Ⅰ 大腸桿菌國標檢測方法
sn/t0169-2010?
Ⅱ 水中糞大腸菌群的測定
化妝品檢測項目中糞大腸菌群的檢測流程:
10g/mL樣品+90mL滅菌生理鹽水 →10mL+10mL雙倍乳糖膽(含中和劑)培養基→糞大腸菌群 44.5℃,48h培養
註:在化妝品檢測項目中,如果樣品含有油脂性的成分,如精油,在樣品前處理中需加入液體石蠟、吐溫80、生理鹽水進行均質,使樣品能夠均勻分散開來。
糞大腸菌群又是一個什麼樣的微生物呢?下面我們來詳細介紹下:
大腸菌群:大腸菌群並非細菌學分類命名,而是衛生細菌領域的用語,它不代表某一個或某一屬細菌,而指的是具有某些特性的一組與糞便污染有關的細菌,這些細菌在生化及血清學方面並非完全一致。
定義(GB2010):在一定培養條件下能發酵乳糖、產酸產氣的需氧和兼性厭氧革蘭氏陰性無芽孢桿菌。
糞大腸菌群:大腸菌群的一種,又稱耐熱大腸菌群,培養溫度:44.5±0.5℃,糞大腸菌群是化妝品檢測項目中必檢的微生物項目。
大腸埃希氏菌:((Escherichia. coli )通常稱為大腸桿菌。根據不同的生物學特性將致病性大腸桿菌分為5類:
致病性大腸桿菌(EPEC)、
腸產毒性大腸桿菌(ETEC)、
腸侵襲性大腸桿菌(EIEC)、
腸出血性大腸桿菌(EHEC)、
腸黏附性大腸桿菌(EAEC)。
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Ⅲ 水中大腸桿菌的測定實驗步驟
出口食品中大腸菌群、糞大腸菌群和大腸桿菌檢驗方法
Method for examination of coliform,fecal coliform and escherichia coli in food for export
SN 0169—92
代替ZB X09 002—86
1 主題內容與適用范圍
本標准規定了出口食品中大腸菌群、糞大腸菌群和大腸桿菌的檢驗方法。
本標准適用於出口食品的檢驗。
2 設備和材料
2.1 吸管:1mL,具0.1mL刻度;5mL和10mL,具1mL刻度。
2 2 水浴箱:44.5±0.5℃。
2.3 培養箱:36±1℃,44.5±0.5℃。
2.4 冰箱:0~5℃和-15~-20℃。
2.5 均質器。
2.6乳缽和研棒。
2.7 平皿:直徑90mm。
2.8天平:感量0.1g。
2.9 顯微鏡。
2.10 稀釋瓶:100mL、200mL和500mL三角燒瓶及廣口瓶。
2.11 玻璃珠:直徑約5mm。
2.12菌落計數器。
3 培養基及試劑
3.1 月桂基硫酸鹽胰蛋白 (LST)肉湯。
3.2 煌綠乳糖膽鹽(BGLB)肉湯。
3.3 EC肉湯。
3.4 伊紅美藍瓊脂(EMB)。
3.5營養瓊脂斜面。
3.6 色氨酸肉湯。
3.7 MR-VP培養基。
3.8 Korser氏枸椽酸鹽肉湯。
3.9 結晶紫中性紅膽鹽瓊脂(VRBA)。
3.10 Butterfield氏磷酸鹽緩沖稀釋液。
3.11 生理鹽水。
3.12 革蘭氏染色液。
3.13 Kovacs氏靛基質試劑。
3.14 甲基紅指示劑。
3.15 Voges—pros kauer(V—P)試劑。
4 樣品制備
4.1 以無菌操作取有代表性的樣品。如有包裝則用75%乙醇在開口處擦拭後取樣。若不能及時檢驗,應將冷凍樣品置於-15℃保存;非冷凍而易腐的食品,應置於4℃冰箱保存。檢驗前冷凍樣品可於2—5℃18h內解凍,或在45℃以下15min內解凍。
4.2 不同食品樣品勻液的制備
4.2.1 液體食品
以滅菌吸管取樣25mL放入裝有225mL稀釋劑的滅菌玻璃瓶(瓶內預置適當數量的玻璃珠),以30cm幅度、於7s內振搖25次(或以機械振盪器振搖),製成1:10的樣品勻液。
