分子量檢測方法

『壹』 高分子測分子量的方法都有哪些

分子測分子量的方法：

高聚物的分子量及分子量分布，是研究聚合物及高分子材料性能的最基本數據之一。它涉及到高分子材料及其製品的力學性能，高聚物的流變性質，聚合物加工性能和加工條件的選擇。也是在高分子化學、高分子物理領域對具體聚合反應，具體聚合物的結構研究所需的基本數據之一。

分子量檢測方法：GPC 凝膠滲透色譜，飛行質譜法(Maldi-tof)

分子量測定儀器參數

GPC 流動相 ：THF(四氫呋喃)，H2O(水相)，DMF( N,N-二甲基甲醯胺), 二氯甲烷，TCB(三氯苯)

檢測方法：端基滴定法 冰點降低法 蒸汽壓下降法（VPO） 膜滲透壓法 。

檢測儀器：核磁共振 流動分析儀/流動注射分析儀(FIA SFA CFA)

電容水分測定儀 電阻水分測定儀

紅外水分測定儀 紫外可見分光光度計

紅外光譜(IR、傅立葉) 氣相分子吸收光譜儀（GMA）

『貳』 可以用什麼方法測無機高分子的分子量

1.粘度法測相對分子量（粘均分子量Mη） 
  用烏式粘度計，測高分子稀釋溶液的特性粘數[η]，根據Mark-Houwink公式[η]＝kMα，從文獻或有關手冊查出k、α值，計算出高分子的分子量。其中，k、α值因所用溶劑的不同及實驗溫度的不同而具有不同數值。  
2.小角激光光散射法測重均分子量（Mw） 
  當入射光電磁波通過介質時，使介質中的小粒子（如高分子）中的電子產生強迫振動，從而產生二次波源向各方向發射與振盪電場（入射光電磁波）同樣頻率的 散射光波。這種散射波的強弱和小粒子（高分子）中的偶極子數量相關，即和該高分子的質量或摩爾質量有關。根據上述原理，使用激光光散射儀對高分子稀溶液測 定和入射光呈小角度（2℃－7℃）時的散射光強度，從而計算出稀溶液中高分子的絕對重均分子量（MW） 值。採用動態光散射的測定可以測定粒子（高分子）的流體力學半徑的分布，進而計算得到高分子分子量的分布曲線。  
3.體積排除色譜法（SES）（也稱凝膠滲透色譜法（GPC）） 
  當高分子溶液通過填充有特種多孔性填料的柱子時，溶液中高分子因其分子量的不同，而呈現不同大小的流體力學體積。柱子的填充料表面和內部存在著各種大 小不同的孔洞和通道，當被檢測的高分子溶液隨著淋洗液引入柱子後，高分子溶質即向填料內部孔洞滲透，滲透的程度和高分子體積的大小有關。大於填料孔洞直徑 的高分子只能穿行於填料的顆粒之間，因此將首先被淋洗液帶出柱子，而其他分子體積小於填料孔洞的高分子，則可以在填料孔洞內滯留，分子體積越小，則在填料 內可滯留的孔洞越多，因此被淋洗出來的時間越長。按此原理，用相關凝膠滲透色譜儀，可以得到聚合物中分子量分布曲線。配合不同組分高分子的質譜分析，可得 到不同組分高分子的絕對分子量。用已知分子量的高分子對上述分子量分布曲線進行分子量標定，可得到各組分的相對分子量。由於不同高分子在溶劑中的溶解溫度 不同，有時需在較高溫度下才能製成高分子溶液，這時GPC柱子需在較高溫度下工作。  
4.質譜法 
  質譜法是精確測定物質分子量的一種方法，質譜測定的分子量給出的是分子質量m對電荷數Z之比，即質荷比（m/Z）過去的質譜難於測定高分子的分子量， 但近20餘年由於我的離子化技術的發展，使得質譜可用於測定分子量高達百萬的高分子化合物。這些新的離子化1.粘度法測相對分子量（粘均分子量Mη） 
  用烏式粘度計，測高分子稀釋溶液的特性粘數[η]，根據Mark-Houwink公式[η]＝kMα，從文獻或有關手冊查出k、α值，計算出高分子的分子量。其中，k、α值因所用溶劑的不同及實驗溫度的不同而具有不同數值。  
