⑴ 關於食品中微生物的檢測
我國衛生部頒布的食品微生物指標有菌落總數、大腸菌群和致病菌三項。
你已經做過菌落總數,那就只需下面兩個了。都是很普通的儀器,但是試劑的話比較多,需要特別購買,不過也是很普通的試劑,在一般的試劑商店能買到。
其實你可以外送檢測,不會很貴。如果自己做,就比較煩了。
一、食品中大腸菌群的測定
1、實驗材料:溫箱、水浴鍋、天平、顯微鏡、均質器或乳缽、溫度計、平皿、試管、發酵管、吸管、載玻片、接種針、乳糖—膽鹽發酵管、乳糖發酵管、蛋白腖水、靛基質試劑、麥康凱、伊紅美藍瓊脂(EMB)、遠騰氏瓊脂、革蘭氏染色液
2、實驗方法與步驟
2.1采樣及稀釋
(1)以無菌操作將檢樣25g(或25ml)放於含有225ml滅菌生理鹽水或其他稀釋液的滅菌玻璃瓶內(瓶內預置適當數量的玻璃珠)或滅菌乳缽內,經充分振搖或研磨做成1:10的均勻稀釋液。固體檢樣最好用無菌均質器,以800r/min~1000r/min的速度處理1min,做成1:10的稀釋液。
(2)用1ml滅菌吸管吸取1:10稀釋液1ml,注入含有9ml滅菌生理鹽水或其他稀釋液的試管內,振搖混勻,做成1:100的稀釋液,換用1支1ml滅菌吸管,按上述操作依次作10倍遞增稀釋液
(3)根據食品衛生要求或對檢驗樣品污染情況估計,選擇三個稀釋度,每個稀釋度接種3管。也可直接用樣品接種。
2.2乳糖初發酵試驗
即通常所說的假定試驗。其目的在於檢查樣品中有無發酵乳糖產生氣體的細菌將待檢樣品接種於乳糖膽鹽發酵管內,接種量在1ml以上者,用雙料乳糖膽鹽發酵管;1ml及1ml以下者,用單料乳糖發酵管。每一個稀釋度接種3管,置(36±1)℃溫箱內,培養(24±2)h,如所有乳糖膽鹽發酵管都不產氣,則可報告為大腸菌群陰性,如有產生者,則按下列程續進行。
2.3分離培養:將產氣的發酵管分別轉種在伊紅美藍瓊脂板或麥康凱瓊脂平板上,置(36±1)℃溫箱內,培養18h~24h,然後取出,觀察菌落形態並作革蘭氏染色鏡檢和復發酵試驗。
2.4乳糖復發酵試驗:即通常所說的證實試驗,其目的在於證明從乳糖初酵管試驗呈陽性反應的試管內分離到的革蘭氏陰性無芽胞桿菌,確能發酵乳糖產生氣體。在上述的選擇性培養基上,挑取可疑大腸菌群1~2個進行革蘭氏染色,同時接種乳糖發酵管,置(36±1)℃的溫箱內培養(24±2)h,觀察產氣情況。凡乳糖發酵管產氣,革蘭氏染色為陰性無芽胞桿菌,即報告為大腸桿菌陽性;凡乳糖發酵管不產氣或革蘭氏染色為陽性,則報告為大腸桿菌為陰性。
3報告:根據證實為大腸菌群陽性的管數,查MPN檢索表,報告每100ml(g)食品中大腸菌群的最可能數。
二、食品中病原菌的檢驗:主要有沙門氏菌屬、志賀氏菌屬、霍亂弧菌屬、黴菌真菌等等。國內主要是指沙門氏和志賀氏,試劑主要為SS瓊脂。將樣品(增菌後)稀釋塗布在SS瓊脂上面,然後看長出的菌落,找一些圖片做對照,一致的話說明有致病菌,沒有的話就說明PASS。一般沙門氏或志賀氏菌落是無色透明或粉紅色菌落,表面光滑,產硫化氫的菌落中心有黑點。
⑵ 食品微生物檢驗內容與檢測技術方法
食品微生物檢驗內容與檢測技術方法
近年來,世界各地出現了諸多嚴重的食品安全事故,由於食品微生物污染而造成的質量事故嚴重威脅著人們的身體健康,如何做好食品微生物檢驗,確保食品質量安全,就需要社會各界共同努力。根據國際和國內衛生組織的相關規定和要求,所有的食品生產廠商都要對食品的質量進行嚴格的檢驗,對於生產出來食品的菌落種類、細菌數量、大腸菌群、沙門氏菌、金黃色葡萄球菌等進行檢測,必須達到要求的合格標准才能進入市場進行出售。下面是我為大家帶來的食品微生物檢驗內容與檢測技術方法的知識,歡迎閱讀。
需要注意的問題
