理鹽水放入培養皿中，倒入營養瓊脂平鋪底部搖勻。）
10， 把全部作好的放入培養箱中，溫度36C＋－1×C，大腸24H＋－2H，菌落48H＋－2H，（待培養皿中的瓊脂凝固後反轉過來放入培養箱中）
11， 梯度：－1梯度為1ml原液加入9ml生理鹽水配成
－2梯度為1ml－1梯度樣液加入9ml生理鹽水配成
－3梯度－4梯度配製方法和－1、－2梯度的配製方法一樣
12， 如果大腸初發酵產生氣泡，用接種筆沾一個產氣的液在伊紅美蘭平板上畫之字形然後放入培養箱中36C，24H＋－2H 。（接種筆在每次使用前必須在酒精燈上消毒。所畫之形不能劃破伊紅美蘭瓊脂表面）
13， 取出後在用接種筆在伊紅美蘭平板之字形上挑菌，放入乳糖復發酵管中 ，然後再培養36C＋－1C，24H＋＋－2H。
14， 再在伊紅美蘭平板之字形上挑菌，放到載玻片上作鏡檢。（方法見標准）
15， 只有鏡檢成紫紅色和乳糖復發酵管產氣同時成立的情況下，才能斷定這根管是不合格。
16， 清洗消毒這根試管前必須進行消毒黴菌，121C，0。5小時同時不能放氣。

⑸ 大腸菌群測定的MPN法結果計算

食材明細蛇肉1000克鹽2勺生薑5克蔥花2克枸杞5克蛇油2勺胡椒粉1勺蛇湯的做法步驟 1、蛇要趁著新鮮趕緊清洗好；熬出的湯汁才會健康營養又鮮美。
2、將蛇用清水洗凈；兩手稍微用力的拉扯蛇皮和蛇肉使之分離。
取出蛇膽，注意蛇膽不要弄破。
否則蛇感染後會很苦的。
道理和魚膽一樣，拉出蛇肚子里的內臟。
將蛇皮和蛇肉用手拉扯分開。
3、洗凈處理好的蛇肉放入干凈的碟中備用。
蛇皮放蛇皮放在一邊另外做涼拌菜。
將洗凈的蛇肉用剪刀剪成五至六公分長。
4、將蛇肉放入熱水中，煮至水開；倒掉煮出的泡沫及水；洗凈蛇段備用。
將蛇油放入干鍋中，小火熬成油倒掉油渣；生薑用蛇油爆香。
加入幾人份的水後；分別放入蛇肉；蛇內臟；黑木耳倒入料酒後；按下老火湯的鍵；要煲湯三小時。
5、湯煲好後；放入適量的鹽，胡椒粉；盛入湯碗中撒上枸杞；蔥花。
蛇湯味道極其鮮美；而且瘦身排毒養顏滋補，蛇肉屬於涼性；是一款極好的夏季健康養顏的滋補湯。
吃蛇肉好嗎
好吃啊，湯鮮味美！ 蛇肉性味甘咸平，含有蛋白質、脂肪、多種無機鹽、糖類、鈣、磷、 鐵、鋅及維生素A、維生素B1-維生素B2等成分。
具有補氣血，祛風邪，通經絡的作用。
適宜人群： 適宜體質虛弱，氣血不足，營養不良者食用；風濕痹痛，四肢麻木，風濕及類風濕性關節炎，脊柱炎患者食用；大瘋痢疾，過敏性皮膚病，末梢神經麻痹者食用；骨結核，關節結核，淋巴結核之人食用。
不適宜人群： 孕婦慎用。
還有蛇肉與蘿卜同食，會中毒。
一歲小孩能否吃蛇肉我家寶寶剛一周歲,別人都說蛇肉好吃,不知小孩...
有的人說小孩吃了蛇肉湯可以皮膚光滑、不長癤子。
但要注意蛇患有許多疾病，有的蛇有寄生蟲，有的蛇患有肝炎、癌症等。
因此，不建議寶寶食用蛇肉。
一般1歲多的孩子才可以吃少量蛇湯。
還是穩妥一點吧，畢竟太小了。
如果天太熱有點上火，可以吃點石蛙肉，還有鴿子蛋也是涼的。

⑹ 大腸桿菌的檢測方法

多管發酵法。

多管發酵法是一種檢測水體中大腸桿菌的傳統方法，這種方法是在44.5℃的含有熒光底物的培養基上連續培養24h，而後能產生分解熒光底物——葡萄糖醛酸酶，從而釋放出熒光產物，進而使培養基在紫外光照射下產生特徵熒光。此方法可被用來對原樣品中的菌落數作統計學估計。

在單料或雙料乳糖膽鹽發酵管內發酵，分離培養試驗，利用伊紅美藍培養皿分離，接著是在乳糖發酵管中進行二次發酵，最後通過芽孢染色、革蘭氏染色、顯微鏡觀察等來完成。多管發酵法對試驗條件要求不高，成本低，但是檢測時間較長，容易受其他條件干擾，進而影響到測定結果的精確度。

(6)大腸菌群mpn檢測方法擴展閱讀：

注意事項：

1、檢樣時注意無菌操作。

2、稀釋時採用的稀釋液可以用磷酸鹽緩沖液或生理鹽水，接種時可採用九管法，設置三個梯度，分別為0.1g/mL、0.01g/mL、0.001g/mL，每一個稀釋度的試管應充分混勻。

