基於半數致死量殘留限度檢測方法

『壹』 環境毒理學的實驗方法

環境污染物對機體毒作用的評定，主要是通過以下幾種動物實驗方法進行的：
急性毒性試驗：其目的是探明環境污染物與機體作短時間接觸後所引起的損害作用，找出污染物的作用途徑、劑量與效應的關系，並為進行各種動物實驗提供設計依據。一般用半數致死量、半數致死濃度或半數有效量來表示急性毒作用的程度。
亞急性毒性試驗：研究環境污染物反復多次作用於機體引起的損害。通過這種試驗，可以初步估計環境污染物的最大無作用劑量和中毒閾劑量，了解有無蓄積作用，確定作用的靶器官，並為設計慢性毒性試驗提供依據。
慢性毒性試驗：探查低劑量環境污染物長期作用於機體所引起的損害，確定一種環境污染物對機體的最大無作用劑量和中毒閾劑量，為制訂環境衛生標准提供依據。
為了探明環境污染物對機體是否有蓄積毒作用，致畸、致突變、致癌等作用，隨著毒理學的不斷進展，人們又建立了蓄積試驗、致突變試驗、致畸試驗和致癌試驗等特殊的試驗方法。
環境毒理學的研究主要以動物實驗研究為主，觀察實驗動物通過各種方式和途徑，接觸不同劑量的環境污染物後出現的各種生物學變化。實驗動物一般為哺乳動物，也可利用其他的脊椎動物、昆蟲以及微生物和動物細胞株等。
用動物實驗來觀察環境污染物對機體的毒作用，條件容易控制，結果明確，便於分析，是評定環境污染物毒作用的基本方法。但動物與人畢竟有差異，動物實驗的結果，不能直接應用於人。因此，一種環境污染物經過系統的動物毒性試驗後，還必須結合環境流行病學對人群的調查研究結果進行綜合分析，才能作出比較全面和正確的估價。
隨著人類對環境污染物認識的不斷深入，環境毒理學將在多個方向發展，其中主要是探討多種環境污染物同時對機體產生的相加、協同或拮抗等聯合作用；深入研究環境污染物在環境中的降解和轉化產物以及各種環境污染物在環境因素影響下，相互反應形成的各種轉化產物所引起的生物學變化；一步研究致畸作用的機理，完善致突變作用的試驗方法，找出致癌作用與致突變作用的確切關系；深入研究環境污染物對動物神經功能、行為表現以及免疫機能的早期敏感指標；深入研究環境污染物的化學結構同它們的毒性作用的性質和強度的密切關系，以便根據化學結構，作出毒性的估計，減少動物毒性試驗，並為合成某些低毒化合物提供依據。

『貳』 半數致死量常用的計算方法有哪些

半數致死量常用的計算方法有目測概率法、加權直線回歸法、圖解法和簡化寇氏法。

(1)目測概率法：簡稱目測法或概率單位法。本法是基於前述基本理論而建立起來的。它要求實驗設計盡可能不出現死亡率0%及100%，因而其原始數據比較可靠。計算時首先列出在所試驗劑量(濃度)下動物的死亡情況，分別計算其死亡率。再以濃度對數作橫軸，死亡率的概率單位作縱軸，將各對數值點在方格紙上。

(2)加權直線回歸法(Bliss法)：本法是在上述目測法的基礎上用正態曲線原理進行加權後，計算直線回歸方程以求得LD50。這是計算LD50的最精確的方法。但由於計算過程比較復雜，實際應用中常以此來鑒定和比較其他計算方法的正確性。

(3)圖解法：此法是在概率圖紙上，直接用實驗數據作圖，求出LD50，不需繁瑣的計算過程。所用各種圖表的數學原理比較嚴密，故所得結果也比較精確。本法與加權直線回歸法同屬於求LD50的兩個經典方法。

(4)簡化寇氏法：本法比較簡便，為一般實驗室中的常規方法。實驗設計時除要符合前述總的要求外，葯物反應0%和100%組也可用。但由於0%和100%的變動范圍大，會引進誤差，這是寇氏法的不正確的所在。本法首先計算出各組死亡率，再用公式logLD50=xm-i(Σp-0.5)計算出LD50的對數值，經查反對數值後即得。

為了避免不必要的誤差，要求最大劑量組在100%～80%間，最小組在20%～0%之間，此時改用logLD50=xm-1/2i∑(pi+pi+1)公式。式中xm為最大劑量的對數，i為相鄰劑量的比值的對數，Σp為各組死亡率總和，(pi+pi+1)為相鄰兩組死亡率之和。