① 氨基酸的測序的方法和原理
建議參考王鏡岩的生物化學
攜蘇丹來奔以色列
纈氨酸 蘇氨酸 蛋氨酸(甲硫氨酸) 賴氨酸
苯丙氨酸 異亮氨酸 色氨酸 亮氨酸
② 蘇氨酸的L-蘇氨酸的生產及檢測方法
蘇氨酸的生產方法主要有發酵法蛋白質水解法和化學合成法3種,微生物發酵法生產蘇氨酸,因其工藝簡單,成本低廉等優點已成為目前主流方法。發酵中間過程中蘇氨酸含量的測定方法有多種,主要有氨基酸分析儀法、茚三酮法、紙層析法、甲醛滴定法等 。
③ 國標 氨基酸的檢測方法
國家標准檢測食品中的氨基酸是採用先將食品中蛋白質經鹽酸水解成為游離氛基酸,經氨基酸分析儀的離子交換柱分離後,與印三酮溶液產生顏色反應,再通過分光光度計比色瀏定氨基酸含量。
④ 飼料中賴氨酸含量是怎麼鑒定的
蘇氨酸是由W.C.Rose 1935年從纖維蛋白水解產物中分離和鑒定出來的,現已證明是最後被發現的必需氨基酸,它是畜禽的第二或第三限制性氨基酸,它在動物體內具有極其重要的生理作用。如促進生長、提高免疫機能等;平衡日糧氨基酸,使氨基酸比例更接近於理想蛋白質,從而降低畜禽對飼料中蛋白含量的要求。缺乏蘇氨酸,可導致動物採食量降低、生長受阻、飼料利用率下降、免疫機能抑制等症狀。近年來,賴氨酸、蛋氨酸合成品在飼料中得到了廣泛應用,蘇氨酸逐漸成為影響動物生產性能的限制性因素,對蘇氨酸的進一步研究,有助於有效地指導畜禽生產。 1、蘇氨酸的理化性質 蘇氨酸的化學名稱為α-氨基-β-羥丁酸,因其結構類似於蘇糖,故命名為蘇氨酸,是最後發現的必需氨基酸。其分子式為C4H9NO3,結構式為CH3-CH(OH)-CH(NH2)-COOH,相對分子質量為119.18。從結構式可以看出,蘇氨酸分子中具有2個不對稱碳原子,有4種異構體,其中D-蘇氨酸不能被動物吸收利用。天然存在的 L-蘇氨酸為無色或微黃色晶體,無臭、微甜,可溶於水,20 ℃時溶解度為9 g/100 mL,難溶於有機溶劑,熔點為253~257℃;D-蘇氨酸為斜方晶,是無色或白色結晶粉末,溶於水,不溶於有機溶劑,易被鹼破壞,熔點229 ℃~230 ℃。 蘇氨酸是唯一不經過脫氨基和轉氨基作用而是通過蘇氨酸脫水酶和蘇氨酸脫氫酶以及蘇氨酸醛縮酶催化轉變為其他物質。蘇氨酸除了可以平衡體內的氨基酸之外,還可以作為一碳單位來源,參與嘌呤和嘧啶的生物合成以及S-腺苷甲硫氨酸的生物合成、並可作為各種化合物甲基化的供體。2、蘇氨酸在養豬生產中的作用 2.1 平衡氨基酸,促進體內蛋白的合成,降低日糧蛋白水平 蘇氨酸的一個重要作用是平衡氨基酸,促進蛋白質合成。日糧中不同的氨基酸水平及比例會影響動物體內氮的利用。添加蘇氨酸可平衡整體氨基酸水平,使蘇氨酸與賴氨酸保持適當的比例對生產性能的影響尤為明顯,馮傑、許梓榮(2003)研究表明,賴氨酸和蘇氨酸的比值為0.72時效果最好
⑤ 氨基酸的檢測方法GB/T18246-2000
給你個標准 你下載下來看看
免費下載地址:
GB/T 18246-2000 飼料中氨基酸的測定.rar
http://www.bzfxw.com/soft/sort059/sort076/767534.html
⑥ 食品中微量氨基酸含量的檢測方法有哪些
超高效液相、質譜聯用
等等
這個靈敏度還要看你的衍生方法,以及氨基酸的種類
⑦ 蛋白質氨基末端氨基酸的測定方法