4.2.2 固體和半固體食品
以無菌操作取25g樣品,放入裝有225mL稀釋劑的滅菌均質杯內,於8000r/min均質1~2min,製成1:10樣品勻液(也可用滅菌乳缽研磨的方法代替)。
4.3 稀釋樣品勻液根據對樣品污染情況的估計,用稀釋劑將樣品勻液製成一系列十倍遞增的樣品稀釋液,如10-2、10-3、10-4.………。從制備樣品勻液至稀釋完畢,全過程不得超過15min。
5 大腸菌群的測定
5.1 大腸菌群MPN值的測定
5.1.1 對每個樣品,選擇適宜的三個連續稀釋度的樣品稀釋液。每個稀釋度接種三管月桂基硫酸鹽胰蛋白 (LST)肉湯,每管接種1mL。
5.1.2 將接種管置於36±1℃培養48±2h。
5.1.3 觀察試管的產氣情況:檢查倒管內是否有氣泡產生,記錄在24h和48h內產氣的LST肉湯管數。如所有LST肉湯管均未產氣,則可報告為大腸菌群陰性;如有產氣者,則進一步作證實試驗。
5.2 大腸菌群的證實試驗
5.2.1 將所有產氣管用直徑為3mm的接種環移種到煌綠乳糖膽鹽(BGLB)肉湯管中。
5.2.2 置BGLB肉湯管於36±1℃培養48±2h。
5.2.3 記錄所有BGLB肉湯管的產氣管數。
5.2.4 結果報告:按BGLB肉湯產氣管數,查MPN表(見附錄B(補充件))報告每克(毫升)樣品中大腸菌群的MPN值。
6 糞大腸菌群測定
6.1 用直徑為3mm的接種環將所有48±2h內產氣的LST肉湯管培養物移種於EC肉湯管中。
6.2 將所有接種的EC肉湯管在30min內放入帶蓋44.5±0.5℃水浴箱內,培養24±2h。水浴箱的水平面應高於肉湯培養基液面。應以已知為44.5℃產氣陽性的大腸桿菌和44.5℃不產氣的產氣腸桿菌或其他大腸菌群細菌作陽性和陰性對照。
6.3 記錄EC肉湯管的產氣情況。產氣管為糞大腸菌群試驗陽性;不產氣管為糞大腸菌群試驗陰性。
6.4 結果報告:按產氣管數,查MPN表報告每克(毫升)樣品中糞大腸菌群的MPN值。
7 大腸桿菌測定
7.1 將6.3條中的EC肉湯管繼續培養24h,取其產氣管的培養物劃線接種於伊紅美藍(EMB)平板,36±1℃培養24±2h。
7.2 檢查平板上有無具黑色中心有光澤或無光澤的典型菌落。
7.3 如有典型菌落,則從每個平板上至少挑取2個典型菌落;如無典型菌落,則從每個平板上至少挑取2個可疑菌落。用接種針接觸菌落中心部位,移種到營養瓊脂斜面上,36±1℃培養18~24h。
7.4 將斜面培養物移種到下列培養基中進行生化試驗。
7.4.1 色氨酸肉湯:在36±1℃培養24±2h後,加Kovacs氏試劑0.2~0.3mL,上層出現紅色為靛基質陽性反應。
7.4.2 MR—VP培養基;在36±1℃培養48±2h。以無菌操作移取培養物1mL至13mm×l00mm試管中,加5%ɑ—萘酚乙醇溶液0.6mL,40%氫氧化鉀溶液0.2mL和少許肌酸結晶,振搖試管後靜置2h,如出現伊紅色,為VP試驗陽性。
將MR—VP培養物的剩餘部分再培養48h滴加5滴甲基紅溶液。如培養物變紅色,為甲基紅試驗陽性,若變黃色則為陰性反應。
7.4.3 Koser氏枸椽酸鹽肉湯:於36±1℃培養96h記錄有無生長。
7.4.4 LST肉湯:於30±1℃培養48±2h,觀察試管中是否產氣。
7.4.5 革蘭氏染色:取18h營養瓊脂斜面培養物作革蘭氏染色。大腸桿菌為革蘭氏陰性。
7.4.6 大腸桿菌與非大腸桿菌生化鑒別如下:
靛基質 MR VP 枸椽酸鹽 鑒定(型別)
+ + - - 典型大腸桿菌
- + - - 非典型大腸桿菌
+ + - + 典型中間型
- + - + 非典型中間型
