葯物微生物檢測方法葯典

Ⅰ 2010年版葯典中微生物檢驗有哪些更新

2005版葯典與2010版的區別（共32處）
1. 2010版葯典增加對人員的要求
2. 無菌檢查人員必須具備微生物專業知識，並經過無菌技術的培訓。
3. 2010版葯典規定了防止污染的措施不得影響供試品中微生物的檢出
4. 2010版葯典規定了日常檢驗還需要對環境進行監控
5. 對於選擇性培養基，葯典2010版去掉了中和劑的規定性推薦。其用量同驗證試驗。
6. 培養基 葯典2010版刪除了硫乙醇酸鹽流體培養基用於培養好氧菌、厭氧菌的規定
7. 刪除了改良馬丁培養基用於培養真菌的規定
8. 對於菌液制備中 葯典2010版增加了「菌懸液在室溫下放置應在2小時內使用，若在2~8℃可在24小時內使用。黑麴黴孢子懸液可保存在2~8℃，在驗證的貯存期內使用。」
9. 葯典2010版修訂了黑麴黴的孢子懸液制備方法，規定應使用含0.05％（v/v）聚山梨酯80的0.9％無菌氯化鈉溶液稀釋
10. 在稀釋液、沖洗液及其制備方法中，葯典2010版增加了「3.根據供試品的特性，可選用其他經驗證過的適宜的溶液作為稀釋液，沖洗液」
11. 在方法驗證中，2010版葯典將「該葯品」改為「該產品」。 應為醫療器具擴大適用范圍。
12. 在方法驗證中的菌種及菌液制備，2010版葯典將大腸埃希菌（Escherichia coli）[CMCC（B）4 ]的菌液制備。
13. 在方法驗證中的薄膜過濾法中，2010版葯典，增加了「取每種培養基規定接種的供試品總量按薄膜過濾法過濾」即明確了2005版葯典的「將規定量的供試品按…..」。
14. 去掉了「或使用中和劑如β-內醯胺酶、對氨基苯甲酸」
15. 在檢驗量中，2010版葯典去掉了「採用直接接種法時」
16. 在陽性對照中，2010版葯典去掉了「（大腸埃希氏菌的菌液制備…..的靈敏度檢查中的金黃色葡萄球菌）」將2005版的「陽性對照菌的菌懸液制備同培養基靈敏度檢查」改成了「陽性對照菌的菌懸液制備同方法驗證試驗，」。
17. 在陰性對照中，2010版葯典去掉了「且對微生物生長及存活無影響」,改成了「對微生物無毒性」
18. 在水溶液供試品中，2010版葯典增加了「所用的沖洗量，沖洗方法同方法驗證試驗。」
19. 薄膜過濾法中：2010版葯典增訂了抗生素供試品應選擇低吸附的濾器及濾膜的規定
20. 薄膜過濾法中：2010版葯典對每片濾膜的總沖洗量進行了規定，不得超過1000ml
21. 薄膜過濾法中：2010版葯典修訂了無菌氣（噴）霧劑供試品的檢驗方法，規定冰室的溫度應至少為-20℃
22. 對裝有葯物的注射器供試品的檢驗方法進行了詳細的規定
23. 在直接接種法中，2010版葯典刪除了「每隻（或瓶）」
24. 在直接接種法中，2010版葯典刪除了「每種培養基接種的管數同供試品的檢驗數量」
25. 在直接接種法中，2010版葯典刪除了「β-內醯胺類或磺胺類供試品：取規定量，混合，加入適量的無菌β-內醯胺酶溶液或對氨基苯甲酸溶液使中和，接種至各管培養基中。或直接接入含β-內醯胺酶或對氨基苯甲酸的各管培養基中。」改為「有抑菌活性的供試品 取規定量，混合，加入適量的無菌中和劑或滅火劑，然後接種至各管培養基中。或直接接入環適量中和劑或滅活劑的各管培養基中。」
26. 對於培養14天後，不能從外觀上判斷有無微生物生長的情況，刪除了可劃線接種於斜面培養基上的規定，同時刪除了可根據斜面是否有菌生長而判斷的規定
27. 在結果判斷中，2010版葯典，強調性增加了：「陽性對照管應生長良好，陰性對照管不得有菌生長。否則，試驗無效。」。刪除了「（3）因性對照管有菌生長」
28. 表1 修訂了注釋項，對供試品容器裝量不夠接種兩種培養基的情況，明確規定最少檢驗數量應加倍
29. 表2 修訂了表格名稱，明確了該表格用於確定液體制劑的最少檢驗量
30. 修訂了注釋項，對供試品容器裝量不夠接種兩種培養基的情況，明確 規定最少檢驗數量應加倍
31. 表3 修訂了表格名稱，明確了該表格用於確定固體制劑的最少檢驗量
32. 修訂了注釋項，對供試品容器裝量不夠接種兩種培養基的情況，明確 規定最少檢驗數量應加倍

Ⅱ 中國葯典微生物限度檢查法的微生物限度標准

非無菌葯品的微生物限度標準是基於葯品的給葯途徑及對患者健康潛在的危害而制訂的。葯品的生產、貯存、銷售過程中的檢驗，原料及輔料的檢驗，新葯標准制訂，進口葯品標准復核，考察葯品質量及仲裁等，除另有規定外，其微生物限度均以本標准為依據。 細菌數每1g不得過l000cfu。每lml不得過100cfu。
黴菌和酵母菌數每lg或lml不得過100cfu。
大腸埃希菌每1g或lml不得檢出. 3.1用於手術、燒傷及嚴重創傷的局部給葯制劑應符合無菌檢查法規定。
3.2耳、鼻及呼吸道吸入給葯制劑
細菌數每1g、lml或l0cm²，不得過100cfu。
黴菌和酵母菌數每1g、lml或l0cm²，不得過10cfu。
金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌每1g、lml或l0cm²不得檢出。
大腸埃希菌鼻及呼吸道給葯的制劑，每1g、lml或l0cm²，不得檢出。
3.3陰道、尿道給葯制劑
細菌數每1g、lml或l0cm²，不得過100cfu。
黴菌數和酵母菌數每1g、lml或l0cm²應小於10cfu。
金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌、白色念珠菌每1g、lml或l0cm²，不得檢出。
3 .4直腸給葯制劑
細菌數每1g不得過l000cfu。每lml不得過100cfu。
黴菌和酵母菌數每1g或lml不得過100cfu。
金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌每lg或lml不得檢出。
3.5其他局部給葯制劑
細菌數每1g、lml或l0cm²不得過100cfu。
黴菌和酵母菌數每1g、lml或l0cm²不得過100cfu。
金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌每1g、lml或l0cm²不得檢出。 參照相應制劑的微生物限度標准執行。
注1：本檢查法中白色念珠菌檢查所描述該菌在念珠菌顯色培養基上的菌落特徵，是指該菌在法國科瑪嘉公司提供的科瑪嘉念珠菌顯色培養基上生長的菌落特徵。給出這一信息是為了方便本方法的使用者，並不表示對該公司產品的認可．若其他等效產品具有相同的效果，那麼也可使用其他等效的產品。
以上文中方法中提到的「無菌檢查法（附錄XII A）」為《中國葯典》2010版二部附錄XII A無菌檢查法。

