⑴ 尿蛋白尿白蛋白檢測及臨床應用
尿蛋白尿白蛋白檢測在早期腎損害診斷中扮演著重要角色,尤其對於常規方法難以檢測到的白蛋白尿。常見的檢測方法包括放射免疫法、ELASA法等,其中免疫透射比濁法應用廣泛,但報告方式各異,有的以每升尿中白蛋白含量表示,有的則以24小時排泄量或白蛋白/肌酐比值呈現。我們對正常人尿白蛋白的正常值進行了統計,並針對高血壓、糖尿病患者進行了測定。具體步驟包括使用尿白蛋白和肌酐測定試劑盒,通過凱創公司的產品和瑞士產Cobas MIRA plus全自動生化分析儀進行檢測。
研究對象包括健康對照組(70例,無腎病史),糖尿病組(42例)和高血壓組(62例),分別測定尿蛋白和肌酐,報告結果以白蛋白/肌酐比值的形式。結果顯示,尿蛋白的正常值因計算方法不同而有所差異,如以mg/L計,范圍為2.2~41.7 mg/L,均值12.7 mg/L。不同計算方法下的正常范圍差異顯著,尤其是每升尿白蛋白的報告,受尿量影響大,可能導致正常值范圍較寬,可能延誤部分異常標本的診斷。
在高血壓組中,即使尿蛋白定性陰性,通過眼底改變和心電圖改變也可以診斷為Ⅱ期高血壓。測量結果顯示,隨著高血壓病期、病程和舒張壓的增加,尿白蛋白水平也相應升高。而在糖尿病組,根據病程的長短,尿白蛋白水平明顯增加,且治療情況與結果有顯著關聯。尿微量白蛋白的測定盡管以24小時標本最理想,但隨機尿測定因其簡便易行,常被用於臨床實踐,但需同時測定肌酐以消除尿量變化的影響。
總的來說,尿蛋白尿白蛋白檢測是早期腎損害診斷的關鍵工具,通過不同計算方法和標本類型,可以更准確地評估患者腎功能,對於疾病的早期識別和管理具有重要意義。然而,實際操作中需考慮標本收集的便捷性與准確性之間的平衡。
血液中常會有定量的對人類生命活動不可或缺的蛋白存在。一部分的蛋白會在腎臟的絲球體中過濾進入尿液中,但又會在腎小管被吸收而回到血液中。 因此,若腎臟的機能正常,在尿液中出現的蛋白量只有一點點,但是當腎臟與尿管出現障礙時就會漏出多量的蛋白變成蛋白尿。正常人尿中有微量蛋白,正常范圍內定性為陰性,記為(-)。尿中蛋白質含量多達0.15g/24h以上時,稱蛋白尿,尿常規定性可出現陽性。
⑵ 24小時微量白蛋白正常值
檢測患者出現蛋白尿的幾種方式具體如下:
1、24小時尿蛋白定量檢測:24小時尿白蛋白的正常值不超過150mg/天;
2、尿蛋白:通過尿常規觀察尿里的蛋白質含量。通常蛋白質以(+)、(++)、(+++)表示,或以定量的方式,如0.3g/L、0.5g/L、0.7g/L、1g/L、1.5g/L,或2g/L、3g/L、6g/L等來進行表示;
3、尿微量白蛋白:尿微量白蛋白通常是看某一點的尿微量白蛋白,亦可做24小時的尿微量白蛋白。24小時的尿微量百分百通常不要超過30mg/天。
尿常規蛋白定性為蛋白質陽性,尿微量白蛋白為30-300mg/L,或24小時尿蛋白定量超過150mg/天,均稱為蛋白尿。當患者出現蛋白尿時,應進一步尋找引起蛋白尿的原因。
⑶ 如何分辨人血白蛋白
一般檢測方法:人血白蛋白為健康人血漿提純的蛋白制劑,根據蛋白質在酸性條件下加入沉澱劑-10%鎢酸鈉溶液,使蛋白質沉澱的原理,快速鑒別方法只需樣品1ml與10%鎢酸鈉溶液5ml和0.33mol/L硫酸溶液5ml置於試管中,觀察試管中的絮狀物(沉澱)即可,假冒的白蛋白一般無絮狀物產生,說明其中根本沒有蛋白質。按葯典收載的免疫擴散試驗,假冒產品均不與抗人的血清產生沉澱線,其鑒別結果不呈正結果。兩者具有完全的一致性。
PS:送葯監局,這個基本沒有可行性。不信你就給當地的打個電話試試。不是法院送的,葯監局或者其他有資質的醫療鑒定機構,都不會給個人做人血白蛋白鑒定檢測的。
⑷ 確定血清白蛋白純度和生物活性鑒定方法 並且確定所用試劑儀器,急求,謝謝
標准曲線製作—考馬斯亮藍法測蛋白質含量
一、 標准曲線 一般用分光光度法測物質的含量,先要製作標准曲線,然後根據標准曲線查出所 測物質的含量。因此,製作標准曲線是生物檢測分析的一項基本技術。
二、 蛋白質含量測定方法 1、 凱氏定氮法 2、 雙縮脲法 3、 Folin-酚試劑法 4、 紫外吸收法 5、 考馬斯亮藍法 三、 考馬斯亮藍法測定蛋白質含量—標准曲線製作 (一)、試劑: 1、 考馬斯亮藍試劑: 考馬斯亮藍G—250 100mg溶於50ml 95%乙醇,加入100ml 85% H3PO4,雍 蒸餾水稀釋至1000ml,濾紙過濾。最終試劑中含0.01%(W/V)考馬斯亮藍G—2 50,4.7%(W/V)乙醇,8.5%(W/V)H3PO4。 2、 標准蛋白質溶液: 純的牛血清血蛋白,預先經微量凱氏定氮法測定蛋白氮含量,根據其純度同0.15 mol/LNaCl配製成100ug/ml蛋白溶液。 (二)、器材: 1、722S型分光光度計使用及原理()。 2、移液管使用()。 (三)、標准曲線製作: 試管編號 0 1 2 3 4 5 6 100ug/ml標准蛋白(ml) 0.0 0.1 0.2 0.3 0.4 0.5 0.6 0.15mol/L NaCl (ml) 1 0.9 0.8 0.7 0.6 0.5 0.4 考馬斯亮藍試劑 (ml) 5 5 5 5 5 5 5 搖勻,1h內以1號管為空白對照,在595nm處比色 A595nm
2、以A595nm為縱坐標,標准蛋白含量為橫坐標(六個點為10ug、20 ug、30 ug、40 ug、50 ug、60 ug),在坐標軸上繪制標准曲線。 1)、利用標准曲線查出回歸方程。 2)、用公式計算回歸方程。 3)、或用origin作圖 ,測出回歸線性方程。即A595nm=a×X( )+6 一般相關系數應過0.999以上,至少2個9以上。 4)、繪圖時近兩使點在一條直線上,在直線上的點應該在直線兩側。 (四)、蛋白質含量的測定: 樣品即所測蛋白質含量樣品(含量應處理在所測范圍內),依照操作步驟1操作, 測出樣品的A595nm,然後利用標准曲線或回歸方程求出樣品蛋白質含量。 一般被測樣品的A595nm值在0.1—0.05之間,所以上述樣品如果A595nm值太 大,可以稀釋後再測A595nm值,然後再計算。 (五)、注意事項: 1、 玻璃儀器要洗滌干凈。 2、 取量要准確。 3、 玻璃儀器要乾燥,避免溫度變化。 4、 對照:用被測物質以外的物質作空白對照。