- - + + 典型產氣腸桿菌
+ - + + 非典型產氣腸桿菌
如出現上表以外的生化反應類型,表明培養物可能不純,應重新劃線分離,必要時做重復試驗。
7.5 結果報告:大腸桿菌為革蘭氏陰性無芽孢桿菌,發酵乳糖產酸產氣,IMViC試驗為++--或-+--,再根據LST肉湯陽性管數查MPN表,報告每克(毫升)樣品中大腸桿菌MPN值。
8 大腸菌群固體培養基測定法
8.1 樣品制備同第4章。
8.2 計數
8.2.1 選取適宜的三個連續稀釋度的樣品液,每個稀釋度接種兩個滅菌平皿,每皿1mL。另取lmL稀釋劑加入一個滅菌平皿中,作空白對照。
8.2.2 將冷至45±0.5℃的結晶紫中性紅膽鹽瓊脂(VRBA)10~15mL傾注於每個平皿中。小心旋轉平皿,將培養基與樣液充分混勻。
8.2.3 待瓊脂凝固後,再加3~4mLVRBA覆蓋平板表層。
8.2.4 翻轉平板,置於36±l℃培養18~24h。
8.2.5 選用有30~150個菌落的平板,計數平板上出現的典型大腸菌群菌落。典型菌落為紫紅色,菌落周圍有紅色的膽鹽沉澱環。菌落直徑為0.5mm或更大。
8.2.6 證實
8.2.6.1 從VRBA平板上挑取10個不同類型的典型和可疑菌落,移種於BGLB肉湯管內,36±1℃培養24h和48h,觀察產氣情況。
8.2.6.2 將出現產氣的肉湯管判為大腸菌群陽性。對形成菌膜的陽性管,應進行革蘭氏染色,以便排除革蘭氏陽性桿菌。
8.2.7 結果報告
經最後證實為陽性(產氣,革蘭氏陰性桿菌)的試管百分比乘以於8.2.5條中計數的平板菌落數,再乘以稀釋倍數,即為每克(毫升)樣品中大腸菌群數。
例:10-4樣品稀釋液lmL,在VRBA平板上有100個典型和可疑菌落,挑取其中10個接種BGLB肉湯管,證實有6個陽性管,則該樣品的大腸菌群數為:
100×6/10×104/g(mL)=6.0×105/g(mL)
附 錄 A
培養基和試劑
(補充件)
A1 月桂基硫酸鹽胰蛋白 (LST)肉湯
胰蛋白 或胰酪腖(Trypticase)
20g
氯化鈉 5.0g
乳糖 5.0g
磷酸氫二鉀(K2HPO4) 2.75g
磷酸二氫鉀(KH2P04) 2.75g
月桂基硫酸鈉 0.1g
蒸餾水 1000.0mL
將各成分溶解於蒸餾水中。分裝到有倒立發酵管的20mm×150mm試管中,每管10mL。121℃高壓滅菌15min。最終pH6.8±0.2。
A2 煌綠乳糖膽鹽(BGAB)肉湯
蛋白腖 10.0g
乳糖 10.0g
牛膽粉(oxgall或oxbile)溶液 200.0mL
0.1%煌綠水溶液 13.3mL
蒸餾水
將蛋白腖乳糖溶於約500mL蒸餾水中,加入牛膽粉溶液200mL(將20.0g脫水牛膽粉溶於200mL蒸餾水中,pH7.0~7.5),用蒸餾水稀釋到975mL,調pH7.4。再加入0.1%煌綠水溶液13.3mL,用蒸餾水補足到1000mL,用棉花過濾後,分裝到20mm×l50mm試管(管內有倒立的小發酵管)中,每管10mL。121℃高壓滅菌15min。最終pH7.2±0.1。
A3 EC肉湯
胰蛋白 或胰酪
20.0g
3號膽鹽或混合膽鹽 1.5g
乳糖 5.0g
磷酸氫二鉀(KH2P04) 4.0g
磷酸二氫鉀(KH2P04) 1.5g
氯化鈉 5.0g
蒸餾水 1000.0mL
將以上成分溶解於蒸餾水中,分裝16mm×150mm試管(管內有倒立的小發酵管),每管8mL。
121℃高壓滅菌15min,最終pH6.9±0。1。
A4 伊紅美藍瓊脂(EMB)
蛋白腖 10.0g
乳糖 10.0g
磷酸氫二鉀(KH2P04) 2.0g
瓊脂 15.0g
