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沙門氏菌3m測試片檢測方法

發布時間:2024-12-11 16:31:28

㈠ 保健品的微生物檢測按什麼標準是按食品標准所有菌都要檢測

一般按照國標檢測。一般檢測項目是:GB 4789.2細菌總數、GB 4789.15黴菌和酵母菌、GB 4789.3大腸菌群、致病菌(GB 4789.5志賀氏菌、GB 4789.10金黃色葡萄球菌、GB 4789.4沙門氏菌、GB 4789.11溶血鏈球菌)

㈡ 食品車間設備菌落總數怎麼測定 標準是什麼

SN/T 1897-2007食品中菌落總數的測定也可以用於與食品接觸的設備表面的。附錄A。
另有自定的
例一:
物體表面采樣及檢查方法
采樣面積
被采表面<100cm2,取全部表面;被采表面≥100cm2,取100cm2。
采樣方法
用5×5cm2的標准滅菌規格板;放在被檢物體表面,用浸有無菌生理鹽水液的棉拭子1支,在規格板內橫豎往返各塗抹5次;並隨之轉動棉拭於。連續采樣1~4個規格板面積;剪去手接觸部分,將棉拭於放入裝10ml采樣液的試管中送檢。門把手等小型物體則採用棉拭子直接塗抹物體的方法采樣。
培養(略)
例二:
空氣及與食品接觸面微生物檢驗方法、檢驗標准
1、 目的:
檢測生產車間空氣、操作人員手部、與食品有直接接觸面的機械設備的微生物指標,生產區域環境當中病原微生物的監控,達到規定標准,以控制食品成品的質量。
2、 參照標准:
中華人民共和國國家標准《一次性使用衛生用品衛生標准》GB15979-1995、《HACCP原理與實施》、中華人民共和國國家標准《公共場所空氣微生物檢驗方法細菌總數測定》GB/T 18204.1-2000、中華人民共和國進出口商品檢驗行業標准SN 0169-92/SN 0172-92/ SN 0170-92、 出入境檢驗檢疫局二000四年《出入食品微生物檢驗培訓教材》中《出入食品生產廠衛生細菌檢驗方法》、日本東京冷凍食品檢驗方法。
3、 采樣與檢測方法
3.1空氣的采樣與測試方法
3.1.1樣品採集:
(1)取樣頻率:
a)車間轉換不同衛生要求的產品時,在加工前進行采樣,以便了解車間衛生清掃消毒情況。
b)全廠統一放長假後,車間生產前,進行采樣。
c)產品檢驗結果超內控標准時,應及時對車間進行采樣,如有檢驗不合格點,整改後再進行采樣檢驗。
d)實驗性新產品,按客戶規定頻率采樣檢驗。
e)正常生產狀態的采樣,每周一次。
(2)采樣方法
在動態下進行,室內面積不超過30 m2,在對角線上設里、中、外三點,里、外點位置距牆1 m;室內面積超過30 m2,設東、西、南、北、中五點,周圍4點距牆1 m。采樣時,將含平板計數瓊脂培養基的平板(直徑9 cm)置采樣點(約桌面高度),並避開空調、門窗等空氣流通處,打開平皿蓋,使平板在空氣中暴露5 min。采樣後必須盡快對樣品進行相應指標的檢測,送檢時間不得超過6h,若樣品保存於0~4℃條件時,送檢時間不得超過24h。
3.1.2菌落培養:
(1)在采樣前將准備好的平板計數瓊脂培養基平板置37℃±1℃ 培養24 h,取出檢查有無污染,將污染培養基剔除。
(2)將已採集樣品的培養基在6 h內送實驗室,細菌總數於37℃±1℃培養48h觀察結果,計數平板上細菌菌落數。
(3)菌落計算:
a) 記錄平均菌落數,用「個/皿」來報告結果。用肉眼直接計數,標記或在菌落計數器上點計,然後用5~10倍放大鏡檢查,不可遺漏。
b) 若培養皿上有2個或2個以上的菌落重疊,可分辨時仍以2 個或2個以上菌落計數。
3.2工作台(機械器具)表面與工人手錶面采樣與測試方法:
3.2.1樣品採集:
(1)取樣頻率:
a)車間轉換不同衛生要求的產品時,在加工前進行擦拭檢驗,以便了解車間衛生清掃消毒情況。
b)全廠統一放長假後,車間生產前,進行全面擦拭檢驗。
c)產品檢驗結果超內控標准時,應及時對車間可疑處進行擦拭,如有檢驗不合格點,整改後再進行擦拭檢驗。
d)實驗新產品,按客戶規定擦拭頻率擦拭檢驗。
e)對工作表面消毒產生懷疑時,進行擦拭檢驗。
f)正常生產狀態的擦拭,每周一次。
(2) 采樣方法:
a) 工作台(機械器具):用浸有滅菌生理鹽水的棉簽在被檢物體表面(取與食品直接接觸或有一定影響的表面)取25cm2 的面積,在其內塗抹10次,然後剪去手接觸部分棉棒,將棉簽放入含10mL滅菌生理鹽水的采樣管內送檢。
b) 工人手:被檢人五指並攏,用浸濕生理鹽水的棉簽在右手指曲面,從指尖到指端來回塗擦10次,然後剪去手接觸部分棉棒,將棉簽放入含10mL滅菌生理鹽水的采樣管內送檢。
(3)采樣注意事項:
擦拭時棉簽要隨時轉動,保證擦拭的准確性。對每個擦拭點應詳細記錄所在分場的具體位置、擦拭時間及所擦拭環節的消毒時間
3.2.2 細菌•大腸菌群的檢測培養:
