『壹』 9種常見的原料葯晶型檢測方法
葯物分子通常以鹽類、多晶、共晶、無定形、水合物和溶劑合物等形式存在，不同晶型在晶體結構、穩定性、可生產性和生物利用度等方面存在顯著差異，直接影響葯物的療效和可開發性。
評估並選擇最佳葯物晶型進行研發至關重要，以避免在臨床後期發生晶型變化導致的上市延誤和經濟損失，甚至因晶型變化導致葯物被迫撤市。葯物晶型研究和葯物固態研發在制葯業中具有舉足輕重的地位。
1、X-射線衍射法（X-ray diffraction）
該方法是研究葯物晶型的主要手段，用於鑒別晶態和非晶態，確定晶體品種，區分混合物和化合物，測定葯物晶型結構和晶胞參數，以及比較不同晶型。粉末衍射和單晶衍射是其兩種形式，其中粉末衍射最常用。
2、紅外吸收光譜法
通過葯物分子中化學鍵的差異，紅外光譜可用於研究葯物多晶型。常用樣品制備方法有KBr壓片法、石蠟糊法、漫反射法和衰減全反射法。考慮到可能的晶型改變，石蠟油糊法和DRIFT是常用選擇。
3、熔點法和顯微鏡法
葯物晶型的不同可能導致熔點差異，熱載台顯微鏡可用於觀察晶體的相變、熔化、分解和重結晶過程。熔點差異是初步檢測多晶型存在的方法之一，但需結合其他方法進行確認。
4、熱分析法
包括差示掃描量熱法、差熱分析法和熱重分析法，用於分析不同晶型在升溫或冷卻過程中的吸、放熱差異。
5、偏光顯微鏡法
主要用於透明固體葯物的觀測，通過調整偏光鏡的角度，可觀察晶體在不同角度下的隱失和閃亮現象，從而決定晶體所屬的晶型。
6、核磁共振法
不同晶型結構中分子原子所處化學環境的細微差異導致其在核磁共振譜圖上出現不同的響應，通過比較不同晶型的譜圖，可判斷葯物是否存在多晶現象。
7、掃描隧道顯微鏡法
能夠直接觀察晶體表面的原子排列狀態和物理化學特性，用於研究晶體的晶格、原子排列、晶面缺陷等。
8、溶解度方法
不同晶型的自由能不同，導致溶解度不同。通過測定各晶型在不同溫度下的溶解度，可區分不同晶型並確定其熱力學轉變溫度。
9、計算機輔助預測
在已知固體葯物結構的前提下，利用商業程序Polymorph Predictor預測不同潔凈條件下的最可能生成的晶型。
10、其他方法
通過密度、折光率等物理性質的差異，以及使用磁性異向儀、膨脹計等儀器，或觀察葯物顏色，進行不同晶型的確定。隨著技術進步，新的方法可用於葯物晶型研究。
不同晶型確定方法的綜合運用，可全面認識葯物晶型。紅外與熱顯微鏡法，以及差示掃描量熱法與熱台顯微鏡法的聯用，體現了這一思路。
『貳』 葉酸的葯物鑒別
方法名稱：葉酸原料葯－葉酸－高效液相色譜法。應用范圍：該方法採用高效液相色譜法測定葉酸原料葯中葉酸的含量。該方法適用於葉酸原料葯。 供試品經氨溶液溶解後，用水定量稀釋，進入高效液相色譜儀進行色譜分離，用紫外吸收檢測器，於波長280nm處檢測葉酸的峰面積，計算出其含量。試劑： 1. 甲醇2．磷酸二氫鉀...3． 0.5mol/L四丁基氫氧化銨的甲醇溶液4．1mol/L磷酸溶液5. 氨試液6. 0.5%氨溶液儀器設備：1. 儀器1．1 高效液相色譜儀⒈ 2 色譜柱十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑。1．3 紫外吸收檢測器2． 色譜條件2．1 流動相：以磷酸鹽緩沖液（pH5.0)(取磷酸二氫鉀 2.0g，加水約650ml溶解，加0.5mol/L四丁基氫氧化銨的甲醇溶液15ml、1mol/L磷酸溶液7ml與甲醇270ml，放冷，用1mol/L磷酸溶液或氨試液調節pH值至5.0，用水稀釋至1000ml）2．2 檢測波長：280nm流速：每分鍾1.2ml2．3 柱溫：室溫試樣制備：避光操作1. 對照品溶液的制備取葉酸對照品約10mg，精密稱定，置50mL量瓶中，加0.5%氨溶液約30mL溶解後，用水稀釋至刻度，搖勻，即為對照品溶液。2． 供試品溶液的制備取供試品約10mg，同上操作。註：「精密稱取」系指稱取重量應准確至所稱取重量的千分之一。「精密量取」系指量取體積的准確度應符合國家標准中對該體積移液管的精度要求。操作步驟：分別精密量取對照品溶液和供試品溶液各10μl，注入高效液相色譜儀，用紫外吸收檢測器於波長280nm處測定葉酸（C19H19N7O6）的峰面積，計算出其含量。參考文獻：中華人民共和國葯典，國家葯典委員會編，中國醫葯科技出版社，2010版(第一增補本），p.330。
『叄』 煙酸原料葯的鑒別試驗的注意事項
1. 煙酸，亦稱為維生素B3，是一種白色晶體或白色結晶性粉末，具有耐熱性並能升華。它還被稱為尼克酸或抗糙皮病因子。在人體內，煙酸包括其衍生物煙醯胺或尼克醯胺。煙酸是人體必需的13種維生素之一，屬於水溶性維生素，並歸屬於維生素B族。
2. 煙酸的鑒別試驗包括以下幾個步驟：
- 取一定量的煙酸樣品，加入2,4-二硝基氯苯並研磨成粉末。取10毫克該粉末放入試管中，使用文火加熱至完全熔化，然後繼續加熱數秒鍾後冷卻。
- 向冷卻後的混合物中加入3毫升氫氧化鉀的乙醇試液(TS-190)。觀察到應出現深紅色。
- 將大約50毫克的煙酸樣品溶於20毫升水中，使用0.1mol/L氫氧化鈉溶液中和至石蕊試紙顯示中性，然後加入3毫升硫酸銅試液(TS-78)。應逐漸形成藍色沉澱。
- 對經過105℃乾燥1小時的試樣的礦物油分散體進行紅外吸收光譜分析。其峰值波長應與同樣處理的葯典級參比標准樣品相匹配。
- 配製濃度為20μg/ml的煙酸水溶液，在1厘米的池中測定其237nm和262nm波長處的吸光度，以水作為空白對照液。計算A237/A262的比值，結果應在0.35至0.39之間。