檢測蛋白質脂肪的方法

㈠ 如何檢測生物組織中的糖類，脂肪，和蛋白質

一．實驗目的：嘗試用化學試劑檢測生物組織中糖類、脂肪和蛋白質
二．實驗原理：某些化學試劑能使生物組織中的有關有機化合物,產生特定的顏色反應.
1．可溶性還原糖（如葡萄糖、果糖、麥芽糖）與斐林試劑發生作用,可生成磚紅色的Cu 2O沉澱.即Cu ( OH ) 2被還原成Cu 2O,葡萄糖被氧化成葡萄糖酸.
2．脂肪可以被蘇丹Ⅲ染液染成橘黃色（或被蘇丹Ⅳ染液染成紅色）.
3．蛋白質與雙縮脲試劑發生作用,產生紫色反應.（蛋白質分子中含有很多肽鍵,在鹼性NaOH溶液中能與雙縮脲試劑中的Cu2+作用,產生紫色反應.）
4.澱粉遇碘變藍色.
三．實驗材料
1．做可溶性還原性糖鑒定實驗,應選含糖高,顏色為白色的植物組織,如蘋果、梨.（因為組織的顏色較淺,易於觀察.）
2．做脂肪的鑒定實驗.應選富含脂肪的種子,以花生種子為最好,實驗前一般要浸泡3-4小時（也可用蓖麻種子）.
3．做蛋白質的鑒定實驗,可用富含蛋白質的黃豆或雞蛋清.
四、實驗試劑
斐林試劑（包括甲液：質量濃度為0.1g/ mL NaOH溶液和乙液：質量濃度為0.05g/ mL CuSO4溶液）、蘇丹Ⅲ或蘇丹Ⅳ染液、雙縮脲試劑（包括A液：質量濃度為0.1g/ mL NaOH溶液和B液：質量濃度為0.01g/ mL CuSO4溶液）、體積分數為50%的酒精溶液,碘液、蒸餾水.
五、方法步驟：
（一） 可溶性糖的鑒定
1.制備組織樣液.
蘋果或梨組織液必須臨時制備，因蘋果多酚氧化酶含量高,組織液很易被氧化成褐色,將產生的顏色掩蓋.
2.注入2mL組織樣液.
3.注入1mL新制的斐林試劑,振盪.
（現配現用、先混後加）
應將組成斐林試劑的甲液、乙液分別配製、儲存,使用前才將甲、
乙液等量混勻成斐林試劑；切勿將甲液、乙液分別加入蘋果組織樣液中進行檢測.
斐林試劑很不穩定,甲、乙液混合保存時,生成的Cu ( OH ) 2在70-900C下分解成黑色CuO和水；甲、乙液分別加入時可能會與組織樣液發生反應,無
Cu ( OH ) 2生成.
4.水浴加熱：試管放在盛有50-650C溫水的大燒杯中,加熱約2分鍾,觀察到溶液顏色：淺藍色 → 棕色 → 磚紅色（沉澱）
最好用試管夾夾住試管上部,使試管底部不觸及燒杯底部,試管口不朝向實驗者.
也可用酒精燈對試管直接加熱.
防止試管內的溶液沖出試管,造成燙傷；
縮短實驗時間.
（二）脂肪的鑒定
取材、切片、製片：花生種子浸泡、去皮、切下一些子葉薄片,將薄片放在載玻片的水滴中,用吸水紙吸去裝片中的水.

干種子要浸泡3-4小時,新花生的浸泡時間可縮短.
浸泡時間短,不易切片,浸泡時間過長,組織較軟,切下的薄片不易成形.切片要盡可能薄些,便於觀察.
染色：在子葉薄片上滴2-3滴蘇丹Ⅲ（染色3分鍾）或蘇丹Ⅳ染液（染色1分鍾）.
染色時間不宜過長.
漂洗：用吸水紙吸去薄片周圍染液,用50%酒精洗去浮色,吸去酒精.
酒精用於洗去浮色,不洗去浮色,會影響對橘黃色脂肪滴的觀察.同時,酒精是脂溶性溶劑,可將花生細胞中的脂肪顆粒溶解成油滴.
用吸水紙吸去薄片周圍酒精,滴上1-2滴蒸餾水,蓋上蓋玻片.
滴上清水可防止蓋蓋玻片時產生氣泡.
鏡檢：先低後高（高倍鏡用法：移物換器時針反）,低倍鏡下找到花生子葉薄片的最薄處,可看到細胞中有染成橘黃色或紅色圓形小顆粒.
裝片不宜久放.
時間一長,油滴會溶解在乙醇中.
三、蛋白質的鑒定
制備組織樣液.（浸泡、去皮研磨、過濾.）黃豆浸泡1至2天,容易研磨成漿,也可購新鮮豆漿以節約實驗時間.加樣液約2ml於試管中,加入雙縮脲試劑A,搖勻；再加入雙縮脲試劑B液3-4滴,搖勻,溶液變紫色.
A液和B液也要分開配製,儲存.鑒定時先加A液後加B液.
CuSO4溶液不能多加.
先加NaOH溶液,為Cu2+與蛋白質反應提
供一個鹼性的環境.A、B液混裝或同時加入,會導致Cu2+變成Cu ( OH ) 2沉澱,而失效.
否則CuSO4藍色會遮蓋反應的真實顏色.可用蛋清代替豆漿.蛋清要先稀釋.
如果稀釋不夠,在實驗中蛋清粘在試管壁,與雙縮脲試劑反應後會粘固在試管內壁上,使反應不容易徹底,並且試管也不易洗干凈.
附：澱粉的檢測和觀察用試管取2ml待測組織樣液,向試管內滴加2滴碘液,觀察顏色變化.碘液不要滴太多，以免影響顏色觀察