樣液稀釋:將放有棉棒的試管充分振搖。此液為1:10稀釋液。如污染嚴重,可十倍遞增稀釋,吸取1ml 1:10樣液加9ml無菌生理鹽水中,混勻,此液為1:100稀釋液。
3.2.2.1 細菌總數:
(1)以無菌操作,選擇1~2個稀釋度各取1ml樣液分別注入到無菌平皿內,每個稀釋度做兩個平皿(平行樣),將已融化冷至45℃左右的平板計數瓊脂培養基傾入平皿,每皿約15ml,充分混合。
(2)待瓊脂凝固後,將平皿翻轉,置36℃±1℃ 培養48 h後計數。
(3)結果報告:報告每25cm2食品接觸面中或每隻手的菌落數
3.2.2.2大腸菌群:
(1)平板法:
a) 以無菌操作,選擇1~2個稀釋度各取1ml樣液分別注入到無菌平皿內,每個稀釋度做兩個平皿(平行樣),將已融化冷至45℃左右的去氧膽酸鹽瓊脂培養基傾入平皿,每皿約15ml,充分混合。待瓊脂凝固後,再覆蓋一層培養基,約3-5 ml。
b) 待瓊脂凝固後,將平皿翻轉,置36℃±1℃ 培養24h後計數。
c) 結果計算: 以平板上出現紫紅色菌落的個數乘以稀釋倍數得出。
d) 結果報告:報告每25cm2食品接觸面中或每隻手的菌落數
(2)試管法:
a) 以無菌操作,選擇3個稀釋度各取1ml樣液分別接種到BGLB肉湯培養基中,每個稀釋度接種三管。
b) 置BGLB肉湯管於36℃±1℃培養48±2h。記錄所有BGLB肉湯管的產氣管數。
c) 結果報告:按BGLB肉湯管產氣管數,查MPN表報告每25cm2食品接觸面中或每隻手的大腸菌群值。
3.2.3 金黃色葡萄球菌檢測
(1)定性檢測
a) 取1ml 稀釋液注入滅菌的平皿內,傾注15-20ml的B-P培養基,(或是吸取0.1稀釋液,用L棒塗布於表面乾燥的B-P瓊脂平板),放進36±1℃的恆溫箱內培養48±2小時。
b) 從每個平板上至少挑取1個可疑金黃色葡萄球菌的菌落作血漿凝固酶實驗。
c) 結果報告:B-P瓊脂平板的可疑菌落作血漿凝固酶實驗為陽性,即報告手(工器具)上有金黃色葡萄球菌存在。
(2)定量檢測
a) 以無菌操作,選擇3個稀釋度各取1ml樣液分別接種到含10%氯化鈉胰蛋白腖大豆肉湯培養基中,每個稀釋度接種三管。
b) 置肉湯管於36±1℃的恆溫箱內培養48小時。劃線接種於表面乾燥的B-P瓊脂平板,置36℃±1℃ 培養45~48小時。
c) 從B-P瓊脂平板上,挑取典型或可疑金黃色葡萄球菌菌落接種肉湯培養基,36℃±1℃培養20~24小時。
d) 取肉湯培養物做血漿凝固酶試驗,記錄試驗結果。
e) 報告結果:根據凝固酶試驗結果,查MPN表報告每25 cm2食品接觸面中或每隻手的金黃色葡萄球菌值。
3.3工廠環境中病原體的檢測計劃與方法
檢測計劃:為了保證食品安全,工廠應該對生產環境中的病原微生物進行檢測和評估,檢測項目包括李斯特菌,沙門氏菌等病原體微生物,化驗室應該按照一定的計劃對生產場所環境中的病原體進行檢測,其中包括地面、下水道、 排水溝、牆壁、天花板、設備框架、運輸的支架,冷藏裝置、速凍機、傳送帶、設備的螺絲、維修工具等部位。當某個點檢測到病員微生物時,應該對環境中的相似點加大檢測頻率;在把所有的預定點檢測完後,應該對環境中的病原微生物的存在狀況進行全面評估,在下一次環境檢測循環過程中加強檢測容易出現病原體的環境點,達到持續改進的目的。
檢測頻率: 每月兩次,每次每個區域至少選取5個檢測點,分別進行檢測。
3.3.1 環境李斯特菌的檢測方法(3MTM PetrifilmTM 環境李斯特菌的測試片)
3.3.1.1 用塗抹棒,海綿或者其他采樣設備收集環境樣本。
3.3.1.2 將收集的樣本添加10毫升滅菌的緩沖蛋白腖水,將樣本與緩沖蛋白腖混合1分鍾,將樣品置於室溫(20-30℃)1小時,最久不超過1.5小時,以修復損傷的李斯特菌。
3.3.1.3 將測試片放在平坦處,掀起上層膜。
3.3.1.4 用移液器垂直滴加3毫升樣品到下層膜中央,將上層膜緩慢蓋下,以免產生氣泡。
3.3.1.5 輕輕將塑料壓板放在位於接種區上層膜上,不要壓,扭轉或者滑動壓板。提起壓板等至少十分鍾,以使膠體凝固。
3.3.1.6 將測試片透明面朝上,可疊放至十片,在37℃±1℃培養26-30小時,可以用標准菌落記數器或者其他光學放大器判讀,不要記數圓形輪廓上的菌落,因為他們不受選擇性培養基的影響。
3.3.1.7 對於定性檢測,根據紫紅色菌落是否存在,結果記為檢出或者未檢出。
3.3.2 環境中沙門氏菌的檢測方法
3.3.2.1采樣地點: 選取采樣點時因盡量選取微生物容易滋生的地方
3.3.2.2 操作步驟
3.3.2.2.1采樣應在生產開始後進行,用已浸潤過的棉拭在選定的被測表面旋轉塗抹約100cm2的面積,然後將棉拭放回塗抹試管並蓋緊。
3.3.2.2.2將樣品帶回實驗室,每5個點混合成一個樣品, 登記編號,按照SN0170-92標准及時檢測,若有陽性結果出現,應逐步對所混合的每個點分別檢測。