Ⅲ 葯典規定口服葯物不需要的微生物檢查項目是

《中國典》2015年版微生物限度檢查法修訂後將分為三個附錄：

1、非無菌品微生物限度檢查：微生物計數法

2、非無菌品微生物限度檢查：控制菌檢查法

3、非無菌品微生物限度標准。

修訂後的微生物限度檢查法暫不收載於《中國典》2010年版第二增補本而將直接收載《中國典》2015年版，在正式實施前的公示期內將進一步完善以保證方法的適應性和可操作性。

非無菌品微生物限度標準的整合、修訂

1、典委員會微生物專業委員會的修訂思路

2、修訂後限度標準的總體結構

3、修訂後限度標准各項具體規定

典委員會微生物專業委員會的修訂思路

修訂思路

(1) 2010版中國典一、二、三部微生物限度本中項目的對比、整合

整合：採用一部的項目作為合並後限度標準的基礎

(2)與美、歐、日典比較，修訂中國典的微生物限度標准

1、參照歐、美、日典一致的表示形式，採用較清晰直觀的表格形式列出各類品和原敷料的微生物限度標准

2、菌數計數結果以10n表示；

3、以「需氧菌總數」取代「細菌數」，以「耐膽鹽革蘭陰性菌」取代「大腸菌群」

2、修訂後限度標準的總體結構（共9項、4個表）

1、制劑通則、品種項下要求無菌的制劑及標示無菌的制劑和原輔料應符合無菌檢查法的規定

2、用於、燒傷或嚴重創傷的局部給制劑應符合無菌檢查法的規定

3、非無菌化學品及生物製品制劑的微生物限度標准

4、非無菌不含材原粉的中制劑微生物限度標准

5、非無菌含材原粉的中制劑微生物限度標准

6、非無菌的用原料及輔料微生物限度標准

7、中提取物及中飲片的微生物限度標准

8、有兼用途徑的制劑應符合各給途徑的標准

9、霉變、長蟎者以不合格論

2015版微生物限度標準的特點及展望

特點：

1、很好地分析、匯總了現一、二、三部的限度標準的項目

能考慮和前向性地制訂符合我國傳統中特點的微生物限度標准

2、化學、生物製品的限度標准（菌數及控制菌）已與美、歐、日典的限度標准一致或更嚴格

3、新設立的中提取物和中飲片的微生物限度標准（僅規定了控制菌），菌數計數限度等待調研數據

展望：

1、結合GMP管理的步伐，進一步合理制定含材原粉的中制劑的微生物限度標准

2、在開展課題積累數據、區分用法的基數上完善中提取物、中飲片、草的微生物限度標准

Ⅳ 2015版葯典微生物限度結果判斷的標准怎麼理解

2015版《中國葯典》即將公布，新修訂的《中國葯典》對葯品微生物檢驗和檢定方法發生了重大變化。著重解決葯品微生物相關檢查方法及微生物限度標准與歐美等葯典的協調統一問題。

2015版《中國葯典》即將公布，新修訂的《中國葯典》對葯品微生物檢驗和檢定方法發生了重大變化，本次修訂是對《中國葯典》多年來固有的微生物檢查系統進行根本性的調整，著重解決葯品微生物相關檢查方法及微生物限度標准與歐美等葯典的協調統一問題。
宏觀變化一：全面與國際接軌
以無菌檢查法為例

