多菌靈檢測方法

『壹』 檢測多菌靈的葯劑有哪些種類

檢測多菌靈的葯劑種類有以下幾種：
1、多菌靈水劑：多菌靈的有效成分以水為溶劑製成的葯劑，常用於噴霧或灌溉處理。
2、多菌靈懸浮劑：多菌靈的有效成分以懸浮劑製成的葯劑，常用於噴霧處理。
3、多菌靈可濕性粉劑：多菌靈的有效成分以可濕性粉劑製成的葯劑，常用於噴粉或塗抹處理。
4、多菌靈顆粒劑：多菌靈的有效成分以顆粒劑製成的葯劑，常用於土壤處理或種子處理。

『貳』 怎樣監測病原物抗葯性

因為大多數植物病原菌的致病階段處於單倍體時期，且繁殖系數大、周期短，所以植物病原菌抗葯性是發生速度最快、為害最嚴重的農業有害生物。同時，病原菌抗葯性不容易被農民肉眼識別，必須通過實驗室精密測定才能鑒別和診斷，因此，世界各國投入殺菌劑抗性監測研究的人力和財力也最多。

病原物抗葯性監測是指測定自然界病原物群體對使用葯劑敏感性的變化。包括在各地定點連年系統測定和對有抗葯性懷疑的地方臨時採集標本測定。最常用的監測方法是測定病原物生長量與葯劑的效應關系。常見方法有菌落直徑法，即在含有系列濃度殺菌劑培養基上測量葯劑對菌落線性增長速率的抑制效應。採用乾重法測量在含葯的液體培養基中培養的菌體乾重增長速率與葯劑的效應，更能夠准確反映殺菌劑對菌體生長的抑製作用。不過這種方法比較繁瑣，工作量大。當病菌以孢子繁殖生長時，亦可採用濁度法測定細胞生長量與葯劑的效應。

採用臨界劑量或鑒別劑量是檢測和測量抗葯性廣度的常用方法。如在含有完全能抑制野生敏感菌生長的殺菌劑濃度的培養基平板上，塗抹病原物混合孢子或其他繁殖體，進行適當培養後，檢查病菌的生長情況，計算抗葯性菌株的出現頻率。

採用孢子萌發法也可測定葯劑對不同菌株孢子萌發的抑制來鑒別抗葯性。但是，許多內吸性殺菌劑並不阻止孢子萌發，這時應該考慮對芽管形態和菌體發育的作用。

活體測定法是指把病菌接種到經殺菌劑處理過的植株或部分組織上，評估葯劑處理劑量與發病程度間的效應關系。這種活體測定方法不僅是測定專性寄生菌抗葯性的唯一方法，而且是驗證病菌在培養基上對葯劑敏感性差異是否與在寄主上的反應差異一致必不可少的方法。例如，麥角甾醇生物合成抑制劑和二甲醯亞胺類殺菌劑在離體條件下，很容易引起真菌的抗性突變，但是，這些突變體對寄主的致病性也常隨之降低。此外，在培養基上能對葉枯唑表現抗葯性的稻白葉枯病菌，則失去了致病能力，而在經葉枯唑、敵枯唑等處理的水稻上表現抗性的菌株，在培養基上反而不表現抗性。

已知有些殺菌劑對菌體的呼吸作用或生物合成過程等生命過程有顯著抑製作用，可以用生化測定法，測定不同殺菌劑濃度對這些過程影響程度的差異來比較不同菌株的敏感性。或者基於靶標蛋白三維結構變化而喪失與葯劑的親和性抗葯性機制，制備和利用單克隆抗體進行免疫檢測。最近，也有根據單核苷酸變異而產生抗葯性的機制使用DNA探針雜交和PCR指紋圖譜等分子生物技術進行病原物抗葯性監測的成功例子。定量PCR檢測技術的開發和應用，使病原菌的抗葯性早期監測和預警成為可能。

一種病原物對某一農葯的敏感性還常隨著個體的遺傳差異、培養基組分、瓊脂的質量、溫度、pH、測試環境和方法的不一致而有變化。如在含乙磷鋁的PDA培養基上，疫霉的生長不受影響，但是在不含磷酸鹽的合成培養基上，這種真菌對葯劑則變得敏感。因此，某種葯劑—病原物組合的抗葯性測定，不但要選用適當的方法和條件進行，而且被懷疑有抗葯性的菌株也必須用測得敏感基線同樣的方法和條件進行各種測試，最好在所有抗葯性測定中均包含有一個已知敏感的參考系。

在測定某種病原物各個個體對農葯不同濃度的效應後，如何進一步鑒別和評估它們的抗葯性，常用的標准有3種：第一種是用同一濃度測定各個體對葯劑的反應；第二種是測定最低抑制濃度；第三種是測定產生相同效應的濃度，如抑制菌體生長發育或致病50%的有效濃度（EC50）。

第一種標准常會過高地評估抗葯性水平或抗性程度。因為病菌對同一劑量的效應有時差異很大。第二種標准也有缺陷。因為有的菌株抗葯性水平很高，如灰黴菌（Botrytiscinerea）對多菌靈的抗葯性，難以用最低抑制濃度來評估抗葯性水平，有些殺菌劑即使在很高濃度下也不能完全抑制菌體生長，同樣不能採用這種分析標准。但灰霉野生敏感菌株對多菌靈特別敏感，亦可用最低抑制濃度作為鑒別抗性和敏感菌株的標准。採用第三種分析標准，根據殺菌劑的劑量與抑制菌體生長發育的效應關系，得出劑量與生長抑制率之間的回歸方程，然後根據對測定菌株和標准野生敏感菌株的相同抑制生長發育百分率的葯劑濃度的比較，鑒別抗性菌株並分析抗性水平。有些病菌對某些葯劑的敏感性是由多個微效基因決定的，表現出數量遺傳性狀，雖很難評估某一菌株的抗性水平，但可以通過測定某地區用葯前病原群體（一般需測100個菌株）對葯劑的敏感性分布，用葯後再測定病原群體的敏感性，由此可根據平均EC50之比來評估某一地區病原群體的抗性水平。

『叄』 殺菌劑的毒力測定方法具體該怎麼操作

一般認為，相同的細菌分子具有毒力。殺菌劑的毒性實際上是其化學分子與細菌生化目標相互作用的結果，這屬於化合物對抗特定病原體的內在活性。殺菌劑的毒性是評估其活性的一個重要參數。

為了控制有效的化學物質以控制莖的分解，採用抑制菌絲生長的方法測定了多菌靈等10種化學殺菌劑的室內生物活性。結果表明，丙咪嗪、多菌靈、戊唑醇和丙環唑對菌絲生長的抑製作用最為明顯，其EC50分別為0、0.33、0.14和0.16ml；偶氮菌酯、百菌清和異硫脲的抑製作用次之，CE50值分別為10.53、18.17和5.05.mL；代森錳鋅、甲霜靈和甲基托布嗪對莖分解沒有明顯的抑製作用。