2.小角激光光散射法測重均分子量（Mw） 
  當入射光電磁波通過介質時，使介質中的小粒子（如高分子）中的電子產生強迫振動，從而產生二次波源向各方向發射與振盪電場（入射光電磁波）同樣頻率的 散射光波。這種散射波的強弱和小粒子（高分子）中的偶極子數量相關，即和該高分子的質量或摩爾質量有關。根據上述原理，使用激光光散射儀對高分子稀溶液測 定和入射光呈小角度（2℃－7℃）時的散射光強度，從而計算出稀溶液中高分子的絕對重均分子量（MW） 值。採用動態光散射的測定可以測定粒子（高分子）的流體力學半徑的分布，進而計算得到高分子分子量的分布曲線。  
3.體積排除色譜法（SES）（也稱凝膠滲透色譜法（GPC）） 
  當高分子溶液通過填充有特種多孔性填料的柱子時，溶液中高分子因其分子量的不同，而呈現不同大小的流體力學體積。柱子的填充料表面和內部存在著各種大 小不同的孔洞和通道，當被檢測的高分子溶液隨著淋洗液引入柱子後，高分子溶質即向填料內部孔洞滲透，滲透的程度和高分子體積的大小有關。大於填料孔洞直徑 的高分子只能穿行於填料的顆粒之間，因此將首先被淋洗液帶出柱子，而其他分子體積小於填料孔洞的高分子，則可以在填料孔洞內滯留，分子體積越小，則在填料 內可滯留的孔洞越多，因此被淋洗出來的時間越長。按此原理，用相關凝膠滲透色譜儀，可以得到聚合物中分子量分布曲線。配合不同組分高分子的質譜分析，可得 到不同組分高分子的絕對分子量。用已知分子量的高分子對上述分子量分布曲線進行分子量標定，可得到各組分的相對分子量。由於不同高分子在溶劑中的溶解溫度 不同，有時需在較高溫度下才能製成高分子溶液，這時GPC柱子需在較高溫度下工作。  
4.質譜法 
  質譜法是精確測定物質分子量的一種方法，質譜測定的分子量給出的是分子質量m對電荷數Z之比，即質荷比（m/Z）過去的質譜難於測定高分子的分子量， 但近20餘年由於我的離子化技術的發展，使得質譜可用於測定分子量高達百萬的高分子化合物。這些新的離子化技術包括場解吸技術（FD），快離子或原子轟擊 技術（FIB或FAB）,基質輔助激光解吸技術（MALDI-TOF MS）和電噴霧離子化技術（ESI-MS）。由激光解吸電離技術和離子化飛行時間質譜相結合而構成的儀器稱為「基質輔助激光解吸－離子化飛行時間質譜」 （MALDI-TOF MS 激光質譜）可測量分子量分布比較窄的高分子的重均分子量（Mw）。由電噴霧電離技術和離子阱質譜相結合而構成的儀器稱為「電噴霧離子阱質譜」（ESI- ITMS 電噴霧質譜）。可測量高分子的重均分子量（Mw）。  
5.其他方法 
  測定高分子分子量的其他方法還有：端基測定法，沸點升高法，冰點降低法，膜滲透壓法，蒸汽壓滲透法，小角X－光散射法，小角中子散射法，超速離心沉降法等。

『叄』 如果測定某種蛋白質的分子量，採用何種層析法最好其原理是什麼

需要測定蛋白質的分子量，可以直接用SDS聚丙烯醯胺凝膠電泳就可以了，層析法不能測定蛋白子的分子量，但是可以根據分子量的大小來分離開蛋白。

常用技術

1、沉澱，

2、電泳：蛋白質在高於或低於其等電點的溶液中是帶電的，在電場中能向電場的正極或負極移動。根據支撐物不同，有薄膜電泳、凝膠電泳等。

3、透析：利用透析袋把大分子蛋白質與小分子化合物分開的方法。

4、層析：利用蛋白質在固定相與流動相之間不同的分配比例，達到分離目的的技術。

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產品特點

1、處理過程為單純物理過程，無任何相變。設備操作溫度低，避免了傳統工藝的種種弊端;

