A. 大腸菌群檢測方法
GB4789.3-2016《食品安全國家標准食品微生物學檢驗大腸菌群計數》中的規定操作步驟：
1、乳糖發酵試驗：樣品稀釋後，選擇三個稀釋度，每個稀釋度接種三管乳糖膽鹽發酵管。36±1℃培養48±2h，觀察是否產氣。
2、分離培養：將產氣發酵管培養物轉種於伊紅美藍瓊脂平板上，36±1℃培養18-24h，觀察菌落形態。
3、證實試驗：挑取平板上的可疑菌落，進行革蘭氏染色觀察。同時接種乳糖發酵管36±1℃培養24±2h，觀察產氣情況。
SN0169-92《中華人民共和國進出口商品檢驗行業標准出口食品中大腸菌群、糞大腸菌群和大腸桿菌檢驗方法》規定操作：
1、推測試驗：樣品稀釋後，選擇三個稀釋度，每個稀釋度接種三管LST肉湯。36±1℃培養48±2h，觀察是否產氣。
2、證實試驗：將產氣管培養物接種煌綠乳糖膽鹽（BGLB）肉湯管中，36±1℃培養48±2h，觀察是否產氣。以BGLB產氣為陽性。查MPN表，報告每ml(g)樣品中大腸菌群的MPN值。
大腸菌群並非細菌學分類命名，而是衛生細菌領域的用語，它不代表某一個或某一屬細菌，而指的是具有某些特性的一組與糞便污染有關的細菌，這些細菌在生化及血清學方面並非完全一致。一般認為該菌群細菌可包括大腸埃希氏菌、檸檬酸桿菌、產氣克雷白氏菌和陰溝腸桿菌等。
大腸菌群是作為糞便污染指標菌提出來的，主要是以該菌群的檢出情況來表示食品中有否糞便污染。大腸菌群數的高低，表明了糞便污染的程度，也反映了對人體健康危害性的大小。
糞便是人類腸道排泄物，其中有健康人糞便，也有腸道患者或帶菌者的糞便，所以糞便內除一般正常細菌外，同時也會有一些腸道致病菌存在，因而食品中有糞便污染，則可以推測該食品中存在著腸道致病菌污染的可能性，潛伏著食物中毒和流行病的威脅，必須看作對人體健康具有潛在的危險性。
B. 食品衛生微生物學檢驗.大腸菌數測定
微生物
一、大腸菌群的檢測GB4789.3-2010
第一法 大腸物寬察菌群MPN計數法 第二法 大腸菌群平板計數法
1.1月桂基硫酸鹽胰蛋白腖（LST）肉湯:稱取35.6g溶於1000ml蒸巧拆餾水中，加熱煮沸至完全溶解，分裝於有倒立發酵管的試管中，每管10ml，121℃高壓滅菌15min後備用。雙料除蒸餾水外其他成分加倍。
1.2煌綠乳糖膽鹽（BGLB）肉湯：稱取30g溶於1000ml蒸餾水中分裝 ，經115℃15min高壓滅菌備用。
1.3無菌生理鹽水：稱取8.5gNaCl溶於1L蒸餾水中。分裝於250ml的錐形瓶中，121℃高壓滅菌15min後備用
1.4結晶紫中性紅膽鹽瓊脂（VRBA）：稱取41.6g溶於1L蒸餾水中，充分搖勻，加熱煮沸2min冷卻至50℃，傾注平板。
無菌 1 mol/L NaOH：稱取40 g氫氧化鈉溶於1 000 mL蒸餾水中，121 ℃高壓滅菌15 min。
無菌 1 mol/L HCl：移取濃鹽酸90 mL，用蒸餾水稀釋至1 000 mL，121 ℃高壓滅菌15 min。
二、大腸菌群的檢測GB4789.3-2003 第一法 大腸菌群MPN計數法
2.1稱取乳糖膽鹽發酵培養基35.0g溶於1000ml蒸餾水中，加熱煮沸至完全溶解，分裝於有倒立發酵管的試管中，每管10ml，115℃高壓滅菌15min後備用。雙料除蒸餾水外其他成分加倍。
2.2伊紅美藍瓊脂平板：稱取伊紅美藍瓊脂37.5g溶於1000ml蒸餾水中，加熱煮沸至完全溶解，分裝、115℃高壓滅菌15min後備用。
2.3乳糖發酵管：稱取乳糖發酵培養基35.0g溶於1000ml蒸餾水中，加熱煮沸至完全溶解，分裝於有倒立發酵管的試管中，每管10ml，115℃高壓滅菌15min後備用
2.4無菌生理鹽水：稱取8.5gNaCl溶於1L蒸餾水中。分裝於250ml的錐形瓶中，121℃高壓滅菌15min後備用
2.5革蘭氏染色按GB/T4789-2003中罩茄2規定。
C. 筷子檢測出大腸菌群需要隔幾天
筷子檢測出大腸菌群需要一天。
1、根據查詢相關資料信顯示，采樣方法：每次采樣6～10件，每件貼紙片兩張，每張紙片面積25cm2(5cm╳5cm)用無菌生理鹽水濕潤大腸菌群檢測用紙片後，立即貼於食具內側表面，30s後取下，置於無菌塑料袋內。筷子以5隻為一件樣品，用毛細吸管吸取無菌生理鹽水濕潤紙片後，立即將筷子進口端約5cm)抹試紙片，每件樣品抹拭兩張，放入無菌塑料袋內。
2、檢驗方法：將已采樣的紙片置37℃培養16～18h，若紙片保持紫藍色不變或有紅色斑點但斑點周圍無黃暈為大腸菌群陰性，在紅色斑點周圍有黃暈或紙片變黃並在黃色背景上呈現紅色斑點或片狀紅暈為陽性。
D. 大腸菌群檢測方法
結論：本文詳細描述了大腸菌群檢測的嚴格步驟和實驗過程，確保結果的准確性。以下是改寫後的部分：
大腸菌群檢測是一個嚴謹的實驗室操作，首先，進入無菌室需要進行一系列的消毒程序。步驟如下：打開紫外燈滅菌0.5-1小時，待燈熄滅0.5小時後方可進入。在更衣間更換專用裝備後，進行手部消毒，使用75%酒精棉簽。
實驗步驟主要包括准備樣本和培養基。從原液中取10ml放入雙料管，1ml分別放入單料管和培養皿，形成不同梯度的樣液。接著，分別在鹽水管和培養皿中制備空白對照，如空氣空白、瓊脂空白和鹽水空白。
將樣本和對照放入恆溫培養箱，設定溫度36℃±1℃，培養時間分別為大腸菌24小時±2小時，菌落48小時±2小時。在檢測過程中，若觀察到大腸菌發酵產生氣泡，還需在伊紅美蘭平板上進行進一步觀察和接種。
最後，通過鏡檢判斷樣本的合格性，只有當鏡檢結果顯示樣本呈現紫紅色和乳糖復發酵管產氣時，才能確認為不合格。在處理樣本之前，務必對試管進行徹底的消毒，確保無菌操作。
整個過程要求高度精確，以確保大腸菌群檢測的科學性和准確性。