① 核酸檢測能選擇用哪種方式么
目前主要使用的方法有以下六種方法:
一、核酸序列依賴性擴增法
NASBA是由一對引物介導的、連續均一的、體外特異性核苷酸序列等溫擴增RNA的新技術。反應在 42 ℃進行 ,可在 2 h內將RNA模板擴增約 109倍。NASBA原理是提取病毒RNA,加入AMV逆轉錄酶、RNA酶H、T7RNA聚合酶和引物進行擴增。整個反應分非循環相和循環相:在非循環相中,引物I與模板RNA退火後在AMV逆轉錄酶的作用下合成cDNA,形成RNA:DNA雜合體,隨即RNaseH降解RNA,引物Ⅱ與cDNA 退火, 在反轉錄酶作用下合成第2條DNA互補鏈。雙鏈DNA可在T7RNA聚合酶的作用下,經其啟動子序列起動而轉錄RNA,RNA又可在反轉錄酶的作用下反轉錄成DNA,進入循環相,對模板進行大量擴增。
二、轉錄介導的擴增技術
TMA技術原理與NASBA基本一致,略有不同之處是TMA利用的是MMLV逆轉錄酶及T7 RNA聚合酶兩種酶,MMLV逆轉錄酶既有逆轉錄酶的活性又具有RNA酶H活性。反應在 41.5 ℃進行 ,可在 1 h內將RNA模板擴增約109倍。
三、連接酶酶促鏈式反應(LCR)
LCR是基於靶分子依賴的寡核苷酸探針相互連接的一種探針擴增技術,是繼PCR後新發展的一種較有前景的體外擴增技術。它的原理就是由2段寡核苷酸單鏈DNA探針與目標序列雜交,當該2段DNA探針與沒有發生突變的模板褪火後,如果2探針是緊鄰的,中間沒有核苷酸間隔,則可在連接酶作用下連接起 來,連接以後的新鏈又可以作為模板,引導下一周期的連接產生新的子鏈。若連接區段發生核苷酸的鹼基突變,則連接反應不能發生,擴增反應終止。
四、多聚酶鏈反應檢測法(PCR)
PCR技 術的基本原理類似於DNA的天然復制過程,其特異性依賴於與靶序列兩端互補的寡核苷酸引物。PCR由變性—退火—延伸三個基本反應步驟構成。
① 模板DNA的變性:模板DNA經加熱至93 ℃左右一定時間後,使模板DNA雙鏈或經PCR擴增形成的雙鏈DNA解離,使之成為單鏈,以便它與引物結合,為下輪反應作準備。
② 模板DNA與引物的退火(復性):模板DNA經加熱變性成單鏈後,溫度降至55 ℃左右,引物與模板DNA單鏈的互補序列配對結合。
③ 引物的延伸:DNA模板—引物結合物在TaqDNA聚合酶的作用下,以dNTP為反應原料,靶序列為模板,按鹼基配對與半保留復制原理,合成1條新的與模板DNA 鏈互補的半保留復制鏈,重復循環變性—退火—延伸三過程,就可獲得更多的 「半保留復制鏈」,而且這種新鏈又可成為下次循環的模板。每完成1個循環需2~4 min, 2~3 h就能將待擴目的基因擴增放大幾百萬倍。檢測HIVRNA,需要先利用逆轉錄反應將RNA轉錄為cDNA,繼而以cDNA為模板進行PCR擴增即可,這樣的反應稱為RT-PCR。
五、實時熒光定量PCR技術
實時熒光定量PCR技術,是指在PCR反應體系中加入熒光基團,利用熒光信號實時監測整個PCR進程,最後通過標准曲線對未知模板進行定量分析的方法。
本技術的原理是使用熒光基團標記探針,5′端標記熒光基團R,3′端標記淬滅基團Q,在沒有PCR擴增時,由於熒光基團和淬滅基團空間距離很近,使熒光基團被淬滅,不發熒光;而當PCR擴增時,引物與熒游標記的特異性探針同時結合在模板上,熒游標記的探針與模板的結合位置位於上下游引物之間, 利用Taq酶的5′3′外切酶活性,將熒光探針水解,熒光基團被釋放出來,由於在空間上與淬滅基團分開,則發出熒光。發出的熒光可以被熒光探頭檢測到, 一邊擴增,一邊檢測,這樣就實現了「實時」檢測。該技術不僅實現了PCR從半定量到定量的飛躍,而且與常規PCR相比,它具有特異性強、自動化程度高、有效解決了PCR污染問題等特點。
