㈠ 乙肝表面抗原的測定方法
中國最常使用的測定表面抗原的方法是酶聯免疫吸附試驗(ELISA),其次是放射免疫試驗(RIA)。
ELISA簡單、方便、快速,進口試劑盒可測到的血清表面抗原最低濃度為0.2ng/ml,國產試劑盒目前能達到0.5ng/ml。
㈡ 檢測乙肝表面抗原的方法都有什麼具體一點點
國內最常使用的測定表面抗原的方法是酶聯免疫吸附試驗(ELISA),其次是放射免疫試驗(RIA)。 ELISA簡單、方便、快速,進口試劑盒可測到的血清表面抗原最低濃度為0.2ng/ml,國產試劑盒目前能達到0.5ng/ml。 乙肝表面抗原檢查用於判斷是否感染了乙肝病毒。 1.乙肝表面抗原陽性是感染乙肝病毒的指標,乙肝表面抗原本身具有抗原性,無傳染性。 2.其他肝功能正常而僅僅乙肝表面抗原陽性者,稱為乙肝病毒攜帶者。 3.乙肝表面抗原的滴度高低可判斷患者的傳染性,HBsAg的滴度越高,HBsAg及乙肝病毒DNA陽性的可能性越大,傳染性也就越大。 4.大三陽:是指在乙肝兩對半檢測中,乙肝表面抗原(HBsAg)、E抗原(HBeAg)和核心抗體(HBcAb)檢測均是陽性,提示乙肝病毒感染病毒復制活躍,有傳染性,並不能提示病情是否嚴重。 5.小三陽:是指在乙肝兩對半檢測中,乙肝表面抗原(HBsAg)、E抗體(HBeAb)和核心抗體(HBcAb)檢測均是陽性提示: (1)大多數情況下表示乙肝病毒復制減少,仍然有傳染性。 (2)由大三陽轉向小三陽並不意味著乙肝病毒復制完全停止。少數小三陽病人其血清HBV-DNA持續陽性,病毒復制活躍,病情較嚴重,病情進展迅速。
㈢ 為什麼雙抗體夾心法是檢測抗原最常用的方法
雙抗體夾心法適用於測定二價或二價以上的大分子抗原,但不適用於測定半抗原及小分子單價抗原,因其不能形成兩位點夾心。那麼,為什麼雙抗體夾心法是檢測抗原最常用的方法?
1、將特異性抗體與固相載體聯結,形成固相抗體。洗滌除去未結合的抗體及雜質。
2、加受檢標本,保溫反應。標本中的抗原與固相抗體結合,形成固相抗原抗體復合物。 洗滌除去其他未結合物質。
3、加酶標抗體,保溫反應。固相免疫復合物上的抗原與酶標抗體結合。徹底洗滌未結合 的酶標抗體。此時固相載體上帶有的酶量與標本中受檢抗原的量相關。
4、 加底物顯色。固相上的酶催化底物成為有色產物。
㈣ 免疫學的檢測方法
免疫學檢測方法可分為體液免疫和細胞免疫。
㈤ 乙肝抗原抗體檢測實驗的主要步驟
① 取出包被好的板,加入待測血清,再加入酶標記抗體,置濕合37℃30-45min
② 取出以洗滌劑洗滌3次,每次3-5min
③ 加入顯色液,置於37℃保溫箱15-30min
㈥ 免疫檢測最為靈敏的方法是
以下是幾種常用的免疫學技術:1.免疫熒光技術 免疫熒光技術是利用熒光素標記的抗體(或抗原)檢測組織、 細胞或血清 中的相應抗原(或抗體)的方法.由於熒光抗體具有安全、 靈敏的特點,因此已 廣泛應用在免疫熒光檢測和流式細胞計數領域.根據熒光素標記的方式不同,可 分為直標熒光抗體和間標熒光抗體.間標熒光抗體中一抗並不直接連接熒光素,而是先將一抗結合到蛋白,然後帶有熒光素的二抗再結合至一抗.通過二抗的結 合,能將信號進行放大,因此能在一定程度上提高檢測的靈敏度,但是隨之帶來 的高背景也降低了檢測的特異性.近年來,隨著熒光素和熒光檢測技術的不斷進 步,熒光檢測的靈敏度已經接近同位素檢測的水平,直接標記的熒光抗體逐漸取 代間接標記抗體.這些標記了熒光素的抗體直接結合至抗原,大大提高了檢測的 特異性,使檢測的結果更加准確可靠.熒光檢測技術的發展,使得免疫熒光技術 在傳染病診斷上有廣泛的用途,如在細菌、病毒、 螺旋體感染的疾病,檢查IgM 抗體,做為近期接觸抗原的標志.利用單克隆熒光直接標記抗體鑒定淋巴細胞的 亞類.