㈡ 高一生物學習「檢測生物組織中的糖類、脂肪和蛋白質」總結三個實驗所用的試劑及用量和實驗現象、原理

Ⅰ、斐林試劑(檢驗還原糖)

①配製方法：

步驟：1、將36.4gCuSO4.5H2O溶於200mL水中；

2、用0.5mL濃硫酸酸化，再用水稀釋到500mL待用；

3、取173g酒石酸鉀鈉KNaC4H4O6.4H2O，71gNaOH固體溶於400mL水中；

4、再稀釋到500mL，使用時取等體積兩溶液混合。

②試劑應用：

檢驗還原糖

步驟：1、向試管內注入2mL待測組織樣液。

2、向試管內注入1mL斐林試劑（甲乙液混合均勻後再注入）。

3、將試管放入盛有50~60℃溫水的大燒杯中加熱約2min。

4、觀察試管中出現的顏色變化。（若能夠生成磚紅色的沉澱，便可以判

斷還原糖的存在，溶液的顏色變化過程為：淺藍色→棕色→磚紅色沉澱）

Ⅱ、班氏試劑(檢驗還原糖)

①配製方法：

步驟：1、400mL水中加85g檸檬酸鈉和50g無水碳酸鈉；

2、50mL加熱的水中加入8.5g無水硫酸銅製成CuSO4溶液；

3、把CuSO4溶液倒入檸檬酸鈉溶液-Na2CO3中，邊加邊攪，如產生沉澱可濾去。

②試劑應用：

檢驗還原糖

原理：檸檬酸鈉和碳酸鈉均為強鹼弱酸鹽，在水中它們均可水解產生OH-，與檸檬酸鈉-Na2CO3溶液和CuSO4溶液混合時，Cu2+和OH-結合，生成Cu(OH)2與葡萄糖中的醛基反應生成磚紅色沉澱。

Ⅲ、雙縮脲試劑(檢驗蛋白質)

①配製方法：雙縮脲試劑A的成分是氫氧化鈉的質量分數為0.1g/mL的水溶液；雙縮脲試劑B的成分是硫酸銅的質量分數為0.01g/mL的水溶液組合而成。

②試劑應用：

檢驗蛋白質

步驟：1、將雙縮脲試劑A加入組織樣液，振盪均勻（必須營造鹼性環境）。

2、加入雙縮脲試劑B，搖盪均勻。如果組織里含有蛋白質，那麼會看到溶液變成紫色。

原理：具有兩個或兩個以上肽鍵的化合物皆可與雙縮脲試劑產生紫色反應。蛋白質的肽鍵在鹼性溶液中能與Cu2+絡合成紫紅色的化合物。顏色深淺與蛋白質濃度成正比。

Ⅳ、蘇丹溶液(檢驗脂肪)

①配製方法：

步驟：1、蘇丹III或蘇丹IV粉0.1g;

2、取95%酒精10ml;

3、過濾後再加入10ml甘油

②試劑應用：

檢測脂肪

原理：蘇丹Ⅲ可將脂肪染成橘黃色，蘇丹Ⅳ將脂肪染成紅色。

這是我畢業之前有收藏的DOC文檔。要的話提供郵箱我發過去給你，圖文並茂。

㈢ 求高一生物 檢測生物組織中的糖類、脂肪和蛋白質 的實驗報告

實驗目的：檢測生物組織中的糖類，脂肪，蛋白質的存在。
實驗原理：糖類，脂肪，蛋白質遇特定溶液變色。
實驗步驟：准備足夠分量的生物組織樣液。
實驗1（糖類)
（1）向試管內注入2ML待測組織樣液。
（2）向試管內注入1ML斐林試劑（甲乙液等量混合均勻後再注入）
（3）將試管放在盛有50-65度溫水的大燒杯中加熱約2MIN。待一段時間後觀察其現象
實驗2（脂肪）
（1）向試管內注入2ML待測組織樣液。
（2）向試管內滴加3滴蘇丹Ⅳ溶液。
（3）待一段時間後觀察其現象。
實驗3（蛋白質）
（1）向試管內注入2ML待測組織樣液。
（2）向試管內注入雙縮脲試劑A液1ml。搖勻。
（3）向試管內注入雙縮脲試劑B液4滴。搖勻。
（4）待一段時間後觀察其現象。
實驗現象：
實驗1.試管中溶液形成磚紅色沉澱
實驗2.試管中溶液被染成紅色。
實驗3.試管中榮產生紫色反應。
結論:
實驗1 待測溶液中含有糖類。
實驗2 待測溶液中含有脂肪。
實驗3 待測溶液中含有蛋白質。

以上就是整個實驗的報告，自己寫的，希望給個辛苦分啊.......