真菌總數檢測方法國標

❶ 關於食品中微生物的檢測

我國衛生部頒布的食品微生物指標有菌落總數、大腸菌群和致病菌三項。

你已經做過菌落總數，那就只需下面兩個了。都是很普通的儀器，但是試劑的話比較多，需要特別購買，不過也是很普通的試劑，在一般的試劑商店能買到。

其實你可以外送檢測，不會很貴。如果自己做，就比較煩了。

一、食品中大腸菌群的測定

1、實驗材料：溫箱、水浴鍋、天平、顯微鏡、均質器或乳缽、溫度計、平皿、試管、發酵管、吸管、載玻片、接種針、乳糖—膽鹽發酵管、乳糖發酵管、蛋白腖水、靛基質試劑、麥康凱、伊紅美藍瓊脂（EMB）、遠騰氏瓊脂、革蘭氏染色液

2、實驗方法與步驟

2.1采樣及稀釋

(1)以無菌操作將檢樣25g（或25ml）放於含有225ml滅菌生理鹽水或其他稀釋液的滅菌玻璃瓶內（瓶內預置適當數量的玻璃珠）或滅菌乳缽內，經充分振搖或研磨做成1：10的均勻稀釋液。固體檢樣最好用無菌均質器，以800r/min～1000r/min的速度處理1min，做成1：10的稀釋液。

(2)用1ml滅菌吸管吸取1：10稀釋液1ml，注入含有9ml滅菌生理鹽水或其他稀釋液的試管內，振搖混勻，做成1：100的稀釋液，換用1支1ml滅菌吸管，按上述操作依次作10倍遞增稀釋液

(3)根據食品衛生要求或對檢驗樣品污染情況估計，選擇三個稀釋度，每個稀釋度接種3管。也可直接用樣品接種。

2.2乳糖初發酵試驗

即通常所說的假定試驗。其目的在於檢查樣品中有無發酵乳糖產生氣體的細菌將待檢樣品接種於乳糖膽鹽發酵管內，接種量在1ml以上者，用雙料乳糖膽鹽發酵管；1ml及1ml以下者，用單料乳糖發酵管。每一個稀釋度接種3管，置（36±1）℃溫箱內，培養（24±2）h，如所有乳糖膽鹽發酵管都不產氣，則可報告為大腸菌群陰性，如有產生者，則按下列程續進行。

2.3分離培養：將產氣的發酵管分別轉種在伊紅美藍瓊脂板或麥康凱瓊脂平板上，置（36±1）℃溫箱內，培養18h～24h，然後取出，觀察菌落形態並作革蘭氏染色鏡檢和復發酵試驗。

2.4乳糖復發酵試驗：即通常所說的證實試驗，其目的在於證明從乳糖初酵管試驗呈陽性反應的試管內分離到的革蘭氏陰性無芽胞桿菌，確能發酵乳糖產生氣體。在上述的選擇性培養基上，挑取可疑大腸菌群1～2個進行革蘭氏染色，同時接種乳糖發酵管，置（36±1）℃的溫箱內培養（24±2）h，觀察產氣情況。凡乳糖發酵管產氣，革蘭氏染色為陰性無芽胞桿菌，即報告為大腸桿菌陽性；凡乳糖發酵管不產氣或革蘭氏染色為陽性，則報告為大腸桿菌為陰性。

3報告：根據證實為大腸菌群陽性的管數，查MPN檢索表，報告每100ml（g）食品中大腸菌群的最可能數。

二、食品中病原菌的檢驗：主要有沙門氏菌屬、志賀氏菌屬、霍亂弧菌屬、黴菌真菌等等。國內主要是指沙門氏和志賀氏，試劑主要為SS瓊脂。將樣品（增菌後）稀釋塗布在SS瓊脂上面，然後看長出的菌落，找一些圖片做對照，一致的話說明有致病菌，沒有的話就說明PASS。一般沙門氏或志賀氏菌落是無色透明或粉紅色菌落，表面光滑，產硫化氫的菌落中心有黑點。

❷ 細菌總數怎麼檢測

細菌總數檢測目前國標規定的方法為平板計數法，其檢驗方法是：

在玻璃平皿內，接種一毫升水樣或稀釋水樣於加熱液化的營養瓊脂培養基中，冷卻凝固後在37°C培養24小時，培養基上的菌落數或乘以水樣的稀釋倍數即為細菌總數。

有的國家把培養溫度定為35°C或其他溫度，也有把培養時間定為48小時的。這種方法精度高，但耗時長，難以滿足實際工作需要。

為了簡化檢測程序、縮短檢測時間，國內外學者進行了大量的快速檢測方法的研究，提出了阻抗檢測法、Simplate TM全平器計數法、微菌落技術、紙片法等檢測方法，取得了一定的成果，但檢測時間仍在4 h以上。