通過流式細胞儀,針對細胞表面不同抗原,可以同時使用多種不同的熒光 抗體,對同一細胞進行多標記染色.2.放射免疫檢測 放射免疫檢測技術是目前靈敏度最高的檢測技術,利用放射性同素標記抗 原(或抗體),與相應抗體(或抗原)結合後,通過測定抗原抗體結合物的放射 性檢測結果.放射性同位素具有pg 級的靈敏度,且利用反復曝光的方法可對痕 量物質進行定量檢測.但放射性同位素對人體的損傷也限制了該方法的使用.3.酶聯免疫吸附試驗(ELISA) 酶聯免疫檢測是目前應用最廣泛的免疫檢測方法.該方法是將二抗標記上 酶,抗原抗體反應的特異性與酶催化底物的作用結合起來,根據酶作用底物後的 顯色顏色變化來判斷試驗結果,其敏感度可達ng 水平.常見用於標記的酶有辣 根過氧化物酶(HRP)、鹼性磷酸酶(AP)等.由於酶聯免疫法無需特殊的儀器,檢測簡單,因此被廣泛應用於疾病檢測.常用的方法有間接法、 夾心法以及BAS -ELISA.間接法是先將待測的蛋白抱被在孔板內,然後依次加入一抗、標記了 酶的二抗和底物顯色,通過儀器(例如酶標儀)定量檢測抗原.這種方法操作簡 單但由於高背景而特異性較差.目前已逐漸被夾心法取代.夾心法利用二種一抗 對目標抗原進行捕獲和固定,在確保靈敏度的同時大大提高了反應的特異性.近 年來,抗原的定量檢測技術也不斷推陳出新.近年來,在夾心法ELISA 的基礎上,開發了多抗原檢測試劑盒,能同時檢測微量液相樣本中多個抗原含量.這項技術 的應用大大縮短了診斷的時間,提高診斷的可靠性和及時性.4.免疫金膠體技術 膠體金技術經過30 多年的發展到現在已日趨成熟,該方法是將二抗標記上 膠體金顆粒,利用抗原抗體間的特異性反應,最終將膠體金標記的二抗吸附於滲 濾膜上,此方法簡單,快速,廣泛應用於臨床篩查.
㈦ 酶聯免疫檢測的幾種方法及其原理
(1)酶聯免疫吸附試驗(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA):是將抗原或抗體吸附在固相載體表面。使抗原抗體反應在固相載體表面進行。可用間接法、雙抗體夾心法或競爭法測定抗原或抗體。
(2)夾心法(sandwich assay):將已知的特異抗體包裝在固相載體(塑料板凹孔或紙片上),加入待檢標本,標本中的抗原即可與載體上的抗原結合,洗去未結合的材料後加入該抗原的酶標記抗體,洗去未結合的酶標抗體,加底物顯色,用酶免疫檢測儀測量顏色的光密度,可定量測定抗原。
間接法(indirecr ELISA)常用於檢查特異抗體。先將已知特異抗原包被固相載體,加入待檢標本(可能含有相應抗體),再加入酶標抗Ig的抗全(即第二抗體),經加底物顯色後,根據顏色的光密度計算出標本中抗體的含量。
(3)BAS-ELISA:近年來對酶免設分析法的改進是使用生物素-親合素-過氧化物酶復合物作為指示劑,組成一新的生物放大系統進一步提高檢測的敏感度。可用來檢測多種抗原抗體系統如細菌、病毒、腫瘤細胞表面抗原等。一個親合素(avidin)分子可以結合4個生物素分子(biotin)。結合非常穩定。親合素和生物素都可與抗全、酶、熒光素等分子結合,而不影響後者的生物活性。一個抗體分子可偶聯90個生物素分子,通過生物素又可連接多個親合素。因此大提高檢測的敏感度。目前應用生物-酶標親合素系統(biotinavidin system- ELISA,BAS-ELISA),它是通過生物素標記抗體連接免疫反應系統,同時藉助生物素化酶或酶標親合素引入酶與底物反應系統。
㈧ ELISA技術中,最常用來檢測抗原的方法是
正確答案:A
解析:ELISA技術中,最常用來檢測抗原的方法是雙抗體夾心法
。
㈨ 抗原或抗體的體外檢測方法有哪些
抗原抗體檢測有凝集反映、沉澱反應、放免技術、熒光技術、酶聯免疫,化學發光、生物親和,固相免疫、免疫組化等技術