⑴ 檢測目的基因是否導入和是否插入分別用什麼方法
檢測目的基因是否導入受體細胞的方法是:導入時用的運載體上如果有抗性基因(標記基因),就可以通過檢測抗性基因的表達來檢測,比如運載體PBR322 就帶有抗四環素基因和抗氨卞青黴素基因
要麼就等目的基因在受體細胞中表達以後,然後根據特定的性狀來區分.
還有DNA、mRNA、蛋白質雜交法.
合成所最終需要的蛋白質,即最終所需要的產品.
⑵ 檢測目的基因是否轉錄出mRNA的方法!!
檢測目的基因是否導入用的是DNA-DNA分子雜交,檢測是否轉錄用DNA-RNA分子雜交,檢測是否翻譯用抗原-抗體雜交。
⑶ 檢測目的基因是否導入和是否插入分別用什麼方法
關於這個問題,是否是詢問外源基因是否導入宿主細胞和外源基因是否插入(整合)到宿主基因組中的檢測方法?
檢測是否導入,簡單的方法可通過PCR方法檢測,針對該基因設計特異性引物進行PCR擴增,檢測樣本若有目的條帶則一般認為該基因已經導入宿主細胞。
檢測基因是否已插入,則需要提取基因組進行測序,以測序結果進行比對,判斷基因是否插入到了宿主基因組中。
希望能幫到你
⑷ 檢測轉基因生物是否轉錄出mRNA,應通過何種分子雜交方法實現
檢測目的基因是否導入用的是DNA-DNA分子雜交,檢測是否轉錄用DNA-RNA分子雜交,檢測是否翻譯用抗原-抗體雜交。
前兩者都是通過一條被標記的DNA單鏈作為基因探針來實現的。這個探針具體的做法就是:用目的基因轉錄出的mRNA為模板,以被放射性同位素標記的脫氧核苷酸為原料,用逆轉錄的方法合成一條被標記的DNA,然後把模板的mRNA給水解掉,這樣就得到一條被標記的DNA單鏈,這就是探針。它的特點就是可以和目的基因轉錄的mRNA互補配對(即能形成雜交帶),所以把探針放在受體細胞中如果發現有雜交帶產生,就說明目的基因轉錄了。
另外,這個探針也可以用來做DNA-DNA分子雜交,即檢測目的基因是否導入,方法:先取出受體細胞中DNA然後高溫變性成單鏈,把探針放進去,然後降溫復性,如果形成雜交帶說明,這些DNA中有能和探針互補的DNA片段,即目的基因。因為這個探針本身就是由mRNA逆轉錄來的,它的鹼基序列與目的基因的一條鏈完全相同,當然就可以和另外一條鏈剛好互補了。
這樣可以嗎?
⑸ 如何檢測基因是否轉錄出mRNA
提取RNA後反轉錄,PCR方法檢測反轉錄的DNA產物
或者就是提取到的RNA和特異性的探針雜交,你查一下Nothern blot就明白了
⑹ 檢驗目的基因是否轉錄用什麼方法
應用分子雜交進行檢測。
分子雜交技術:不同的DNA 片段之間,DNA 片段與RNA 片段之間,如果彼此間的核苷酸排列順序互補也可以復性,形成新的雙螺旋結構。這種按照互補鹼基配對而使不完全互補的兩條多核苷酸相互結合的過程稱為分子雜交。檢測目的基因是否進行轉錄,即有無互補RNA產生,可以使用分子雜交技術。
⑺ 方法檢測,分析這兩種方法有無差別,用什麼統計方法
好像是吧,今天在一本練習冊的總結裡面看到配對設計2*2的卡方檢驗的用途有兩種處理結果的關聯性分析!公式用普通四格表的卡方計算公式計算! 查看>>
⑻ 如何檢測目的基因是否轉錄
檢測目的基因是否轉錄通常採用分子雜交的方法。
基因表達分為轉錄及翻譯兩階段,轉錄是以DNA(基因)為模板生成mRNA的過程,翻譯是以mRNA為模板生成蛋白質的過程,檢測外源基因的表達就是檢測特異mRNA及特異蛋白質的生成。所以基因表達檢測分為兩個水平:即轉錄水平上對特異mRNA的檢測和翻譯水平上對特異蛋白質的檢測。
轉錄水平上的檢測主要方法是Northern雜交,它是以DNA或RNA為探針,檢測RNA鏈。和Southern雜交相同,Northern雜交包括斑點雜交和印跡雜交。
也可用RT-PCR(reverse
transcribed
PCR)方法檢測外源DNA在植物體內的轉錄表達。其原理是以植物總RNA或mRNA為模板進行反轉錄,然後再經PCR擴增。如果從細胞總RNA提取物中得到特異的cDNA擴增條帶,則表明外源基因實現了轉錄。此法簡單、快速,但對外源基因轉錄的最後決定,還需與Northern雜交的實驗結果結合
⑼ 設計一個檢測某一基因是否轉錄的檢測方法的實驗,簡述其過程與原理。
原理:轉錄是以一條DNA鏈為模板,合成出一條mRNA的過程。所以,檢測某一基因在特定條件下是否轉錄,可以提取樣品的mRNA,反轉錄成cDNA,然後用擴增該基因的PCR引物擴增,如果有條帶就是說明轉錄,沒有條帶就是不轉錄。
過程:
1.提取樣品mRNA;
2.反轉錄合成cDNA;
3.設計該基因特異的PCR引物;
4.進行PCR擴增,電泳,檢測結果。
⑽ 檢測目的基因是否轉錄數mn時需要用什麼做探針在與相應的物質雜交
ABD.
C不能選.
因為可能會出現
被標記的DNA和目的基因的雜交帶,
那麼和是否轉錄沒有關系.
A可以選,
被標記的DNA和mRNA的雜交也稱為DNA分子雜交技術.