㈢ 關於沙門氏菌的檢測

沙門氏菌屬腸道細菌科,包括那些引起食物中毒、導致腸胃炎、傷寒和副傷寒的細菌。能引起食物傳播性疾病,近年來,已經成為最常見的食物中毒原因。腸炎沙門氏菌感染通常源於奶製品、禽產品和肉產品;雞肉和雞蛋尤其是高風險食品。沙門氏菌感染的症狀通常是腸胃出現問題,包括惡心、腹部絞痛、嘔吐和腹瀉,一般最多持續7天。在免疫力低下的人群中,如果不及時服用抗生素類葯品,沙門氏菌感染將導致生命危險。沙門氏菌測試片(FilmplateTM Salmonella BS205)含有選擇性培養基、沙門氏菌特有辛酯酶的顯色指示劑和高分子吸水凝膠,運用微生物測試片專有技術,做成一次性快速檢驗產品,一步培養15~24h就可確認是否帶有沙門氏菌,非常適合各級檢驗部門和食品企業使用。本產品適用於肉和肉產品、蛋及蛋製品、冷飲等的快速檢測。

三方圓沙門氏菌測試片操作方法:
1、樣品處理:取樣品25mL(g)放入含有225mL滅菌磷酸緩沖液稀釋液(或生理鹽水)的取樣罐或均質杯內,製成1:10的樣品勻液。
2、接種:將沙門氏菌測試片(BS205)置於平坦實驗檯面,揭開上層膜,用無菌吸管吸取1mL樣品勻液慢慢均勻地滴加到紙片上,然後再將上層膜緩慢蓋下,靜置10s左右,使培養基凝固,每個樣品接種兩片。同時做一片空白陰性對照。
3、培養: 將測試片疊在一起放回原自封袋中並封口。透明面朝上水平置於恆溫培養箱內,堆疊片數不超過12片。培養溫度為36℃±1℃,培養15~24h。

結果判讀:
對測試片進行觀察,呈紫紅色的菌落為沙門氏菌;呈藍色的菌落為其他菌群。出現陽性菌落的樣本,最好用其他更為可靠的方法進行驗證,沒有條件的至少要再取樣重復檢驗一次。

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