㈠ elisa有幾種類型,原理是什麼
1、類型
夾心法常用於檢測大分子抗原,將具有專一性的抗體固著於塑膠孔盤上,完成後洗去多餘抗體,重復兩次,洗去多餘未鍵結二次抗體,加入酶底物使酵素呈色,以肉眼或儀器讀取呈色結果。
間接法常用於檢測抗體,將已知的抗原固著於塑膠孔盤上,完成後洗去多餘的抗原,重復兩次。洗去多餘未鍵結二次抗體,加入酶底物使酶呈色,藉儀器測定塑膠盤中的吸光值,以評估有色終產物的含量即可測量待測抗體的含量。
競爭法是一種較少用到的ELISA檢測機制,一般用於檢測小分子抗原,將具有專一性的抗體固著於塑膠孔盤上,完成後洗去多餘抗體;加入待測檢體、帶有酶的抗原,與塑膠孔盤上的抗體專一性鍵結。塑膠孔盤上固著抗體數量有限,檢體中抗原量越多,帶有酶的抗原可鍵結固著抗體就越少。
2、原理
在測定時把受檢標本和酶標抗原或抗體,按不同步驟與固相載體表面抗原或抗體起反應。用洗滌方法使固相載體上的抗原抗體復合物與其他物質分開,最後結合在固相載體上的酶量與標本中受檢物質的量成一定的比例。
加入酶反應的底物後,底物被酶催化變為有色產物,產物的量與標本中受檢物質的量直接相關,故可根據顏色反應的深淺有無定性或定量分析。
(1)採用專一抗體檢測的方法擴展閱讀:
Elisa應用
Elisa生物試驗敏感性高,特異性強,重復性好。由於其試劑穩定、易保存,操作簡便,結果判斷較客觀等因素,已廣泛應用在免疫學檢驗的各領域中。ELISA檢測試劑盒適用於體外定性檢測人血清或血漿中的抗人類戊型肝炎(HEV)病毒 IgM 抗體ELISA檢測。