3、每次實驗需要有陰性對照。

4、使用小倒管培養基配製時，為排凈氣泡，滅菌時不要把試管的蓋子蓋的太緊，滅菌後注意觀察一下倒管中的氣體是否排完全、

5、高壓滅菌後等高壓滅菌鍋的壓力表達到0，取出培養基放到冰箱冷卻，效果會比較好。

⑺ 請教：MPN計數法測大腸菌群怎樣檢索MPN表

首先通過培養和證實試驗，獲得相鄰的三個稀釋度有多少個陽性培養管，然後將這一個數值組合去查詢MPN表，就可以獲得MPN數值。
例如，相鄰的三個稀釋度的陽性管數分別是3、1、0
那麼就在MPN表上尋找310組合所對應的MPN數值，即可。

⑻ 大腸菌群的檢測方法

進入無菌室步驟
1．進入無菌室前應打開紫光燈進行滅菌，時間為0。5—1小時。
2．關燈後0•5小時後放可進入。
3．進入更衣間更換衣服，佩帶口罩、帽子、鞋套
實驗步驟
1，進入無菌室後，先把酒精燈點燃，然後在用酒精棉進行手部消毒。（酒精棉是用75%的酒精加入脫脂棉中製成）
2，准備雙料管3根，單料管6根，培養皿7個。
3，直接從原液中吸取10ml放入雙料管，（3根每根各10ml）
4，再吸取原液1ml放入單料管中（3根每根各1ml）
5，再吸取原液1ml放入培養皿中（2個培養皿各1ml）
6，再吸取原液1ml放入鹽水管中製成－1梯度的樣液
7，更換一根吸管，從－1梯度的樣液吸取1ml樣液放入單料管中（3根每根各1ml）
8，再吸取－1梯度樣液1ml放入培養皿中（2個培養皿各1ml）
9，再把每個培養皿中到入營養瓊脂平鋪底部搖允（注另作3個培養皿：空氣空白，把培養皿打開十分鍾倒入營養瓊脂平鋪底部搖勻。瓊脂空白，把培養皿中倒入營養瓊脂平鋪底部搖勻。鹽水空白，吸1ml生理鹽水放入培養皿中，倒入營養瓊脂平鋪底部搖勻。）
10，把全部作好的放入培養箱中，溫度36C＋－1×C，大腸24H＋－2H，菌落48H＋－2H，（待培養皿中的瓊脂凝固後反轉過來放入培養箱中）
11，梯度：－1梯度為1ml原液加入9ml生理鹽水配成
－2梯度為1ml－1梯度樣液加入9ml生理鹽水配成
－3梯度－4梯度配製方法和－1、－2梯度的配製方法一樣
12，如果大腸初發酵產生氣泡，用接種筆沾一個產氣的液在伊紅美蘭平板上畫之字形然後放入培養箱中36C，24H＋－2H。（接種筆在每次使用前必須在酒精燈上消毒。所畫之形不能劃破伊紅美蘭瓊脂表面）
13，取出後在用接種筆在伊紅美蘭平板之字形上挑菌，放入乳糖復發酵管中，然後再培養36C＋－1C，24H＋＋－2H。
14，再在伊紅美蘭平板之字形上挑菌，放到載玻片上作鏡檢。（方法見標准）
15，只有鏡檢成紫紅色和乳糖復發酵管產氣同時成立的情況下，才能斷定這根管是不合格。
16，清洗消毒這根試管前必須進行消毒黴菌，121C，0。5小時同時不能放氣。

⑼ 大腸菌群檢測方法

GB 4789.3-2016 《食品安全國家標准 食品微生物學檢驗 大腸菌群計數》中的規定操作步驟：

1、乳糖發酵試驗：樣品稀釋後，選擇三個稀釋度，每個稀釋度接種三管乳糖膽鹽發酵管。36±1℃培養48±2h，觀察是否產氣。

2、分離培養：將產氣發酵管培養物轉種於伊紅美藍瓊脂平板上，36±1℃培養18-24h，觀察菌落形態。

3、證實試驗：挑取平板上的可疑菌落，進行革蘭氏染色觀察。同時接種乳糖發酵管36±1℃培養24±2h，觀察產氣情況。

SN0169-92 《中華人民共和國進出口商品檢驗行業標准出口食品中大腸菌群、糞大腸菌群和大腸桿菌檢驗方法》規定操作：

1、推測試驗：樣品稀釋後，選擇三個稀釋度，每個稀釋度接種三管LST肉湯。36±1℃培養48±2h，觀察是否產氣。

2、證實試驗：將產氣管培養物接種煌綠乳糖膽鹽（BGLB）肉湯管中，36±1℃培養48±2h，觀察是否產氣。以BGLB產氣為陽性。查MPN表，報告每ml(g)樣品中大腸菌群的MPN值。

(9)大腸菌群mpn檢測方法擴展閱讀：

大腸菌群並非細菌學分類命名，而是衛生細菌領域的用語，它不代表某一個或某一屬細菌，而指的是具有某些特性的一組與糞便污染有關的細菌，這些細菌在生化及血清學方面並非完全一致。一般認為該菌群細菌可包括大腸埃希氏菌、檸檬酸桿菌、產氣克雷白氏菌和陰溝腸桿菌等。

大腸菌群是作為糞便污染指標菌提出來的，主要是以該菌群的檢出情況來表示食品中有否糞便污染。大腸菌群數的高低，表明了糞便污染的程度，也反映了對人體健康危害性的大小。

糞便是人類腸道排泄物，其中有健康人糞便，也有腸道患者或帶菌者的糞便，所以糞便內除一般正常細菌外，同時也會有一些腸道致病菌存在，因而食品中有糞便污染，則可以推測該食品中存在著腸道致病菌污染的可能性，潛伏著食物中毒和流行病的威脅，必須看作對人體健康具有潛在的危險性。