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蛋白銅的檢測方法

發布時間:2024-11-24 11:19:50

1. 蛋白粉含銅量

研究我國不同地區間各種飼料原料中銅含量分布情況,以及我國畜禽基礎飼糧中銅水平,從而為飼糧中合理添補銅提供依據。方法 對采自全國31個省、直轄市和自治區的7大類(穀物籽實、穀物籽實加工副產品、植物性蛋白飼料、動物性蛋白飼料、牧草類、秸稈類和礦物質飼料)37種飼料原料共3 903個飼料樣品,經預處理後用MARS6高通量密閉微波消解系統進行微波消解,然後用IRIS Intrepid II等離子體發射光譜儀測定其銅含量。用國家標准物質豬肝粉或黃豆粉作為參照標准,以保證測定結果的可靠性。結果 飼料原料中銅含量測定結果表明:穀物籽實(包括玉米、小麥、稻穀和大麥)平均銅含量為3.95 mg·kg -1(范圍為2.50—5.34 mg·kg -1);穀物籽實加工副產品(包括玉米蛋白粉、玉米DDGS、玉米胚芽粕、次粉、小麥麩、小麥DDGS、碎米和米糠)平均銅含量為7.16 mg·kg -1(范圍為1.62—12.13 mg·kg -1);植物性蛋白飼料(包括膨化大豆、大豆粕、菜籽粕、棉籽粕、花生粕、亞麻粕和葵花粕)平均銅含量為16.37 mg·kg -1(范圍為6.45—30.40 mg·kg -1);動物性蛋白飼料(包括魚粉、肉粉、水解羽毛粉、腸膜蛋白粉、血漿蛋白粉和血球蛋白粉)平均銅含量為11.14 mg·kg -1(范圍為1.90—20.04 mg·kg -1);牧草類(包括羊草、黑麥草、苜蓿和青貯玉米)平均銅含量為7.85 mg·kg -1(范圍為4.31—9.92 mg·kg -1);秸稈類(包括玉米秸稈、小麥秸稈、稻秸和甘薯藤)平均銅含量為7.50 mg·kg -1(范圍為3.38—13.89 mg·kg -1);礦物質飼料(包括石粉、磷酸氫鈣、骨粉和貝殼粉)平均銅含量為6.79 mg·kg -1(范圍為3.39—11.45 mg·kg -1)。這37種飼料原料的平均銅含量范圍為1.62—30.40 mg·kg -1,而各類飼料原料銅含量分布規律是:植物性蛋白飼料(16.37 mg·kg -1)>動物性蛋白飼料(11.14 mg·kg -1)>牧草類飼料(7.85 mg·kg -1)>秸稈類飼料(7.50 mg·kg -1)>穀物籽實加工副產品(7.16 mg·kg -1)>礦物質飼料(6.79 mg·kg -1)>穀物籽實(3.95 mg·kg -1)。以省(區)為單位比較,發現不同地區間的玉米、小麥和大豆粕的銅含量差異顯著(P<0.05)。四川省玉米和大豆粕銅含量最高(分別為2.97和15.74 mg·kg -1),內蒙古自治區最低(分別為1.66和11.72 mg·kg -1);甘肅省小麥銅含量最高(5.61 mg·kg -1),河北省最低(4.02 mg·kg -1)。根據全國各地豬、雞常用的152個飼料配方計算出基礎飼糧中可提供的銅含量為5.07—6.54 mg·kg -1,如根據我國及美國NRC豬、雞飼養標准中銅營養需要量的要求,基礎飼糧中的銅含量基本可提供豬的銅營養需要,可提供雞大部分銅的營養需要,但上述估算尚未考慮不同飼料原料中銅的利用率。結論 我國不同種類和不同地區飼料原料中銅含量差異較大,全國豬、雞常用基礎飼糧配方中銅含量可提供豬、雞大部分的銅營養需要量。因此,建議在配製飼糧時,應充分考慮不同地區基礎飼糧中的銅含量及其利用率,精準配製飼糧,以滿足畜禽高效生產需要,同時減少銅的添加和排放對環境的污染。

2. 蛋白質用什麼檢驗

蛋白質的檢測通常使用雙縮脲試劑,這是一種專門用於鑒定蛋白質的分析化學試劑。雙縮脲試劑是一種鹼性的含銅試液,通常呈現藍色,其主要成分包括0.1g/mL氫氧化鈉或氫氧化鉀、0.01g/mL硫酸銅以及酒石酸鉀鈉。當蛋白質樣本與雙縮脲試劑反應時,會呈現紫色,這是因為蛋白質分子中含有大量的與雙縮脲結構相似的肽鍵,導致與銅離子在鹼性溶液中發生雙縮脲反應。

雙縮脲試劑最初是用來檢測雙縮脲的,但因其具有與蛋白質類似的反應特性,便被廣泛用於蛋白質檢測。在檢測過程中,當底物中存在肽鍵(如多肽)時,試液中的銅離子與多肽配位,形成絡合物,該絡合物呈紫色。通過比色法分析,可以在紫外可見光譜中的波長為540nm處檢測到顏色變化,從而確定蛋白質濃度。雙縮脲試劑的靈敏度范圍為5-160mg/ml,能夠准確地測定蛋白質含量。

值得注意的是,雙縮脲試劑中真正起作用的是硫酸銅,而氫氧化鉀僅是為了提供鹼性環境,因此可以被其他鹼如氫氧化鈉所替代。在試劑中加入碘化鉀能夠延長其使用壽命,而酒石酸鉀鈉的作用是防止反應生成的絡離子析出形成沉澱,進而避免試劑失效。

3. 實驗室bca是什麼意思

實驗室BCA是一種常見的生化分析方法,它主要用於檢測體液中的蛋白質含量。BCA全稱為Bicinchoninic Acid,中文意思是「雙吡啶甲酸」,該方法的原理是利用銅離子與蛋白質中的蛋白質醯基反應生成紫色絡合物,然後通過比色法檢測其吸光度來確定蛋白質含量。BCA的精度和靈敏度較高,而且操作簡便,因此被廣泛地應用於生物醫學研究及臨床診斷領域。


應用實驗室BCA方法測定蛋白質含量的步驟如下:將待測樣品加入含有BCA試劑的培養基中,然後在37℃下反應一段時間。加入比色劑,再次在37℃下反應。將反應後的試管放入分光光度計中測定吸光度。4.根據標准曲線來計算蛋白質的含量。需要注意的是,在操作實驗室BCA過程中,對於樣品的處理、預處理等步驟也十分關鍵,這些步驟的質量將影響到實驗的准確性和精度。


實驗室BCA方法雖然有著精度高、靈敏度強等優點,但在有些情況下也存在著一定的局限性和缺陷。比如,由於BCA是一種顏色敏感法,可能會受到其他化學分子的干擾,從而導致結果的偏差。因此,在使用實驗室BCA方法時,我們必須要對樣品進行處理和分析,同時保證操作的准確性和安全性,以獲得可靠的結果。另外,在實踐中,需要根據具體的研究需求和條件選擇合適的實驗室BCA方法,並結合其他方法互相印證,從而更好地進行科學研究。

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