六、支鏈DNA檢測法——bDNA
bDNA是定量檢測血漿中的HIV1型RNA的一種方法。bDNA是指人工合成的帶有側鏈的DNA片段,在其每個側鏈上都可以標記被激發的標記物。將HIV的RNA通過離心從病毒顆粒中釋放出來,然後用捕獲探針1將其捕獲到微孔中。捕獲探針2與病毒RNA的另一部分特異結合,又與預放大探針結合。後者再與放大探針即bDNA探針雜交。兩套靶探針分別與病毒RNA的pol基因的不同區域特異結合。在微孔中形成HIVRNA寡核苷酸復合物。再加入1種化學發光底物孵育後可放大化學發光信號。通過發光強度來定量,因為發光強度與樣品中HIVRNA含量成比例。bDNA不存在擴增物的交叉污染,這 較PCR是一大進步。bDNA有數十個覆蓋整個基因組的探針,可以方便地檢測HIV某些變異株,但靈敏度不及PCR,提高bDNA靈敏度是一大難點
② 核酸檢測的方式都有什麼
核酸檢測主要有酸檢測試劑、抗體檢測兩種方法,第一種方法通常是通過咽拭子進行PCR檢測,基因擴增,然後再進行核酸檢測。 而抗體檢測是選擇抽血,抽血的方法得出結果看,觀察其抗體滴度是否升高,這種情況常常是指在抽血前常出現不能產生抗體的情況。
核酸檢測是一種「進行時」檢測,通過聚合酶鏈反應等方法檢測病毒基因組中特定的核酸序列,從而判斷被檢測者此刻是否感染了病毒。
與核酸檢測不同,新冠病毒抗體檢測顯示的是哪些人曾經被感染。抗體檢測又被稱為血清學檢測,目的是檢測血液樣本中的抗體。人體感染病毒後,會產生IgM或IgG抗體。
被感染初期,人體會迅速產生IgM抗體,以抗感染;相比之下,產生IgG抗體的速度更慢,但IgG抗體保留時間更長。抗體檢測就是檢測血清中是否有這些特異性抗體,以確定被測試者是否曾被感染。
(2)關於核酸檢測哪種是不正確的方法擴展閱讀:
六種人不宜做核酸檢測
一、釆樣前30分鍾,對於有吸煙、喝酒、嚼口香糖等人群不宜做核酸檢測,以免影響檢測的准確度。
二、進食太飽的人不宜做核酸檢測,否則容易發生惡心嘔吐,影響採用結果的准確性。
三、核酸檢測前有口服抗病毒和抗感染的葯物的,應推遲做核酸檢測,避免影響檢測結果。
四、若是進行鼻拭子采樣的話,對於鼻咽部有病症的急性期,如出血、水腫等人群可以暫不予檢測。
五、剛進行核酸檢測時出現惡心嘔吐的人,應暫緩做核酸檢測,需等檢測者緩解後再予以進行。
六、被采樣者用手或其他物品觸及拭子采樣冠、棉簽的前端的不宜進行,否則容易造成污染,影響檢測結果,需更換進行重做。
③ 核酸采樣摘口罩正確方法
核酸采樣摘口罩正確方法
核酸采樣摘口罩正確方法,網上流傳的「核酸檢測時把口罩往上推只露出嘴巴」的做法,是不可取的。如有觸碰或污染口罩內面,請及時更換新的口罩。核酸采樣摘口罩正確方法。
核酸采樣時要注意,手不能碰及口罩外面,要用雙手從耳朵後面取下口罩。然後屏住呼吸,不要對外呼氣,避免呼出的氣溶膠給周圍環境帶來污染,或給其他人造成一定的風險。
檢測前在醫務人員示意後取下口罩,采樣結束後立即戴好,可備一個備用口罩,污染後方便隨時更換。
去核酸檢測前,建議准備備用口罩。
核酸檢測排隊時一定要正確佩戴口罩,采樣時,當工作人員做好手衛生拿出采樣棉簽准備采樣時,你才可以取下口罩,雙手拉住口罩耳帶不放,采樣結束後立即戴好口罩並離開。當發現口罩被污染時,建議立即更換上備用口罩,換下的口罩扔進采樣點設置的「廢棄口罩專用桶」。
如果沒有帶備用口罩,回家後摘下的口罩建議不要二次使用,需密封或者消毒後丟到小區設置的「廢棄口罩專用桶」或者放入塑料袋密封後丟棄至其他垃圾收集容器內。
用過的口罩不能隨便丟!該怎麼處理?