伊紅γ(水溶性) 0.4g或2%水溶液20mL
美藍0.065g或0.5%水溶液 13mL
蒸餾水 1000.0mL
在1 000mL蒸餾水中煮沸溶解蛋白腖、磷酸鹽和瓊脂,加水補足至原量。分裝於三角燒瓶中。每瓶100mL或200mL,高壓滅菌15min。最終pH7.1±0.2。使用前將瓊脂融化,於每100mL瓊脂中加5mL滅菌的20%乳糖水溶液、2mL的2%伊紅γ水溶液和1.3mL0.5%的美藍水溶液,搖勻,冷至45~50℃傾注平皿。
A5 營養瓊脂斜面
牛肉膏 3.0g
蛋白腖 5.0g
瓊脂 15.0g
蒸餾水 1000.0mL
將各成分加於蒸餾水中,煮沸溶解。分裝合適的試管。121℃高壓滅菌15min。最終pH7.3±0.1。滅菌後擺成斜面備用。
A6 色氨酸肉湯
胰腖或胰酪腖 10.0g
蒸餾水 1000.0mL
加熱攪拌溶解胰腖或胰酪腖於蒸餾水中。分裝試管,每管5mL。121℃高壓滅菌15min。最終pH6.9±0.2。
A7 MR-VP培養基
腖
7.0g
葡萄糖 5.0g
磷酸氫二鉀(K2HPO4) 5.0g
蒸餾水 1000.0mL
將各成分溶於蒸餾水中,分裝試管,121℃高壓滅菌15min,最終pH6.9±0.2。
A8 Koser氏枸椽酸鹽肉湯
磷酸氫銨鈉(NaNH4HPO4�6�14H2O) 1.5g
磷酸氫二鉀(K2HPO4) 1.0g
硫酸鎂(MgSO4�6�17H2O) 0.2g
枸椽酸鈉(含2H2O) 3.0g
蒸餾水 1000.0mL
將各成分溶解於蒸餾水中,分裝試管,每管10mL,121℃高壓滅菌15min。最終pH6.7±0.2。
A9 結晶紫中性紅膽鹽瓊脂(VRBA)
蛋白腖 7.0g
酵母膏 3.0g
乳糖 10.0g
氯化鈉 5.0g
膽鹽或3號膽鹽 1.5g
中性 0.03g
結晶紫 0.002g
瓊脂 15~18g
蒸餾水 1000.0mL
將上述成分溶於蒸餾水中,靜置幾分鍾,充分攪拌,調至pH7.4±0.1。煮沸2min,將培養基冷 45~50℃傾注平板。臨用時制備,不得超過3h。
A1O Butterfield氏磷酸鹽緩沖稀釋液
貯存液
磷酸二氫鉀(K2HPO4) 34.0g
蒸餾水 500mL
將磷酸二氫鉀溶於蒸餾水中,用lmol/L氫氧化鈉約175mL調至pH7.2。用蒸餾水加至1000mL貯存於冰箱。稀釋液取貯存液1.25mL,用蒸餾水稀釋至1000mL,分裝於合適容器後,121℃高壓滅菌15min。
A11 生理鹽水
氯化鈉 8.5g
蒸餾水 1000.0mL
將氯化鈉溶於蒸餾水中,121℃高壓滅菌15min。
A12 革蘭氏染色液
結晶紫染色液:
結晶紫 1.0g
95%乙醇 20.0mL
1%草酸銨水溶液 80.OmL
將結晶紫完全溶解於乙醇中,然後與草酸銨溶液混合。
革蘭氏碘液:
碘 1.0g
碘化鉀 2.0g
蒸餾水 300.0mL
將碘與碘化鉀先行混合,加入蒸餾水少許充分振搖,待完全溶解後,再加蒸餾水至300mL。
沙黃復染液:
沙黃 0.25g
95%乙醇 10.0mL
蒸餾水 90.0mL
將沙黃溶解於乙醇中,然後用蒸餾水稀釋。
染色法
a. 將塗片在火焰上固定,滴加結晶紫染液,染1min,水洗。
b. 滴加革蘭氏碘液,作用lmin,水洗。
c. 滴加95%乙醇脫色約15~30s,直至染色液被洗掉,不要過分脫色,水洗。
d 滴加復染液,復染lmin,水洗、待干、鏡檢。
結果:革蘭氏陽性菌呈紫色,革蘭氏陰性菌呈紅色。
A13 Kovacs氏靛基質試劑
對二甲氨基苯甲醛 5.0g
戊醇 75.0mL
鹽酸(濃) 25.0mL
將對二甲氨基苯甲醛溶於戊醇中,然後慢慢加入濃鹽酸即可。
A14 甲基紅指示劑