本研究在分析了已有研究成果的基礎上，提出了在濾膜上染色後，直接計數的細菌總數檢測方法，具體步驟為：

用集菌儀進行細菌收集→在膜上進行染色→在油鏡下計數→按公式計算出菌液濃度。實驗結果表明，該方法與傳統的平板培養法無顯著性差異，檢測時間約1 h，是一種快速的細菌總數檢測方法。

(2)真菌總數檢測方法國標擴展閱讀：

水中通常存在的細菌大致可分為三類：

1、天然水中存在的細菌。普通的是熒光假單孢桿菌、綠膿桿菌，一般認為這類細菌對健康人體是非致病的。

2、土壤細菌。當洪水時期或大雨後地表水中較多。它們在水中生存的時間不長，在水處理過程中容易被去除。腐蝕水管的鐵細菌和硫細菌也屬此類。

3、腸道細菌。它們生存在溫血動物的腸道中，故糞便中大量存在。水體中發現這類細菌，可以認為已受到糞便的污染。致病性腸道細菌有沙門氏桿菌（傷寒和副傷寒菌）、B型炭疽菌、痢疾志賀氏菌和霍亂弧菌等。

❸ 如何測量微生物的菌數

日常生活中我們需要進行菌落總數檢測的除了我們關心的各種食物外，還有水、化妝品、空氣等。每種都有對應的檢測標准和方法。此外，還有關於公共場所的衛生標准里也有一些物品是需要進行菌落計數的，比如旅館里的浴缸，毛巾，拖鞋，卧具，茶具，理發店的理發用具等等，對於這些物品的菌落計數，我們一般會採用用無菌生理鹽水濕潤的棉拭子在相應位置塗抹一定面積（如茶具是在內、外緣塗抹50平方厘米），然後放入10毫升生理鹽水內，振盪混勻後1:10稀釋（通常會做1:10,1:100和1:1000三個稀釋度），吸取1毫升稀釋後的檢樣注入滅菌平板。平板放在適宜的溫度培養，等平板上長出來菌落進行菌落計數也是有一套標准來進行判讀和計算的（內容還是比較多的，手懶不想打了。）總之，這樣計數出來的結果，我們稱之為菌落總數。

其實，在評價衛生質量尤其是食品的衛生質量時，還有一個重要的指標——大腸菌群：一群能發酵乳糖、產酸產氣、需氧和兼性厭氧的革蘭氏陰性無芽胞桿菌，因為主要來源是人畜糞便，因此能作為糞便污染指標來評價食品的衛生質量，推斷食品中有無污染腸道致病菌的可能。食品中的大腸菌群數以100毫升（克）檢樣內大腸菌群最可能數（MPN）表示。最後，衛生部門還會對相應的致病菌進行專門的檢測，沙門菌、志賀菌、副溶血弧菌、金黃色葡萄球菌、溶血性鏈球菌、蠟樣芽孢桿菌等等都有一套完整的檢測流程和標准。

❹ 牙刷微生物的檢測方法

1.方法:檢測細菌總數、大腸菌群、真菌和HBsAg 四項指
標。
2. 細菌菌落總數：用浸有生理鹽水的棉拭子在5 x 5cm2滅
菌規格板內塗抹受檢物品表面10 次，將棉拭子放入10ml 滅菌
生理鹽水中。按部頒《消毒技術規范》（1991）方法檢驗。
3.大腸桿菌：按上法采樣將棉拭子放入膽鹽乳糖管中。按
衛生部《消毒技術規范》（1991）方法檢驗，記錄陽性、陰性數。
4 真菌：按（2）方法采樣，將樣品按1:10稀釋，用H-92
微型混合器震盪30min，使真菌孢子充分散開，接種於馬鈴薯
葡萄糖瓊脂培養基，28°C培養7d，記錄平皿陽性、陰性數。
5 HBsAg:用蘸有1%血清磷酸鹽緩沖液（0.01M,pH 7.2-7.4）棉拭子在5 x 5cm2規格板內塗抹物體表面10次，浸入1ml
磷酸鹽緩沖液中。按部頒《消毒技術規范》（1991）方法檢驗.

注:王雲峰，王有森，白竟玉，等.消毒技術規范〔M〕. 北京：衛生部，1991:100-113