健康人群使用後的.口罩,按照生活垃圾分類的要求處理;
疑似病例或確診患者佩戴的口罩,不可隨意丟棄,應視作醫療廢棄物,嚴格按照醫療廢棄物有關流程處理。
核酸檢測不能「啊」出聲?疾控專家釋疑
在核酸檢測時,不能發「啊」的聲音。這是因為當采樣者為陽性患者時,喊「啊」可能會呼出大量的病毒,並在采樣區域形成氣溶膠,造成采樣點環境污染,下一位市民參加核酸檢測時,可能會無法避免地將病毒的氣溶膠吸入呼吸道。
正確配合方式是與前後的人保持距離,前一位在采樣的時候,不要湊近去看,當排到自己的時候要等工作人員把咽拭子拿出來,准備好了才可以張開嘴巴,但是不要對外呼氣,屏住呼吸,盡量打開口腔,做出「啊」的口型,讓工作人員能夠看到您的扁桃體,以便采樣順利完成。
近日,網上流傳做核酸檢測時
「把口罩往上推只露出嘴巴」
這種做法是否可取?
江蘇省疾控中心消毒與媒介生物防制所主任技師孫巍表示,網上流傳的「核酸檢測時把口罩往上推只露出嘴巴」的做法,是不可取的。
「首先核酸檢測是必須暴露嘴巴的,嘴巴暴露後在密封不是很好的情況下,不規范包裹住鼻部,沒有太大實際意義。其次在用手把口罩往上推的過程中,有可能造成手或者面部的皮膚接觸到口罩的外部,讓受到污染的口罩外部接觸到自身皮膚,所以不建議在核酸檢測中採取這種方式。」
專家建議,如果必須摘掉口罩,比如核酸檢測時,摘口罩時應該抓住耳帶解下口罩,手避免接觸口罩外面。妥善保存摘下的口罩,避免污染口罩內面,檢測結束後及時佩戴,如有觸碰或污染口罩內面,請及時更換新的口罩。
孫巍提醒,正確佩戴口罩還要注意以下事項:不要為了說話、飲食方便,將口罩拉至下頜、脖頸等位置,也不要將口罩掛在手臂上,使口罩內層受到污染。
同時專家提醒,考慮到天氣原因,普通公眾可以在非密閉環境、非人員密集環境中選擇質地相對輕薄的一次性使用醫用口罩。要注意的是,普通的紗布口罩或者防曬口罩,是起不到防護作用的,要在正規渠道購買的符合標準的口罩。如果需要長時間佩戴口罩,佩戴前在鼻樑、顴骨、耳根等部位塗抹潤膚霜,減少口罩和皮膚之間的摩擦,緩解面部勒痕。
核酸檢測時口罩怎麼摘
1、首先要多備一個新的醫用防護口罩。
2、正確戴好口罩,戴口罩前需洗手消毒,然後將口罩平展,雙手平拉推向面部,捏緊鼻夾使口罩緊貼面部,用左手按住口罩,右手將護繩繞在耳根部,再用右手按住口罩,左手將護繩繞向耳根部,最後雙手向下拉口罩邊沿使其蓋至眼下和下巴。
3、摘口罩時不要接觸口罩前面,即污染面,用手捏住口罩的系帶並將其扔掉,健康人群佩戴過的口罩,按生活垃圾分類的要求處理即可。
做核酸檢測摘下口罩的時候會不會感染
根據情況決定,如:
1、做核酸檢測時,如果檢測人員中沒有新冠感染者,那麼自然也就不存在感染新冠肺炎的可能。
2、按照做核酸檢測的相關要求,與其他受檢者以及醫護工作人員等保持一米間隔距離,不交流,正確戴好口罩等,檢測期間只是在檢測時摘下口罩進行核酸取樣的話,也不會感染新冠的可能。
3、如果做核酸檢測時沒有戴好口罩,如沒有戴牢,鼻子留有空隙,期間還去下口罩和別人交談,采樣時發出「啊」的聲音,如果自己是新冠感染者可能會造成交叉感染現象,自己不是新冠感染者,也可能因為受檢人群中有新冠感染者而傳染上新冠病毒。
4、做完核酸檢測後拿出新的口罩更換。