甲基紅 0.1g
95%乙醇 300mL
將甲基紅溶解於300mL乙醇中,加水稀釋至500mL。
A15 Voges—Proskauer(V—P)試劑
甲液
a-萘酚 5.0g
無水乙醇 100.0mL
乙液
氫氧化鉀 40.0g
用蒸餾水加 100.OmL
附 錄 B
1g檢樣中最近似值(MPN)表
(補充件)
使用三管法,接種量分別為0.1,0.01和0.00lg。
陽性管數 MPN 陽性管數 MPN
0.1 0.01 0.001 0.1 0.01 0.001
0 0 0 <3 2 0 0 9.1
0 0 1 3 2 0 1 14
0 0 2 6 2 0 2 20
0 0 3 9 2 0 3 26
0 1 0 3 2 1 0 15
0 1 1 6.1 2 1 1 20
0 1 2 9.2 2 1 2 27
0 1 3 12 2 1 3 34
0 2 0 6.2 2 2 0 21
0 2 1 9.3 2 2 1 28
0 2 2 12 2 2 2 35
0 2 3 16 2 2 3 42
0 3 0 9.4 2 3 0 29
0 3 1 13 2 3 1 36
0 3 2 16 2 3 2 44
0 3 3 19 2 3 3 53
1 0 0 3.6 3 0 0 23
1 0 1 7.2 3 0 1 39
1 0 2 11 3 0 2 64
1 0 3 15 3 0 3 95
1 1 0 7.3 3 1 0 43
1 1 1 11 3 1 1 75
1 1 2 15 3 1 2 120
1 1 3 19 3 1 3 160
1 2 0 11 3 2 0 93
1 2 1 15 3 2 1 150
1 2 2 20 3 2 2 210
1 2 3 24 3 2 3 290
1 3 0 16 3 3 0 240
1 3 1 20 3 3 1 460
1 3 2 24 3 3 2 1100
1 3 3 29 3 3 3 >1100
註:①本表採用3個稀釋度[0.1g(mL)、0.0lg(mL)和0.001g(mL)],每個稀釋度接種3管。
②表內所列檢樣量如改用1g(mL)、0.18(mL)和0.01g(mL)時,表內數字應相應降低10倍:如改用0.01g(mL)、0.001g(mL)和0.0001g(mL)時,則表內數字應相應增加10倍,其餘類推。
Ⅳ 關於水中糞大腸菌群數的測定
看來我們使用的方法是一樣的,區別是你沒有操作過,對吧
按你提問的順序分列
一、 試管的規格大約為長度--cm,直徑2--2.5cm,小玻璃管的長度大約2-3cm直徑約0.3-0.5cm。操作的時候是把小的玻璃管(一端封閉)開口的一端朝大試管底部放入,至於需要多少支。要看你一次做幾個樣品,幾個倍數,我們一般准備30--50套。
二、不管是什麼培養基,我們都是自己配製,試劑商店裡可以買到的(按方法中所列試劑品種購買。
三、肯定要加塞子的,我們用的塞子是軟材料(好像是軟橡膠?白色的,塞子中間另有一個可以活動的塞子,能保證加塞後的試管透氣,其實用什麼材料不重要的。
四、需要的儀器設備為:生化培養箱、無菌操作台(空氣精華級別100)、高壓滅菌鍋、冰箱、乾燥箱。
Ⅳ 水中大腸桿菌的檢測方法
大腸菌群測定的操作細則
大腸菌群系指一群能發酵乳糖、產酸產氣、需氧和兼性厭氧的革蘭氏陰性無芽胞桿菌。該菌主要來於人畜糞便,故以此作為糞便污染指標來評價食品的衛生質量,推斷食品中有否污染腸道致病菌的可能。
食品中大腸菌群數系以100ml(g)檢樣內大腸菌群最可能數(mpn)表示。
1
設備和材料
1.1
溫箱:36±1℃。
1.2
冰箱:0~4℃。
1.3
恆溫水浴
:44.5±0.5℃。
1.4