Ⅳ 中國葯典中葯物微生物檢測在哪部

你好，微生物檢測方法在中國葯典2010年版二部附錄XI J，具體方法為附錄XI J微生物限度檢查法
微生物限度檢査法系檢查非規定滅菌制劑及其原料、輔
料受微生物污染程度的方法。檢查項目包括細菌數、黴菌數、
酵母菌數及控制菌檢查。
微生物限度檢查應在環境潔凈度10 000級下的局部潔
凈度100級的單向流空氣區域內進行。檢驗全過程必須嚴格
遵守無菌操作，防止再污染，防止污染的措施不得影響供試品
中微生物的檢出。單向流空氣區域、工作檯面及環境應定期
按《醫葯工業潔凈室（區）懸浮粒子、浮游菌和沉降菌的測試方
法》的現行國家標准進行潔凈度驗證。
供試品檢查時，如果使用了表面活性劑、中和劑或滅活
劑，應證明其有效性及對微生物無毒性。
除另有規定外，本檢査法中細菌及控制菌培養溫度為
30〜35°C;黴菌、酵母菌培養溫度為23〜28°C
檢驗結果以lg,lml、10g、10ml或10cm
2為單位報告，特
殊品種可以最小包裝單位報告。
檢驗量
檢驗量即一次試驗所用的供試品量(g、ml或cm
2
)。
除另有規定外，一般供試品的檢驗量為10g或10ml;膜劑
為100cm
2
»貴重葯品、微量包裝葯品的檢驗量可以酌減。要
求檢查沙門菌的供試品，其檢驗量應增加20g或20ml(其中
10g或10ml用於陽性對照試驗）。
檢驗時，應從2個以上最小包裝單位中抽取供試品，膜劑
還不得少於4片。
一般應隨機抽取不少於檢驗用量（兩個以上最小包裝單
位）的3倍量供試品。
供試液的制備
根據供試品的理化特性與生物學特性，採取適宜的方法
制備供試液。供試液制備若需加溫時，應均勻加熱，且溫度不
應超過451C。供試液從制備至加人檢驗用培養基，不得超過
1小時。
除另有規定外，常用的供試液制備方法如下。
1. 液體供試品
取供試品10ml ，加pH7.0無菌氯化鈉-蛋白腖緩沖液至
100ml，混勻，作為1 ： 10的供試液。油劑可加人適量的無菌
聚山梨酯80使供試品分散均勻。水溶性液體制劑也可用混
合的供試品原液作為供試液。
2. 固體、半固體或黏稠性供試品
取供試品10g ，加PH7.0無菌氯化鈉-蛋白腖緩沖液至
100ml，用勻漿儀或其他適宜的方法，混勻，作為1 ： 10的供試
液。必要時加適量的無菌聚山梨酯80，並置水浴中適當加溫
使供試品分散均勻。
3. 需用特殊方法制備供試液的供試品
(1) 非水溶性供試品
方法1取供試品5g(或5ml)，加至含溶化的（溫度不超
過45'C)5g司盤80、3g單硬脂酸甘油酯、10g聚山梨酯80無
菌混合物的燒杯中，用無菌玻棒攪拌成團後，慢慢加人45"的
pH7. 0無菌氯化鈉-蛋白腖緩沖液至100ml，邊加邊攪拌，使供
試品充分乳化，作為1 ： 20的供試液。
方法2 取供試品10g，加至含20ml無菌十四烷酸異丙
酯（製法見附錄H H無菌檢査法中供試品的無菌檢查項下）
和無菌玻璃珠的適宜容器中，必要時可增加十四烷酸異丙酯
的用量，充分振搖，使供試品溶解。然後加人45\：的pH7.0
無菌氯化鈉-蛋白腖緩沖液100ml,振搖5〜：L0分鍾，萃取，靜
置使油水明顯分層，取其水層作為1 •• 10的供試液。
(2) 膜劑供試品.
取供試品100cm
2
，剪碎，加pH7.0無菌氯化鈉-蛋白腖緩
沖液lOOmK必要時可增加稀釋液），浸泡，振搖，作為1 ： 10的
供試液(3) 腸溶及結腸溶制劑供試品
取供試品10g,加pH6. 8無菌磷酸鹽緩沖液（用於腸溶制
劑）或pH7. 6無菌磷酸鹽緩沖液（用於結腸溶制劑）至100ml，
置45t:水浴中，振搖，使溶解，作為1 :
10的供試液。
(4) 氣霧劑、噴II劑供試品
取規定量供試品，置冰凍室冷凍約1小時，取出，迅速消
毒供試品開啟部位，用無菌鋼錐在該部位鑽一小孔，放至室
溫，並輕輕轉動容器,使拋射劑緩緩全部釋出。用無菌注射器
吸出全部葯液，加至適量的PH7. 0無菌氯化鈉-蛋白腖緩沖液
(若含非水溶性成分，加適量的無菌聚山梨酯80)中，混勻，取
相當於10g或10ml的供試品，再稀釋成1 ： 10的供試液。
(5) 貼劑供試品
取規定量供試品，去掉貼劑的保護層，放置在無菌玻璃或
塑料片上，粘貼面朝上。用適宜的無菌多孔材料（如無菌紗
布）覆蓋貼劑的粘貼面以避免貼劑粘貼在一起。然後將其置
於適宜體積並含有表面活性劑（如聚山梨酯80或卵磷脂）的
稀釋劑中，用力振盪至少30分鍾，製成供試液。貼劑也可采
用其他適宜的方法制備成供試液。
(6) 具抑菌活性的供試品
當供試品有抑菌活性時，採用下列方法進行處理，以消除
供試液的抑菌活性，再依法檢查。常用的方法如下。
① 培養基稀釋法取規定量的供試液，至較大量的培養
基中，使單位體積內的供試品含量減少，至不含抑菌作用。測
定細菌、黴菌及酵母菌的菌數時，取同稀釋級的供試液2ml,每
lml供試液可等量分注多個平皿，傾注瓊脂培養基,混勻，凝固，
培養，計數。每lml供試液所注的平皿中生長的菌落數之和即
為lml的菌落數，計算每lml供試液的平均菌落數，按平皿法
計數規則報告菌數;控制菌檢查時，可加大增菌培養基的用量。
② 離心沉澱法取一定量的供試液，500轉/分鍾離心3
分鍾，取全部上清液混合。用於細菌檢査。
③ 薄膜過濾法見細菌、黴菌及酵母菌計數項下的"薄
膜過濾法"。
④ 中和法凡含汞、砷或防腐劑等具有抑菌作用的供試
品，可用適宜的中和劑或滅活劑消除其抑菌成分。中和劑或
滅活劑可加在所用的稀釋液或培養基中。