一是工作人員及活動規定。必須保證參加檢測的人員具有相應的資格,並通過相關的考試後,持證上崗才能開展相關活動。同時要求工作人員不僅需要具有高超的專業技術,還應該有良好的職業道德修養,盡可能降低人為問題的制約。檢測過程需要按照相關的活動規范和流程進行,使用無菌設備認真地進行抽樣活動,採用先進技術獲取相關信息。二是存放裝置。若想檢測過程順利進行,除了確保實驗室有必要的設施外,還應該重點考慮裝置存放的條件和要求。三是裝置和葯品的配置。在各項裝置進行安裝時應該對氣溫進行調節,確保其安穩,對裝置氣溫穩定性合乎規定要用的具體時間詳細記錄。同時在規定的時間內對各種裝置進行消毒處理,並通過感應設備對其運作狀態進行監測。對於葯品的配置,培養基往往在121℃下採用高壓濕熱滅菌法滅菌15分鍾;較為敏感的'培養基一般採用膜過濾法。四是樣本的處理。在樣本收集過程中,需要確保抽樣活動是在無菌環境下展開的,有效避免了樣本被污染。在樣本輸送時,應該防止樣本受到光線的影響而出現污染現象,抽樣之後就應該及時將其送至測試場地。一般樣本輸送時間要控制在3h內,如果無法及時送到,要確保在近乎之前的氣溫時將其完整的存放。
食品微生物檢驗內容
一是檢驗食品污染程度指示菌。細菌總數即菌落總數,是食品和生活飲用水檢樣處理後,在特定培養條件下,所得1g或者1mc檢樣中所含有的細菌菌落個數,這就是判斷食品和生活飲用水污染程度的關鍵指標。大腸菌群系是在37℃下培養24h的一群發酵乳糖、產氣、產配以及需氧或者厭氧的革蘭氏染色陰性無芽胞桿菌。這種菌群主要來源於人和牲畜的糞便,因此,可以用糞便的污染指標菌對食品的衛生質量進行評價。二是檢測食品中治病菌。在食品微生物相關檢驗標准中已經明確規定某些微生物的數量,因此在對食品污染程度指示菌檢測的同時,還應該對一些治病菌進行測定,如沙門氏菌、金黃色葡萄球菌等。
食品微生物檢測技術方法
很長時間以來,開展的此項檢測活動,是按照瓊脂平板的措施來進行的,通常要兩到三天的時間才可以完成。最近,許多的專家和組織都不斷地對工藝以及措施進行深化分析,獲取了非常高的成就,對許多措施進行了改進,切實提升了檢測的精準性以及安穩性特徵,而且獲取了許多全新的工藝,具體有如下的措施:
1.採用電阻抗法。具體的講,它是指細菌繁衍的時候,將會使培養基中的火分電惰性物質如碳水化合物、蛋白質和脂類等,代謝為具有電活性的小分子物質,其能增加培養基的導電性,進而導致阻抗出現改變,因此,可以通過檢測培養基的電阻抗變化情況來判定細菌在培養基中的生長繁殖特性,即可檢測出相應的細菌。
2.採用快速酶觸反應及代謝產物的檢測。細菌在生長繁殖過程中可合成和釋放某些特異性的酶,所以根據其特性來選用相對應的底物和指示劑,而且合理的記載信息。
3.採用分子生物學技術。它涵蓋兩項內容:1)核酸探針技術。結合鹼基互補相關的概念,使用獨特的措施來對物體進行標注。2)聚合酶鏈式反應(PCR)技術。其原理為通過加熱使雙鏈DNA經裂解成兩條單鏈,成為引物和DNA聚合酶的模板;接下來把氣溫變低,使寡聚核苷酸引物與DNA分子上的互補序列退火。通常狀態中,當退火的氣溫非常高的話,它的擴增特性就十分的優秀。
4.採用免疫學方法檢測細菌抗原和抗體的技術。具體有三項措施:1)熒光抗體檢測技術(IFA),它又有兩種,分別是直接的以及間接地。其中第一種是直接在樣本上滴加已知特異性熒游標記的抗血清,然後對其清洗,進而獲取信息。而後一種措施是在檢樣上滴加已知細菌特異性抗血清,等到發生反映之後再仔細地清洗,再加入熒游標記的抗體後在熒光顯微鏡下觀察結果。2)免疫酶技術(EIA),其是將抗原、抗體特異性反應和酶的高效催化作用原理結合,此法非常的獨特,而且功效非常好。通過共價結合將酶與抗原或抗體結合,形成酶標抗原或抗體,或通過免疫方法使酶與抗酶抗體結合,形成酶抗體復合物。3)免疫磁珠分離法(IMS),即應用抗體包被的免疫磁珠,用一個磁場裝置收集鐵珠。