測定蛋白質最基本的方法是定氮法,即先測定樣品中的總氮量,再由總氮量計算出樣品中蛋白質的含量.蛋白質含量測定最常用的方法是凱氏定氮法,它是測定總有機氮的最准確和操作較簡便的方法之一,在國內外應用普遍.此外,雙縮脈法、染料結合法、酚試劑法等也常用於蛋白質含量測定,由於方法簡便快速,故多用於生產單位質量控制分析. 蛋白質及氨基酸的測定 蛋白質是生命的物質基礎,是構成生物體細胞組織的重要成分,一切有生命的活體都含有不同類型的蛋白質.人體內的酸鹼平衡、水平衡的維持;遺傳信息的傳遞;物質的代謝及轉運都與蛋白質有關.人及動物只能從食品得到蛋白質及其分解產物,來構成自身的蛋白質,故蛋白質是人體重要的營養物質,也是食品中重要的營養指標. 蛋白質是復雜的含氮有機化合物,分子量很大,它們由20種氨基酸通過醯胺鍵以一定的方式結合起來,並具有一定的空間結構.不同的蛋白質其氨基酸構成比例及方式不同,故各種不同的蛋白質其含氮量也不同.蛋白質可以被酶、酸或鹼水解,最終產物為氨基酸.氨基酸是構成蛋白質的最基本物質,在構成蛋白質的氨基酸中,亮氨酸、異亮氨酸、賴氨酸、苯丙氨酸、蛋氨酸、蘇氨酸、色氨酸和纈氨酸等8種氨基酸在人體中不能合成,必須依靠食品供給,故被稱為必需氨基酸,它們對人體有著極其重要的生理功能,常會因其在體內缺乏而導致患病,或通過補充而增強了新陳代謝作用.所以食品及其原料中蛋白質和氨基酸的分離、鑒定和定量具有極其重要的意義. 蛋白質的測定 測定蛋白質最基本的方法是定氮法,即先測定樣品中的總氮量,再由總氮量計算出樣品中蛋白質的含量.蛋白質含量測定最常用的方法是凱氏定氮法,它是測定總有機氮的最准確和操作較簡便的方法之一,在國內外應用普遍.此外,雙縮脈法、染料結合法、酚試劑法等也常用於蛋白質含量測定,由於方法簡便快速,故多用於生產單位質量控制分析. 微量凱氏定氮法 本法適用於各類食品中蛋白質的測定. 1.原理 食品與硫酸和催化劑一同加熱消化,使蛋白質分解,分解的氨與硫酸結合生成硫酸胺.然後鹼化蒸餾使氨游離,用過量硼酸吸收後再以硫酸或鹽酸標准溶液滴定,根據酸的消耗量乘以換算系數,即為蛋白質含量.反應過程分為三個階段,用反應式表示如下. ①消化 2NH2(CH2)2COOH 4-13H2S04一(NH.)2S04+6C02+12S0=+16H20 (NH4)2S04+2Na()H一2NH3十+2H20+.Na2S04 2NH3+4H3803—,(NH4)2 B207+5H20 ③滴定 (NH4)2 B2 07+2HCl+5H20—NH4C1+4H3803 2.儀器 ①消化爐. ②凱氏定氮蒸餾裝置. 3.試劑 所用試劑均用不含氨的蒸餾水配製.試劑均為分析純. ①CuS04. ②K2SO. ③濃H2SO. ④2%H.BO.溶液. ⑤混合指示劑:1份O.1%甲基紅乙醇溶液與5份O.1%溴甲酚綠乙醇溶液臨用時混合.也可用2份O.1%甲基紅乙醇溶液與1份0.1%次甲基藍乙醇溶液臨用時混合. ⑥飽和氫氧化鈉:500 g氫氧化鈉加入500 mL水中,攪拌溶解,冷卻後放置數日,澄清後使用. ⑦0.01 toolI.一』或0.05 toolL叫HCl標准溶液(需用無水碳酸鈉標定後使用). 4.操作步驟 ①樣品消化:精密稱取O.2~2.0 g固體樣品或2~5 g半固體樣品或吸取液體樣品5~20mI.,放人500 mI.乾燥凱氏燒瓶中,加人O.2 g硫酸銅、3 g硫酸鉀及20 mL濃HzSOa,於凱氏瓶口放一小漏斗,並將其以45.角斜支於有小孔的石棉網上.(更多詳細咨詢請參考國家標准物質網 www.rmhot.com )用電爐以小火加熱,待內容物全部碳化,泡沫停止產生後,加大火力,保持瓶內液體微沸,至液體變藍綠色透明後再繼續加熱微沸30 min.