常用的pcr檢測方法種類

A. pcr產物有無鑒定常用的方法是

PCR產物的鑒定常用的方法主要有幾種。
1、單鹼基改變分析，通過分析PCR產物的序列變化，嘩鄭來鑒定特定的基因突變。
2、凝膠電泳，將PCR產物進行凝膠電泳，以檢測其大小。
3、南方雜交，PCR產物可以通過南方雜交技術來鑒定。
4、聚合酶鏈反應，通過比較多個PCR產物的敗旅聚合酶鏈反應PCR，來鑒定察蘆凳特定的基因。
5、序列分析，通過高通量測序技術來分析PCR產物的序列，以鑒定特定的基因。

B. PCR產物的檢測方法有哪些都有什麼原理

1.瓊脂糖凝膠電泳 同時點分子量marker，根據marker條帶判斷產物分子量大小，從而大致判斷是不是你要的
2.酶切 已知你產物的序列，看上面有什麼酶切位點，用一個酶或者兩個酶切斷，看與理論預測的條帶數目和大小是否一致。一般檢測有以上兩步就行了，如果需要知道確切的需要進行3
3.測序 連接到pMD-18t 載體上，轉到大腸桿菌中。拿到公司去測序，測序結果通過gene bank比對看與哪個基因一致，這種方法最准確
4.表達 pcr產物連到真核或者原核表達載體上，適宜條件表達出來以後的蛋白做質譜分析，看與理論產物表達的蛋白是否有一致的片段

C. PCR產物的檢測方法有哪些都有什麼原理

1.瓊脂糖凝膠電泳
同時點分子量marker，根據marker條帶判斷產物分子量大小，從而大致判斷是不是你要的
2.酶切
已知你產物的序列，看上面有什麼酶切位點，用一個酶或者兩個酶切斷，看與理論預測的條帶數目和大小是否一致。一般檢測有以上兩步就行了，如果需要知道確切的需要進行3
3.測序
連接到pMD-18t
載體上，轉到大腸桿菌中。拿到公司去測序，測序結果通過gene
bank比對看與哪個基因一致，這種方法最准確
4.表達
pcr產物連到真核或者原核表達載體上，適宜條件表達出來以後的蛋白做質譜分析，看與理論產物表達的蛋白是否有一致的片段

D. 定量PCR的檢測模式

PCR過程的監測有多種檢測模式。最常用的有三種檢測模式：
⑴R Green I 檢測模式。溫度循環為94—55—72°C三步法，只有引物，無探針，熒光染料鑲嵌在雙股螺旋鏈中間。通過對特定方向的強熒光檢測獲得信號，這種試劑檢測模式易產生非特異信號，且本底光較大。
⑵解探針模式（Taqman）Hydrolysis Probe。溫度循環為94—60°C二步法，不僅有引物，還有另外一個特異針對擴增模板的探針在引物對之間。在探針相鄰兩個鹼基上分別結合兩個熒光染料，一個染料接受激發光得到的能量傳給了第二個染料，接受能量的第二個染料通過發射特徵光子回到穩定態。當Taq酶在60°C延伸擴增鏈時，遇到探針，利用Taq酶5`—3`外切酶活性將探針水解成單個鹼基，單個鹼基之間距離較遠，第一個染料的能量無法傳給第二個染料，只好通過發射特徵光子回到穩定態，通過對溶液中第一個染料的熒光檢測獲得信號。這種試劑檢測模式增加了檢測信號的特異性，但是由於利用了Taq酶5`—3`外切酶活性，一般試劑廠家只給Taq酶的聚合酶活性定標，沒有同時給Taq酶5`—3`外切酶活性定標，不同批號試劑之間會給定量帶來差異。另外對探針的熔點溫度（Tm）僅要求其高於60°C，這就使不同試劑盒之間的特異性參差不齊，而且無法做質控檢測。
⑶雜交探針（Hybridization Probes）模式。溫度循環為94—55—72°C三步法，有引物，二個特異針對擴增模板相鄰的探針在引物對之間，在一個探針3`鹼基上結合一個熒光染料，在另一個探針5`鹼基上結合第二個熒光染料。在55°C時，兩個探針都剛好接合在模板上，第一個染料接受激發光得到的能量傳給了第二個染料，接受能量的第二個染料通過發射特徵光子回到穩定態，通過對結合在擴增模板上雙探針中第二個染料的熒光檢測獲得信號。這種試劑檢測模式中熒光信號與特定雜交溫度相關，探針的濃度始終保持不變，因此可以在擴增後檢測熔解曲線作為信號的特異性質控。另外這種試劑檢測模式可以用於點突變檢測。