2、系統採用先進的膜分離技術，工藝簡單，運行穩定可靠，處理效率高;

3、可以對生產廢水中的有用物質進行提純回用，實現經濟、環保雙贏;

4、設備投資少，運行費用低。

『肆』 多糖分子量測定

(1)高效凝膠滲透色譜法(HPGPC)分子量檢測分析:以懷同分子量的右旋糖酐為標准品，采彩HPGPC法，使用高效凝膠滲透色譜串聯柱，差檢測器檢測，採用GPC軟體對結果進行分析，以標准品相對分子質量的對數值為縱坐標，以相應色譜峰的保留時間為橫坐標進行線性回歸，得歸方程，技術峰位分子量(Mp)、重均分子量(Mw)和數均分子量(Mn)以吸分量分布指數D(Mw/Mn)，改純盱測定多糖分子量和檢測多糖純度。

『伍』 實驗室中常用的DNA分子量的測定方法有哪些

第一種方法最常用
1）紫外吸收法也就是測量OD（260）和OD（280）的吸收值,這樣的方法其它的雜質對測量結果影響大一點,因為其它雜質在這兩個吸收波長也有吸收.
（2）熒光法,用PicoGreen熒光染料,測定DNA,RNA濃度比較靈敏,並且適合測量低濃度和微量DNA和RNA,並且受其它雜質的影響不大,缺點要有專門的熒光檢測儀器,試劑比較昂貴.
純化DNA可以買試劑盒,主要有膜吸附法,磁珠分離法,都很方便.
RNA與DNA最重要的區別一是RNA只有一條鏈,二是它的鹼基組成與DNA的不同,RNA沒有鹼基T（胸腺嘧啶）,而有鹼基U（尿嘧啶）.所以導致他們有以下性質上的不同.
1.兩性解離：DNA無,只有酸解離,鹼基被屏蔽（在分子內部形成了H鍵）.RNA有,有PI.
2.粘度大：DNA;RNA,粘度由分子長度/直徑決定,DNA為線狀分子,RNA為線團.
3.鹼的作用：DNA耐鹼RNA易被鹼水解.
4.顯色反應：
鑒別DNA和RNA+濃HCl RNA ------→ 綠色化合物
DNA ------→ 藍紫色化合物苔黑酚
二苯胺啡啶溴紅（熒光染料）和溴嘧啶都可對DNA染色,原理是卡在分子中,DNA的離心和電泳顯色可用它們.
DNA和RNA的鑒別染色
利用吖啶橙的變色特性可鑒別DNA和RNA.吖啶橙作為一種熒光染料已被用於染色固定,非固定細胞核酸,或作溶酶體的一種標記.觀察死亡細胞熒光變色性變化以及區別分裂細胞和靜止細胞群體.雖然測定DNA和RNA含量時較難獲得好的重復性結果,但該方法已被許多實驗室廣泛採用.
5.溶解性：都溶於水而不溶於乙醇,因此,常用乙醇來沉澱溶液中的DNA和RNA.DNA溶於苯酚而RNA不溶,故可用苯酚來沉澱RNA.
6.紫外吸收：核酸的λm＝260nm,鹼基展開程度越大,紫外吸收就越厲害.當A＝1時,DNA：50ug/ml,RNA和單鏈DNA：40ug/ml,寡核苷酸：20ug/ml.用A260/A280還可來表示核酸的純度.
7.沉降速度：對於拓撲異構體（核苷酸數目相同的核酸）,其沉降速度從達到小依次為：RNA ; 超螺旋DNA > 解鏈環狀DNA ; 鬆弛環狀DNA ; 線形DNA也就是在離心管中最上層是線形DNA,最下面是RNA.
8.電泳：核苷酸、核酸均可以進行電泳,泳動速度主要由分子大小來決定,因此,電泳是測定核酸分子量的好方法.
9.DNA分子量測定最直接的方法：用適當濃度的EB（溴嘧啶）染色DNA,可以將其他形式的DNA變成線形DNA,用電鏡測出其長度,按B-DNA模型算出bp數,根據核苷酸的平均分子量就可計算出DNA的分子量.