冷卻,小心加入20 mL水,再放冷至室溫,移人100 mL容量瓶中,並用少量水洗燒瓶洗液並人容量瓶,在加水至刻度,混勻備用.除不加樣品外,取與處理樣品相同量的硫酸銅、硫酸鉀、硫酸,按同一方法做試劑空白消化. ②水蒸氣發生瓶內裝水至約2/3處,加甲基紅指示液數滴及數毫升硫酸,以保持水呈酸性,加入數粒玻璃珠以防暴沸,加熱煮沸水蒸氣發生瓶內的水. ③向接收瓶內加入10 mL 2%硼酸溶液及混合指示液l滴,並使冷凝管的下端插入液面下,吸取lO mI.樣品消化稀釋液由小玻璃杯流人反應室,並以10 mL水洗滌小燒杯使之流人反應室內,塞緊小玻璃杯的棒狀玻璃塞.將3~10 mL飽和氫氧化鈉溶液倒人小玻璃杯中,提起玻璃塞使其緩緩流入反應室,立即將玻璃塞蓋緊,並加水於小玻璃杯中以防漏氣.加緊螺旋夾,開始蒸餾.蒸汽通人反應室使氨通過冷凝管而進入接收瓶內,蒸餾2~5 min,移動接收瓶,使冷凝管下端離開液面,然後用少量中性水沖洗冷疑管下端外部,再蒸餾1 min取下接收瓶,以0.01 molI.叫或O.05 molL1HCl標准溶液滴定至灰色或藍紫色為終點.同時吸取10 mI_,試劑空白消化液按③操作. 5.計算 6.說明 ①干樣用稱量紙稱重連紙一同消化,空白管同樣放稱量紙消化. ②含糖量高和油脂高的樣品消化時容易溢出,加熱要緩慢. ③氨是否蒸餾完全,可用pH試紙測試餾出液是否為鹼性來判斷. ④實驗前必須仔細檢查蒸餾裝置的各個連接處,保證不漏氣.所用橡皮管、塞子須浸在氫氧化鈉(10%)中,煮沸10 min,然後水洗、水煮,再用水洗. ⑤小心加樣,切勿使樣品沾污凱氏燒瓶口部和頸部.
⑧ 測定氨基酸含量的方法有幾種
1)稱乾重法.可用離心法或過濾法測定.優點:可適用於一切微生物,缺點:無法區別死菌和活菌.
2)比濁法.原理:由於微生物在液體培養時,原生質的增加導致混濁度的增加,可用分光光度計測定.優點:比較准確.
3)測含氮量,大多數微生物的含氮量占乾重的比例較一致,根據含氮量再乘以6.25即可測得其粗蛋白的含量.
4)血球計數板法.優點:簡便、快速、直觀.缺點:結果包括死菌和活菌.
5)液體稀釋法.對未知菌樣作連續的10倍系列稀釋,經培養後,記錄每個稀釋度出現生長的試管數,然後查MPN表,再根據樣品的稀釋倍數就可計算其中的活菌含量.優點:可計算活菌數,較准確.缺點:比較繁瑣.
6)平板菌落計數法.取一定體積的稀釋菌液塗布在合適的固體培養基,經培養後計算原菌液的含菌數.優點,可以獲得活菌的信息.缺點:操作繁瑣,需要培養一定時間才能獲得,測定結果受多種因素的影響.
⑨ 檢驗氨基酸用什麼方法
1.茚三酮反應,氨基酸與其發生反應縮合成藍色物質。除開脯氨酸和羥脯氨酸,他們與其反應生成黃色衍生物。
2.桑格反應,氨基酸與其反應會生成黃色的2,4-二硝基氨基酸,可以用於鑒定多肽或蛋白質的N端氨基酸。
3.艾德曼反應(DNFB反應),即氨基酸與苯異硫氰酸反應生成相應的苯氨基硫甲醯氨基酸。
⑩ 我要測定大米中賴氨酸和蘇氨酸的含量,求完整國標方法。謝謝了。
大米氨基酸含量:單位(mg/100g大米)
異亮氨酸 278
亮氨酸 549
賴氨酸 239
蛋氨酸 181
胱氨酸 166
苯丙氨酸357
酪氨酸 307
蘇氨酸 241
色氨酸 128
纈氨酸 394
精氨酸 581
組氨酸 141
丙氨酸 388
天冬氨酸 587
谷氨酸 1219
甘氨酸 303
脯氨酸 272
絲氨酸 338
大米的蛋白質含量可以按8g蛋白質/100g大米來算,也就是說上面的數字除以8就是你要的數據。