Ⅵ 中國葯典微生物限度檢查法的控制菌檢查

控制菌檢查用的培養基應進行培養基的適用性檢查，成品培養基、由脫水培養基或按處方配製的培養基均應檢查。菌種
對試驗菌種的要求同計數培養基的適用性檢查。
大腸埃希菌（Escherichia coli）[CMCC ( B ) 44l02]
金黃色葡萄球菌（StapHylococcus aureus）[ CMCC ( B ) 26003 ]
乙型副傷寒沙門菌（Salmonella paratypHi B )〔CMCC ( B ) 50094〕
銅綠假單胞菌（Pseudomonas aeruginosa）〔CMCC ( B ) 10104〕
生孢梭菌（Clostridium sporogenes ) [ CMCC ( B ) 6494l]
白色念珠菌（Candida albicans）〔CMCC ( F ) 98001〕
菌液制備
接種大腸埃希菌、金黃色葡萄球菌、乙型副傷寒沙門菌、銅綠假單胞菌的新鮮培養物至營養肉湯培養基中或營養瓊脂培養基上，生孢梭菌的新鮮培養物至硫乙醇酸鹽流體培養基中，培養18～24小時；接種白色念珠菌的新鮮培養物至改良馬丁培養基中或改良馬丁瓊脂培養基上，培養24～48小時。用0.9%無菌氯化鈉溶液製成每lml含菌數為10～100cfu的菌懸液。
菌懸液在室溫下放置應在2小時內使用．若保存在2～8 ℃可在24小時內使用。
適用性檢查
控制菌檢查用培養基的適用性檢查項目包括促生長能力、抑制能力及指示能力的檢查。各培養基的檢測項目及所用菌株見表2。
表2 控制菌檢查用培養基的促生長能力、抑制能力及指示能力檢查 控制菌檢查 培養基 特性 試驗菌株 大腸埃希菌 膽鹽乳糖培養基 促生長能力 大腸埃希菌 抑制能力 金黃色葡萄球菌 4-甲基傘形酮葡糖苷酸培養基 促生長能力+指示能力 大腸埃希菌 曙紅亞甲藍瓊脂培養基或麥康凱瓊脂培養基 促生長能力+指示能力 大腸埃希菌 大腸菌群 乳糖膽鹽發酵培養基 促生長能力 大腸埃希菌 抑制能力 金黃色葡萄球菌 乳糖發酵培養基 促生長能力+指示能力 大腸埃希菌 曙紅亞甲藍瓊脂培養基或麥康凱瓊脂培養基 促生長能力+指示能力 大腸埃希菌 沙門菌 營養肉湯培養基 促生長能力 乙型副傷寒沙門菌 四硫磺酸鈉亮綠培養基 促生長能力 乙型副傷寒沙門菌 抑制能力 金黃色葡萄球菌 膽鹽硫乳瓊脂培養基或沙門、志賀菌屬瓊脂培養基 促生長能力+指示能力 乙型副傷寒沙門菌 曙紅亞甲藍瓊脂培養基或麥康凱瓊脂培養基 促生長能力+指示能力 乙型副傷寒沙門菌 三糖鐵瓊脂培養基 指示能力 乙型副傷寒沙門菌 銅綠假單胞菌 膽鹽乳糖培養基 促生長能力 銅綠假單胞菌 抑制能力 金黃色葡萄球菌 溴化十六烷基三甲銨瓊脂培養基 促生長能力 銅綠假單胞菌 抑制能力 大腸埃希菌 綠膿菌素測定用培養基 促生長能力+指示能力 銅綠假單胞菌 金黃色葡萄球菌 亞碲酸鹽肉湯培養基 促生長能力 金黃色葡萄球菌 抑制能力 大腸埃希菌 卵黃氯化鈉瓊脂培養基或甘露醇氯化鈉瓊脂培養基 促生長能力 金黃色葡萄球菌 抑制能力 大腸埃希菌 梭菌 梭菌增菌培養基 促生長能力 生孢梭菌 哥倫比亞瓊脂培養基 促生長能力 生孢梭菌 白色念珠菌 沙氏葡萄糖液體培養基 促生長能力 白色念珠菌 沙氏葡萄糖瓊脂培養基 促生長能力+指示能力 白色念珠菌 念珠菌顯色培養基 促生長能力+指示能力 白色念珠菌 抑制能力 大腸埃希菌 1%聚山梨酯80-玉米瓊脂培養基 促生長能力+指示能力 白色念珠菌 液體培養基促生長能力檢查
分別接種不大於100cfu的試驗菌（表2） 於被檢培養基和對照培養基中，在相應控制菌檢查規定的培養溫度及最短培養時間下培養。與對照培養基管比較，被檢培養基管試驗菌應生長良好。
固體培養墓促生長能力檢查
取試驗菌各0.1ml（含菌數50～100cfu）分別塗布於被檢培養基和對照培養基平板上，在相應控制菌檢查規定的培養溫度及最短培養時間下培養。被檢培養基與對照培養基上生長的菌落大小、形態特徵應一致。
培養基抑制能力檢查
接種不少於100cfu的試驗菌（表2）於被檢培養基中，在相應控制菌檢查規定的培養溫度及最長時間下培養，試驗菌應不得生長。
固體培養基指示能力檢查
取試驗菌各0.1ml（含菌數不大於100cfu )（表2）分別塗布於被檢培養基和對照培養基平板上，在相應控制菌檢查規定的培養溫度及時間下培養。被檢培養基上試驗菌生長的菌落大小、形態特徵、指示劑反應情況等應與對照培養基一致。
液體培養基指示能力檢查
分別接種不大於100cfu的試驗菌（表2）於被檢培養基和對照培養基中，在相應控制菌檢查規定的培養溫度及最短培養時間下培養。與對照培養基管比較，被檢培養基管試驗菌生長情況、指示劑反應等應與對照培養基一致。 當建立產品的微生物限度檢查法時，應進行控制菌檢查方法的驗證，以確認所採用的方法適合於該產品的控制菌檢查。若產品的組分或原檢驗條件發生改變可能影響檢驗結果時，檢查方法應重新驗證。
驗證時，依各品種項下微生物限度標准中規定檢查的控制菌選擇相應驗證的菌株，驗證大腸菌群檢查法時，採用大腸埃希菌作為驗證菌株。驗證試驗按供試液的制備和控制菌檢查法的規定及下列要求進行。
菌種及菌液制備
同控制菌檢查用培養基的適用性檢查。
驗證方法
取規定量供試液及10～100cfu試驗菌加入增菌培養基中，依相應控制菌檢查法進行檢查。當採用薄膜過濾法時．取規定量供試液，過濾，沖洗，試驗菌應加在最後一次沖洗液中，過濾後，注入增菌培養荃或取出濾膜接人增菌培養基中。
結果判斷
若上述試驗檢出試驗菌，按此供試液制備法和控制菌檢查法進行供試品的該控制菌檢查；若未檢出試驗菌，應採用培養基稀釋法、離心沉澱法、薄膜過濾法、中和法等方法或聯合使用這些方法消除供試品的抑菌活性，並重新進行方法驗證。