5.採用儀器法。1)微型全自動熒光酶標分析儀(Mini-VIDAS),其主要採用具有優異的敏感性和特異性的酶聯熒光技術(ELFA),得到的熒光和抗原的比例是一種順向的關系。2)全自動微生物分析系統(Vietk-AMS)。它能夠一次對非常多的樣本開展分析,而且檢測的時間不需要非常久,通常在兩到三個小時即可,此法的效率非常好,同時也將成為檢測行業全行的發展趨勢。
;⑶ 水分活度的測定方法有哪些
水分活度的測定方法有哪些介紹如下:
水分活度的測定方法:有蒸氣壓法、電濕度計法、溶劑萃取法、近似計演算法和儀器測定法。
一、水分活度定義
水分活度(Aw,Water Activity)也稱水活度或水活性,是在相同溫度下樣品中水的蒸氣壓(P)與純水蒸汽壓(Po)的比值。樣品的水分活度也等於在一個密閉的倉內,當蒸氣和溫度達到平衡時,圍繞在樣品周圍的空氣的相對濕度(ERH)。空氣的相對濕度是空氣的蒸氣壓和飽和蒸汽壓的比值。
二、水分活度的作用
水分活度決定了微生物在食品中的萌發的時間、生長速率及死亡率。不同的微生物在醫葯、飼料、糧食食品中繁殖時對水分活度的要求不同。細菌對水分活度最敏感,酵母菌次之,黴菌的敏感性最差。
四、了解食品中水分活度
在食品領域里,水分活度反映食品中水分能夠被微生物利用的程度,能直接影響食品的「保質期、色澤、香味、風味和質感」,是食品安全,食品研究,設計,開發,品質控制非常重要的指標。為了保障產品在運輸保存中不易變質,對出廠食品的水分活度都有嚴格要求。
水分活度是食品測量的一項重要指標,在食品安全的控制上起到非常重要的作用,在食品行業使用廣泛。近幾年我國在食品安全上屢出事故,全國人民對於食品的安全也高度關注。
⑷ 純化水微生物限度檢查法
採用濾膜法進行微生物檢測是一種國際公認的微生物標准檢驗方法,其得到AOAC、美國、歐洲和日本等國家的葯典、FDA和EPA等組織的承認,廣泛應用於環境監測、食品及飲料工業、化妝品、制葯工業品質控制和電子工業等領域。賽多利斯公司的濾膜法微生物檢測產品成功地應用於濾膜法已有20多年的歷史,實用而且方便實用,它簡化了微生物檢測程序。 濾膜法微生物檢測: 將適當孔徑的濾膜放入濾器,過濾樣品,由於濾膜的作用而將微生物保留在膜的表面上。樣品中微生物生長抑制劑可在過濾後用無菌水沖洗濾器而除去。然後,將濾膜放在培養基上培養,營養物和代謝物通過濾膜的微孔進行交換,在濾膜表面上培養出的菌落可以計數,並和樣品量相關。 濾膜法的優點: - 與直接法比較,可以檢測大量的樣品 - 濃縮效應使微生物檢測的准確度提高 - 帶有菌落的濾膜,可作為檢測的永久記錄存檔 - 可見的菌落和樣品量直接對應,得出定量結果 操作具體一點就是:薄膜過濾法檢測,一個樣過濾一份,就是200ml的純化水通過濾膜,將該濾膜浸泡在滅菌好的l生理鹽水中,再接種到平皿中,製成10級、100級、1000級稀釋倍數的細菌、黴菌和酵母菌稀釋培養皿,即可
⑸ 純化水微生物限度檢測一般採用什麼方法進行
濾膜法是國際公認的微生物標准檢驗方法,廣泛應用於多個領域,如環境監測、食品及飲料工業、化妝品、制葯工業品質控制和電子工業。它通過使用具有適當孔徑的濾膜,過濾樣品,將微生物保留在膜表面。濾膜法具有顯著優勢,相較於直接法,能夠檢測大量樣品,提高檢測准確性,濾膜上培養出的菌落作為永久記錄,菌落與樣品量直接對應,得出定量結果。操作步驟包括:將200ml純化水通過濾膜,將濾膜浸泡在滅菌生理鹽水中,再接種至不同稀釋倍數的細菌、黴菌和酵母菌培養皿。此方法簡化了微生物檢測程序,高效、實用,成為現代微生物檢測的首選方法。