天平。
1.5
顯微鏡。
1.6
均質器或乳缽。
1.7
平皿:直徑為90mm。
1.8
試管。
1.9
吸管。
1.10
廣口瓶或三角燒瓶:容量為500ml。
1.11
玻璃珠:直徑約5mm。
1.12
載玻片。
1.13
酒精燈。
1.14
試管架。
2
培養基和試劑
2.1
乳糖膽鹽發酵管:按gb
4789.28中4.9規定。
2.2
伊紅美藍瓊脂平板:按gb
4789.28中4.25規定。
2.3
乳糖發酵管:按gb
4789.28中4.10規定。
2.4
ec
肉湯:按gb
4789.28中4.11規定。
2.5
磷酸鹽緩沖稀釋液:按gb
4789.28中3.22規定。
2.6
生理鹽水。
2.7
革蘭氏染色液:按gb
4789.28中2.2規定。
3
操作步驟
3.1
檢樣稀釋
3.1.1
以無菌操作將檢樣25ml(或g)放於有225ml滅菌生理鹽水或其他稀釋液的滅菌玻璃瓶內(瓶內予置適當數量的玻璃珠)或滅菌乳缽內,經充分振搖或研磨做成1:10的均勻稀釋液。固體檢樣最好用均質器,以8
000-10
000
r/min的速度處理1min,做成1:10的均勻稀釋液。
3.1.2
用1ml滅菌吸管吸取1:10稀釋液1ml,注入含有9ml滅菌生理鹽水或其他稀釋液的試管內,振搖試管混勻,做成1:100的稀釋液。
3.1.3
另取1ml滅菌吸管,按上條操作依次做10倍遞增稀釋液,每遞增稀釋一次,換用1支1ml滅菌吸管。
3.1.4
根據食品衛生標准要求或對檢樣污染情況的估計,選擇三個稀釋度,每個稀釋度,接種3管。
3.2
乳糖發酵試驗
將待檢樣品接種於乳糖
膽鹽發酵管內,接種量在1ml以上者,用雙料乳糖膽鹽發酵管,1ml及1ml以下者,用單料乳糖膽鹽發酵管。每一稀釋度接種3管,置36±1℃
溫箱內,培養24±2h,如所有乳糖膽鹽發酵管都不產氣,則可報告為大腸菌群陰性,如有產氣者,則按下列程序進行。
3.3
分離培養
將產氣的發酵管分別轉種在伊紅美藍瓊脂平板上,置36±1℃
溫箱內,培養18-24h,然後取出,觀察菌落形態,並做革蘭氏染色和證實試驗。
3.4
證實試驗
在上述平板上,挑取可疑大腸菌群菌落1-2個進行革蘭氏染色,同時接種乳糖發酵管,置
36±1℃溫箱內培養24±2h,觀察產氣情況。凡乳糖管產氣、革蘭氏染色為陰性的無芽胞桿菌,即可報告為大腸菌群陽性。
3.5
報告
根據證實為大腸菌群陽性的管數,查mpn檢索表,報告每100ml(g)大腸菌群的mpn值。
4
糞大腸菌群(faecal
coliform)
4.1
用接種環將所有產氣的乳糖膽鹽發酵管培養物(見3.2條)轉種於ec肉湯管內,置44.5±0.2℃水浴箱內(水浴箱內的水面應高於ec肉湯液面),培養24±2h,經培養後,如所有ec肉湯管均不產氣,則可報告為陰性;如有產氣者,則將所有產氣的ec肉湯管分別轉種於伊紅美藍瓊脂平板上,置
培養18-24h,凡平板上有典型菌落者,則證實為糞大腸菌群陽性。
4.2
結果報告
根據證實為糞大腸菌群的陽性管數,查mpn檢索表,報告每100ml(g)糞大腸菌群的mpn值。
Ⅵ 怎樣檢測自來水中大腸桿菌數和細菌總菌數
平板計數法:採用常規塗布平板法,37℃24h後計數。培養基為營養瓊指和伊紅美蘭瓊脂。
多管發酵法:採用五管法,培養劑為液體EC培養基。
細菌總數:採用AODC法, 具體操作按徐懷恕方法進行。
活菌直接計數:採用Kogure等方法:向水樣加入0.002%萘啶酮酸(Sigma 公司)和0.025%酵母膏,在37℃下培養6-24h,加入甲醛(最終濃度為2%)固定,再按AODC法鏡檢計數。
再可以看看下面這篇文章
水中細菌總數與大腸桿菌檢測方法的比較研究