驗證試驗也可與供試品的控制菌檢查同時進行。 供試品的控制菌檢查應按已驗證的方法進行。
陽性對照試驗
陽性對照試驗方法同供試品的控制菌檢查，對照菌的加菌量為10～10Ocfu。陽性對照試驗應檢出相應的控制菌。
陰性對照試驗
取稀釋液10ml照相應控制菌檢查法檢查，作為陰性對照。陰性對照應無菌生長，
（1）大腸埃希菌（Escherichia coli）取供試液10ml（相當於供試品lg、lml、10cm²)，直接或處理後接種至適量（不少於100ml）的膽鹽乳糖培養基中，培養18～24小時，必要時可延長至48小時。
取上述培養物0.2ml，接種至含5ml MUG培養基的試管內，培養，於5小時、24小時在366nm紫外光下觀察，同時用未接種的MUG培養基作本底對照。若管內培養物呈現熒光，為MUG陽性；不呈現熒光，為MUG陰性。觀察後，沿培養管的管壁加人數滴靛基質試液，液面呈玫瑰紅色，為靛基質陽性；呈試劑本色，為靛基質陰性。本底對照應為MUG陰性和靛基質陰性。
如MUG陽性、靛基質陽性，判供試品檢出大腸埃希菌；如MUG陰性、靛基質陰性，判供試品未檢出大腸埃希菌；如MUG陽性、靛基質陰性，或MUG陰性、靛基質陽性，則應取膽鹽乳糖培養基的培養物劃線接種於曙紅亞甲藍瓊脂培養基或麥康凱瓊脂培養基的平板上，培養18～24小時。
若平板上無菌落生長或生長的菌落與表3所列的菌落形態特徵不符，判供試品未檢出大腸埃希菌。若平板上生長的菌落與表3所列的菌落形態特徵相符或疑似，應進行分離、純化、染色鏡檢和適宜的鑒定試驗，確認是否為大腸埃希菌。
表3 大腸埃希菌菌落形態特徵 培養基 菌落形態 曙紅亞甲藍瓊脂 紫黑色、淺紫色、藍紫色或粉紅色，菌落中心呈深紫色或無明顯暗色中心，圓形，稍凸起，邊緣整齊，表面光滑，濕潤，常有金屬光澤 麥康凱瓊脂 鮮桃紅色或微紅色，菌落中心呈深桃紅色，圓形，扁平，邊緣整齊，表面光滑，濕潤 （2）大腸菌群（Coliform）取含適量（不少於10ml )的乳糖膽鹽發酵培養基管3支，分別加入1 :10的供試液lml（含供試品0.1g或0.1ml）、1: 100的供試液1ml（含供試品0.01g或0.01ml）、1:1000的供試液1 ml（含供試品0.001g或0.001ml），另取1支乳糖膽鹽發酵培養基管加人稀釋液1ml作為陰性對照管。培養18～24小時。
乳糖膽鹽發酵管若無菌生長或有菌生長但不產酸產氣，判該管未檢出大腸菌群；若產酸產氣，應將發酵管中的培養物分別劃線接種於曙紅亞甲藍瓊脂培養基或麥康凱瓊脂培養墓的平板上，培養18～24小時。
若平板上無菌落生長，或生長的菌落與表4所列的菌落形態特徵不符或為非革蘭氏陰性無芽抱桿菌，判該管未檢出大腸菌群；若平板上生長的菌落與表4所列的菌落形態特徵相符或疑似，且為革蘭氏陰性無芽抱桿菌，應進行確證試驗。表4 大腸菌群菌落形態特徵 培養基 菌落形態 曙紅亞甲藍瓊脂 紫黑色、紫紅色、紅色或粉紅色，圓形，扁平或稍凸起，邊緣整齊．表面光滑，濕潤 麥康凱瓊脂 鮮桃紅色或粉紅色，圓形，扁平或稍凸起，邊緣整齊，表面光滑，濕潤 確證試驗從上述分離平板上挑選4～5個疑似菌落，分別接種於乳糖發酵管中，培養24～48小時。若產酸產氣，判該乳糖膽鹽發醉管檢出大腸菌群，否則判未檢出大腸菌群。
根據大腸菌群的檢出管數，按表5報告lg或lml供試品中的大腸菌群數。
表5 可能的大腸菌群數 各供試品量的檢出結果 可能的大腸菌群數N（個/g或ml ) 0.1g或0.1ml 0.01g或0.01ml 0.01g或0.01ml + + + > 10³ + + 10²< N < 10³ + ― ― 10 < N < 10² ― ― ― < 10 註：+代表檢出大腸菌群；―代表未檢出大腸菌群．
（3）沙門菌（salmonella）取供試品10g或10ml ,直接或處理後接種至適量（不少於200ml）的營養肉湯培養基中，用勻漿儀或其他適宜方法混勻，培養18～24小時。
取上述培養物1ml，接種於10 ml四硫磺酸鈉亮綠培養基中，培養18～24小時後，分別劃線接種於膽鹽硫乳瓊脂（或沙門、志賀菌屬瓊脂）培養基和麥康凱瓊脂（或曙紅亞甲藍瓊脂）培養基的平板上，培養18～24小時（必要時延長至40～48小時）。若平板上無菌落生長或生長的菌落不同於表6所列的特徵，判供試品未檢出沙門菌。
若平板上生長的菌落與表6所列的菌落形態特徵相符或疑似，用接種針挑選2～3個菌落分別於三糖鐵瓊脂培養基高層斜面上進行斜面和高層穿刺接種，培養18～24小時，如斜面未見紅色、底層未見黃色；或斜面黃色、底層無黑色，判供試品未檢出沙門菌。否則，應取三糖鐵瓊脂培養基斜面的培養物進行適宜的鑒定試驗，確認是否為沙門菌。
表6 沙門菌菌落形態特徵 培養基 菌落形態 膽鹽硫乳瓊脂 無色至淺橙色，半透明，菌落中心帶黑色或全部黑色或無黑色 沙門、志賀菌屬瓊脂 無色至淡紅色，半透明或不透明，菌落中心有時帶黑褐色 曙紅亞甲藍瓊脂 無色至淺橙色．透明或半透明，光滑濕潤的圓形菌落 麥康凱瓊脂 無色至淺橙色，透明或半透明，菌落中心有時為暗色 （4）銅綠假單胞菌（Pseudomonas aeruginosa）取供試液10ml（相當於供試品1g、lml、10cm²)，直接或處理後接種至適量（不少於100ml）的膽鹽乳糖培養基中，培養18～24小時。取上述培養物，劃線接種於溴化十六烷基三甲銨瓊脂培養基的平板上，培養18～24小時。
銅綠假單胞菌典型菌落呈扁平、無定形、周邊擴散、表面濕潤，灰白色，周圍時有藍綠色素擴散。如平板上無菌落生長或生長的菌落與上述菌落形態特徵不符，判供試品未檢出銅綠假單胞菌。如平板生長的菌落與上述菌落形態特徵相符或疑似，應挑選2～3個菌落，分別接種於營養瓊脂培養基斜面上，培養18～24小時。取斜面培養物進行革蘭氏染色、鏡檢及氧化酶試驗。
氧化酶試驗
取潔凈濾紙片置於平皿內，用無菌玻棒取斜面培養物塗於濾紙片上，滴加新配製的1%二鹽酸二甲基對苯二胺試液，在30秒內若培養物呈粉紅色並逐漸變為紫紅色為氧化酶試驗陽性，否則為陰性。
若斜面培養物為非革蘭氏陰性無芽抱桿菌或氧化酶試驗陰性，均判供試品未檢出銅綠假單胞菌。否則，應進行綠膿菌素試驗。
綠膿菌素（Pyocyanin）試驗
取斜面培養物接種於PDP瓊脂培養基斜面上，培養24小時，加三氯甲烷3～5ml至培養管中，攪碎培養基並充分振搖。靜置片刻，將三氯甲烷相移至另一試管中，加人lmol / L鹽酸試液約lml，振搖後，靜置片刻，觀察。若鹽酸溶液呈粉紅色，為綠膿菌素試驗陽性，否則為陰性。同時用未接種的PDP瓊脂培養基斜面同法作陰性對照，陰性對照試驗應呈陰性。
若上述疑似菌為革蘭氏陰性桿菌、氧化酶試驗陽性及綠膿菌素試驗陽性，判供試品槍出銅綠假單胞菌。若上述疑似菌為革蘭陰性桿菌、氧化酶試驗陽性及綠膿菌素試驗陰性，應繼續進行適宜的鑒定試驗，確認是否為銅綠假單胞菌。
( 5 )金黃色葡萄球菌（StapHylococcus aureus）取供試液l0ml（相當於供試品1g、lml、l0cm²)，直接或處理後接種至適見（不少於100ml）的亞碲酸鈉（鉀）肉湯（或營養肉湯）培養基中，培養18～24小時，必要時可延長至48小時。取上述培養物，劃線接種於卵黃氯化鈉瓊脂培養基或甘露醇氯化鈉瓊脂培養基的平板上，培養24～72小時。若平板上無菌落生長或生長的菌落不同於表7所列特徵，判供試品未檢出金黃色葡萄球菌。
表7 金黃色葡萄球菌菌落形態特徵 培養基 菌落形態 甘露醇氯化鈉瓊脂 金黃色，圓形凸起，邊緣整齊，外圍有黃色環，菌落直徑0.7～lmm 卵黃氯化鈉瓊脂 金黃色，圓形凸起，邊緣整齊，外圍有卵磷脂分解的乳濁圈，菌落直徑1～2mm 若平板上生長的菌落與表7所列的菌落特徵相符或疑似，應挑選2～3個菌落，分別接種於營養瓊脂培養基斜面上，培養18～24小時。取營養瓊脂培養基的培養物進行革蘭氏染色．並接種於營養肉湯培養基中，培養18～24小時，做血漿凝固酶試驗。
血漿凝固酶試驗
取滅菌小試管3支，各加入血漿和無菌水混合液（1 : 1 ) 0.5ml，再分別加入可疑菌株的營養肉湯培養物（或由營養瓊脂培養基斜面培養物制備的濃菌懸液）0.5ml、金黃色葡萄球菌營養肉湯培養物（或由營養瓊脂培養基斜面培養物制備的濃菌懸液）0.5ml、營養肉湯或0.9%無菌氯化鈉溶液0.5ml ,即為試驗管、陽性對照管和陰性對照管。將3管同時培養，3小時後開始觀察直至24小時。陰性對照管的血漿應流動自如，陽性對照管血漿應凝固，若試驗管血漿凝固為血漿凝固酶試驗陽性，否則為陰性。如陽性對照管或陰性對照管不符合規定時，應另制備血漿，重新試驗。
若上述疑似菌為非革蘭氏陽性球菌、血漿凝固酶試驗陰性，判供試品未檢出金黃色葡萄球菌。
( 6 )梭菌（Clostridium）取供試液10ml（相當於供試品1g、lml、10cm²) 2份，其中l份置80 ℃保溫10分鍾後迅速冷卻。上述2份供試液直接或處理後分別接種至100ml的梭菌增菌培養基中。置厭氧條件下培養48小時。取上述每一培養物0.2ml，分別塗抹接種於含慶大黴素的哥倫比亞瓊脂培養基平板上，置厭氧條件下培養48～72小時。若平板上無菌落生長，判供試品未檢出梭菌；若平板上有菌落生長，應挑選2～3個菌落分別進行革蘭氏染色和過氧化氫酶試驗。
過氧化氫酶試驗
取七述平板上的菌落，置潔凈玻片上，滴加3%過氧化氫試液，若菌落表面有氣泡產生，為過氧化氫酶試驗陽性，否則為陰性。
若上述可疑菌落為革蘭氏陽性梭菌，有或無卵圓形或球形的芽孢，過氧化氫酶試驗陰性，判供試品檢出梭菌，否則判供試品未檢出梭菌。
( 7 )白色念珠菌（Candida albicans）取供試液10ml（相當於供試品1g、lml、l0cm²）直接或處理後接種至適量（不少於100ml）的沙氏葡萄糖液體培養基中，培養48～72小時。取上述培養物劃線接種於沙氏葡萄糖瓊脂培養基平板上，培養24～48小時（必要時延長至72小時）。
白色念珠菌在沙氏葡萄糖瓊脂培養基上生長的菌落呈乳白色，偶見淡黃色，表面光滑有濃酵母氣味，培養時間稍久則菌落增大，顏色變深、質地變硬或有皺褶。若平板上無菌落生長或生長的菌落與上述菌落形態特徵不符，判供試品未檢出白色念珠菌。如平板上生長的菌落與上述菌落形態特徵相符或疑似，應挑選2～3個菌落分別接種至念珠菌顯色培養基平板上 ，培養24～48小時（必要時延長至72小時）。若平板上無綠色或翠綠色的菌落生長，判供試品未檢出白色念珠菌。
若平板上生長的菌落為綠色或翠綠色．挑取相符或疑似的菌落接種於1%聚山梨酯80-玉米瓊脂培養基上．培養24～48小時。取培養物進行染色、鏡檢及芽管試驗。
芽管試驗
挑取l%聚山梨酯80-玉米瓊脂培養基上的培養物，接種於加有一滴血清的載玻片上，蓋上蓋玻片，置濕潤的平皿內，於35～37 ℃培養1～3小時，置顯微鏡下觀察孢子上有否長出短小芽管。
若上述疑似菌為非革蘭氏陽性菌，顯微鏡下未見厚膜孢子、假菌絲、芽管，判供試品未檢出白色念珠菌。 供試品檢出控制菌或其他致病菌時，按一次檢出結果為准，不再復試。
供試品的細菌數、黴菌和酵母菌數其中任何一項不符合該品種項下的規定，應從同一批樣品中隨機抽樣，獨立復試兩次，以3次結果的平均值報告菌數。
若供試品的細菌數、黴菌和酵母菌數及控制菌三項檢驗結果均符合該品種項下的規定，判供試品符合規定；若其中任何一項不符合該品種項下的規定．判供試品不符合規定。

Ⅶ 抗生素微生物檢定方法在葯典哪部里

抗生素微生物檢定管碟法在中國葯典中的應用及操作要點
錄入時間:2010-11-18 10:29:10 來源：青島海博

抗生素微生物檢定法可分為：（1）稀釋法；（2）比濁法；（3）瓊脂擴散法（管碟法和打孔法）。各國葯典通常採用後兩種方法測定抗生素的效價。
管碟法：利用抗生素在攤布特定試驗菌的固體培養基內成球面形擴散，形成含一定濃度抗生素球形區，抑制了試驗菌的繁殖而呈現出透明的抑菌圈。
此法系根據抗生素在一定濃度范圍內，對數劑量與抑菌圈直徑（面積）呈直線關系而設計，通過檢測抗生素對微生物的抑製作用，比較標准品與供試品產生抑菌圈的大小，計算出供試品的效價。
原理：利用抗生素在固體培養基中的平面擴散作用，依據量反應平行線原理並採用交叉實驗設計方法，在相同實驗條件下通過比較標准品（已知效價）和供試品兩者對所接種試驗菌產生的抑菌圈（直徑或面積）大小，來測定供試品效價的一種方法。
管碟法的操作步驟：
1、預試驗：確定最佳的試驗條件：調整試驗菌的濃度、使用量、抗生素終濃度、培養基等，使抑菌圈的大小符合規定：一劑量法中心點的抑菌圈直徑應在16～17.5mm，二劑量法高劑量濃度標准品溶液所致的抑菌圈直徑在18～22mm，三劑量法中間劑量濃度標准品溶液所致的抑菌圈直徑在15～18mm。
2、試驗准備：雙碟、鋼管、毛細滴管、吸管的清洗及滅菌；容量瓶、定量吸管的清洗；培養基、緩沖液的准備、半無菌間的紫外消毒等。
3、雙碟的制備：每隻雙碟加底層培養基約20ml，待培養基凝固後，將雙碟放入35～37℃培養箱中，待用。
4、供試品、標准品溶液的制備：估計供試品的效價，根據試驗要求設計供試品、標准品溶液稀釋步驟，平行制備供試品、標准品相關劑量的溶液。
5、菌層的制備：注意菌層培養基溫度；根據預試驗確定加入菌層培養基的菌液量，注意制備菌層的速度和平整度。
6、滴加抗生素溶液：注意標准品、供試品高、低劑量溶液滴加順序，保證滴加速度和加量的均勻一致。 7、雙碟的培養：根據培養溫度的要求在培養箱中進行培養，培養箱中水平碟放的雙碟數以不超過三層

為宜。
8、抑菌圈的測量：抑菌圈測量儀的使用，每組試驗雙碟應在相同的測量參數下進行測量。手工測量：游標卡尺
9、結果的可靠性檢驗及效價測定：抑菌圈測量儀提供計算結果或手工計算結果。 操作要點
第一步一般應製成500或1000單位/毫升的溶液，以後逐步稀釋至供試濃度的溶液，稀釋步驟應為3～4步。
溶解：對於需用乙醇溶解的樣品，由於溶解樣品時所用乙醇量較大，加滅菌水後溶液放熱，因此需充分搖勻後加滅菌水至接近容量瓶刻度，待冷至室溫後再稀釋至刻度。
標准品溶液與供試品溶液濃度的比值D應控制在±5%以內，以保證兩者濃度的偏差在一定范圍內。 試驗菌的菌齡對抑菌圈有一定影響。故檢定時應保持菌種及菌液的新鮮。
一般菌種一月轉種一次，冰箱冷藏保存。對易變異的菌株，如藤黃微球菌等在制備菌懸液前進行單菌分離；其他菌株可半年分離一次。
試驗菌傳代最好不超過5次，以防止菌種老化變異。芽孢桿菌培養物用滅菌水洗下後，應在65℃加熱30分鍾，使菌體的菌齡一致，用革蘭氏染色，應有芽孢85%以上。
加入菌懸液的體積，一般不少於0.3ml，並且不大於上層培養基體積的2%。如果加入菌懸液的體積過小，則在同次實驗中，不同次加入菌懸液的體積相差較大，造成實驗誤差；如果加入菌懸液的體積過大，則會使上層培養基變稀，並且因菌懸液的溫度較低，加至培養基中可能造成培養基結塊，影響測定結果。對於加入菌懸液體積的控制，可通過調節菌懸液的濃度來實現。
在制備菌層培養基時，將菌液加入菌層培養基後，立即充分搖勻，但應避免產生氣泡。
加入芽孢懸液時，菌層培養基的溫度為65℃，對非芽孢懸液時，菌層培養基的溫度一般為48～50℃。 放置孵箱培養時排放應不得超過三層，避免因培養溫度不均勻而導致各雙碟中抑菌圈大小不一。
抗生素原料葯：不含輔料的葯物制劑原料，一般其效價以純度（u/mg或?g/mg）表示。檢驗時，可參考該品種的葯品標准純度限度規定或廠方提供的純度估計效價，取樣試驗，如估計效價與實際效價相差較遠時，即測定所得效價超出估計效價的±10%時，則重新估計效價，再做准確測定。

粉針劑：指注射用無菌粉末或凍干品，用西林瓶橡膠塞鋁蓋封裝或熔封在安瓶內，一般測定其純度（u/mg或?g/mg）或整瓶效價。
取裝量差異項下的內容物，稱取適量（50mg以上，根據標示量及平均裝量折算估計效價，並按估計效價及量瓶體積計算取樣量），置量瓶中，加標准中規定的溶劑溶解，稀釋，測定，計算出1mg的效價單位數，再根據平均裝量及標示量計算平均每瓶的百分含量。
水針劑（注射液）：即抗生素的滅菌水溶液，標示量一般按每毫升含效價單位計。
效價測定時，量取平均裝量項下的內容物或5～10支的內容物，混勻，用乾燥的刻度吸管吸取一定量的供試品，將吸管外壁用濾紙拭凈，再棄去多餘的溶液，使供試品至吸管刻度，沿量瓶頸部內壁緩緩流入已盛有一定量溶劑（以免抗生素結晶析出）的量瓶內，混勻，繼續加溶劑至刻度，搖勻，再量取適量稀釋至規定的濃度。
素片、薄膜衣片：稱取20片的總量，求出平均片重，研細混勻後，精密稱取適量（約相當於1片的重量或根據標示量按平均片重及所用量瓶體積折算取樣量），置量瓶中，用標准中規定的溶劑溶解，並稀釋至刻度，搖勻。再量取適量稀釋至規定濃度。
注意點：研磨時應注意環境乾燥，可在乾燥操作櫃內操作，研磨要迅速，避免吸濕，因片劑內含輔料較多，輔料可能漂浮於溶液表面，稀釋時量取供試溶液應讀取輔料下層的溶液切面；如沉澱較多，須待其下沉後再量取上層液；有些輔料吸附抗生素，應加以注意。為節約供試品，可與重量差異檢查結合進行。 糖衣片、腸溶片：取標准中規定的片數，置於乳缽中，研細，分次加入規定的溶劑，研磨使其溶解，將研磨液轉移至瓶口放有小漏斗的量瓶中，量瓶體積根據供試品標示量、所取片數及抗生素儲備液濃度（一般為1000單位/ml）選定，用規定溶劑稀釋至刻度，搖勻，靜置，使輔料下沉而抗生素已溶解在溶液內，精密吸取量瓶中的上層液適量，作進一步稀釋。個別品種標准如同時收載了糖衣片和薄膜衣片，可能規定薄膜衣片也取整片制備供試溶液。
膠囊劑：取裝量差異項下的內容物，混合均勻，研細，根據平均裝量，精密稱取約相當於1粒膠囊的量或按標示量、量瓶體積及抗生素儲備液濃度等計算的取樣量，置於量瓶中，加規定的溶劑溶解並稀釋至刻度，搖勻，如供試品含有較多的輔料，則照片劑項下的方法進行。
顆粒劑、干混懸劑：取裝量差異項下的內容物，混勻，根據平均裝量，精密稱取約相當於1袋（包）的量或按標示量、量瓶體積及抗生素儲備液濃度等計算的取樣量，置於量瓶中，加規定的溶劑溶解並稀釋至刻度，搖勻。量取適量稀釋製成供試品溶液。測得效價後，再根據裝量差異項下的平均裝量，計算出平

均每袋（包）的效價，根據標示量即可算出含量。
軟膏劑、眼膏劑：擦凈軟膏劑或眼膏劑軟管的外壁，切開封口，置於乾燥器內約1小時，取乾燥的潔凈分液漏斗，帶手套操作，將膏劑軟管連同內容物在天平上稱重，取出，將內容物擠入分液漏斗，量約2g，再稱取膏劑軟管的重量，按減重法以前後稱量之差計算分液漏斗內膏劑供試品的量，以不含過氧化物的乙醚或石油醚等作溶劑溶解基質，但基質中的抗生素則應不溶於或幾乎不溶於該有機溶劑中，以避免提取過程中抗生素的損失。按標准中的規定加提取溶劑至分液漏斗中，振搖，使基質溶解，用規定的緩沖溶液提取抗生素至水相中，用緩沖溶液提取3次，合並3次的提取液，置量瓶中，加緩沖溶液至刻度，依法操作，計算效價。 實驗要點
磷黴素鈉，磷黴素鈣，磷黴素氨丁三醇 主要問題：抑菌圈偏小 解決：
1. pH9.0抗Ⅱ號培養基（pH7.8～8.0）
2. 滴加葯液後，室溫放置1小時後，放入孵箱內培養。
3. 培養時間以24小時為宜，培養時間短，抑菌圈清晰度不好，培養24h後如抑菌圈仍不清晰，應室溫放置一段時間待清晰後再測量。
啤酒酵母菌的培養 主要問題：生長不良
CP2005：抗Ⅴ號瓊脂斜面及抗Ⅳ瓊脂斜面
解決：1. 採用沙氏或YPD酵母菌培養基；2. 32～35℃培養24小時
沙氏培養基 蛋白腖10g 葡萄糖40g 瓊脂13g 水1000ml 調節滅菌後pH5.4～5.8

YPD培養基 蛋白腖10g 葡萄糖40g 酵母粉5g 瓊脂13g 水1000ml
管碟法特點：
優點：基本操作和設計適用於各種抗生素，試驗結果較穩定；樣品用量少，靈敏度高；適合於大批樣品的測定。
缺點:凡具有抗菌活性的物質都會干擾測定結果；試驗過程長，需第二天才有結果；操作手工化，需熟練人員才能得到較正確的結果；受擴散因素的影響，如培養基原材料的質量，一般瓊脂中的雜質可能影響擴散速度及效價強度
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Ⅷ 微生物限度檢查在中國葯典2015版附錄多少

《中國葯典》2015年版微生物限度檢查法修訂後將分為三個附錄：

1、非無菌葯品微生物限度檢查：微生物計數法

2、非無菌葯品微生物限度檢查：控制菌檢查法

3、非無菌葯品微生物限度標准。

修訂後的微生物限度檢查法暫不收載於《中國葯典》2010年版第二增補本而將直接收載《中國葯典》2015年版，在正式實施前的公示期內將進一步完善以保證方法的適應性和可操作性。

非無菌葯品微生物限度標準的整合、修訂

1、葯典委員會微生物專業委員會的修訂思路

2、修訂後限度標準的總體結構

3、修訂後限度標准各項具體規定

葯典委員會微生物專業委員會的修訂思路

修訂思路

(1) 2010版中國葯典一、二、三部微生物限度本中項目的對比、整合

整合：採用一部的項目作為合並後限度標準的基礎

(2)與美、歐、日葯典比較，修訂中國葯典的微生物限度標准

1、參照歐、美、日葯典一致的表示形式，採用較清晰直觀的表格形式列出各類葯品和原敷料的微生物限度標准

2、菌數計數結果以10n表示；

3、以「需氧菌總數」取代「細菌數」，以「耐膽鹽革蘭陰性菌」取代「大腸菌群」

2、修訂後限度標準的總體結構（共9項、4個表）

1、制劑通則、品種項下要求無菌的制劑及標示無菌的制劑和原輔料應符合無菌檢查法的規定

2、用於手術、燒傷或嚴重創傷的局部給葯制劑應符合無菌檢查法的規定

3、非無菌化學葯品及生物製品制劑的微生物限度標准

4、非無菌不含葯材原粉的中葯制劑微生物限度標准

5、非無菌含葯材原粉的中葯制劑微生物限度標准

6、非無菌的葯用原料及輔料微生物限度標准

7、中葯提取物及中葯飲片的微生物限度標准

8、有兼用途徑的制劑應符合各給葯途徑的標准

9、霉變、長蟎者以不合格論

2015版微生物限度標準的特點及展望

特點：

1、很好地分析、匯總了現一、二、三部的限度標準的項目

能考慮和前向性地制訂符合我國傳統中葯特點的微生物限度標准

2、化學葯、生物製品的限度標准（菌數及控制菌）已與美、歐、日葯典的限度標准一致或更嚴格

3、新設立的中葯提取物和中葯飲片的微生物限度標准（僅規定了控制菌），菌數計數限度等待調研數據

展望：

1、結合GMP管理的步伐，進一步合理制定含葯材原粉的中葯制劑的微生物限度標准

2、在開展課題積累數據、區分用法的基數上完善中葯提取物、中葯飲片、草葯的微生物限度標准

Ⅸ 2015版葯典和2010版葯典對微生物限度檢查的區別

2015版葯典對培養基系統、實驗方法、實驗環境規定等方面做出了重大修訂，方法應用范圍增加了生物方法；
還有一些細節的變化，例如陽性對照試驗，10版葯典採用金黃色葡萄桿菌，而2015版採用不同菌種；
總之2015版葯典是採用了先整合後優化、求大同存小異等整合原則。
我了解有限，以上僅供參考。

Ⅹ 中國葯典微生物限度檢查法的介紹

中國葯典微生物限度檢查法，為《中國葯典》附錄收載的關於葯品微生物檢查的法定方法。檢查項目包括細菌數、黴菌數、酵母菌數及控制菌檢查。