『壹』 絡合鐵的測定方法
甘薯中是含有絡合鐵（NaFeEDTA）的。
NaFeEDTA是一種性質穩定的絡合型鐵強化劑，生物利用率高，不易受食物中鐵吸收抑制因子的影響，對食物載體色澤、口感等感官指標的影響較小，被認為是目前最具前景的鐵營養補充劑。
因此，研究一種直接准確測定醬油中NaFeEDTA含量的方法對鐵強化醬油質量控制和市場監測有著極為重要的意義。
但是，現有的測定方法中，原子吸收分光光度法只能測定鐵強化醬油中總的鐵的含量，而直接用紫外吸收分光光度法扣除本底測定時[1]，醬油中的防腐劑、氨基酸類、核酸類、色素及其他有機酸類等物質在紫外光區都有較強的吸收，勢必干擾測定結果，並且需要有強鐵化醬油造成方法的局限性。本研究希望獲得一種既可消除各種游離鐵的干擾，又可將空白醬油本身的顏色干擾扣除的快速測定鐵強化醬油中NaFeEDTA含量的有效方法。
1. 材料與方法
1.1 儀器試劑
1.1.1 儀器 上海分析儀器廠UV-756CTR型紫外可見分光光度計
1.1.2 試劑 對照品：NaFeEDTA （sigma公司），硫氰酸氨、過硫酸氨、濃鹽酸、甲醇、乙醇、丙酮、三氯化鐵、硝酸鐵（所有試劑均為分析純）。
顯色劑的配製： 稱取硫氰酸氨75g，置100ml 棕色容量瓶中，加水250ml溶解後家丙酮75ml，用水稀釋至刻度，搖勻[2]。
NaFeEDTA對照品溶液的配置：精密稱取NaFeEDTA對照品約200mg，置100ml 棕色容量瓶中，加水溶解並定容至刻度，搖勻。
稀鹽酸配製：取鹽酸500ml ， 加水稀釋至1000ml,搖勻。
1.2分析
1.2.1 標准曲線的繪制 精密量取NaFeEDTA對照品溶液0、1、2、3、4、5、
6ml分別置於50ml 容量瓶中，加75%的甲醇溶液定容，搖勻。精密量取稀釋後的不同濃度的對照品溶液5ml 分別置於50ml容量瓶中，加水5.00ml ，加顯色劑15ml ，用無水乙醇定容，搖勻，在λ=480nm處分別測定其吸光度A0，再分別精密測量取不同濃度標准品溶液5ml於50ml 容量瓶中，加稀鹽酸5.00 ml ，加顯色劑15ml，用無水乙醇定容，搖勻，在λ=480nm處分別測定其吸光度A，計算不同濃度ΔA=A- A0 ,以濃度C為橫坐標，ΔA為縱坐標繪制標准曲線，結果如圖（1）：
線型範圍為4~20μg/ml（以NaFeEDTA含量計），計算線性回歸方程為：
ΔA=0.0349C ，相關系數為0.9999，線性關系良好。
1.2.2 樣品測定 取鐵強化醬油樣品3.00ml置於50ml容量瓶中，加75%甲醇溶液定容，醇沉30min後過濾，取續濾液5.00ml兩份，分別置於兩個50ml 的容量瓶中，其中一個容量瓶中加水5.00ml 、過硫酸氨100mg ，顯色劑硫氰酸氨15mg，加無水乙醇定容，搖勻後測定吸光度A樣0 然後向另一個容量瓶中加稀鹽酸5.00ml，過硫酸氨100mg,顯色劑15ml，加無水乙醇定容後，搖勻，測定吸光度A樣0 。計算ΔA=A樣 - A樣0 ，並與對照品ΔA對照 = A對照- A對照0 比較，C樣=C對照* （ΔA樣 /ΔA對照）即可得到樣品中NaFeEDTA的含量。
2 結果與討論
2.1 實驗條件
2.1.1 測定波長的選擇 將NaFeEDTA對照品配成濃度為15μg/ml的溶液，顯色後，在400~600nm波長范圍內掃描，如圖（2）：
實驗結果表明，此紅色絡合物在λ=480nm處有最大的吸收，與潘教麥報道一致[3]
2.1.2 酸度對顯色靈敏度的影響 由於NaFeEDTA只有在一定的酸性條件下才能離解出來Fe3+ 本方法採用鹽酸（取鹽酸50ml , 加水稀釋至100ml）來調節酸度，並考察了加入不同量的鹽酸對顯色靈敏度的影響，結果如圖（3）：
根據圖顯示的實驗結果，鹽酸加入量應該大於4.00ml（pH≤0.5, 在此實驗條件下，NaFeEDTA中的鐵完全解離生成三價鐵離子，本實驗採用的鹽酸加入量為5.00ml。
2.1.3 顯色劑加入量考察
在樣品測定條件下，顯色前分別加入0、5、10、15、20ml顯色劑，分別測定不同條件下ΔA，考察顯色劑加入量對測定結果的影響。實驗結果如圖（4）：
根據實驗結果，本實驗顯色劑的加入量為15ml。
2.1.4 顯色產物穩定性 在樣品測定條件下，顯色後分別放置不同的時間，測定其吸光度，通過實驗發現，在室溫下，紅色絡合物在30min內，吸光度值基本無變化，在實驗室中我們還發現酸性條件下，當溫度升高時，顯色後生成的紅色絡合物紅色褪去速度加快，靈敏度降低，所以，樣品測定時溫度不宜太高。
2.2 樣品回收率
表1是用標准加入法對虎王牌醬油做的回收率實驗，回收率在95.0%~110.0%之間，表明該方法測定結果可靠。
2.3 樣品測定的重現性
精密量取虎王牌鐵強化醬油6份，每份3ml，按照樣品測定法測定ΔA 樣
分別為0.450、0.458、0.455、0.452、0.449、0.454，平均值為0.453，RSD=0.8%，實驗結果表明該方法的重現性良好。
表1：醬油中NaFeEDTA回收率測定結果
Table 1 NaFeEDTA recovery measurement in soy sauce
編號 標准加入量(mg/ml) 測定值（mg/ml） 回收率（%）
1 1.00 95.0 95.0
2 1.00 1.07 107.0
3 2.00 2.10 105.0
4 2.00 2.20 110.0
5 3.00 3.15 107.3
6 3.00 3.21 107.0
2.4 不同品種的鐵強化醬油中NaFeEDTA的含量測定
用此方法對不同品種的鐵強化醬油進行了測定，測定結果與添加量基本相符。測定結果見表2
表2：不同品種的鐵強化醬油中NaFeEDTA的含量測定
Table 2 NaFeEDTA contents of different soy sauce samples
樣品種類 NaFeEDTA加入量（mg/ml） 測定值(mg/ml)
珍極牌 2.00 1.95
海天牌 2.00 2.16
北康牌 2.00 1.88
和田寬 2.00 1.95
家樂牌 2.00 1.94
虎王牌 2.00 2.07
2.5 討論
2.5.1 醇沉條件的考察 由於醬油本身的顏色太深，所以，樣品測定前先醇沉。實驗考察了甲醇濃度及醇沉時間對回收率的影響。實驗結果見表3及表4。
表3：
用不同濃度的甲醇醇沉後樣品中NaFeEDTA的回收率
Table 3 NaFeEDTA recovery after precipitation by different alcohol amounts
甲醇濃度（%） 醬油本底吸光度 樣品回收率（%）
30 0.343 109.4
60 0.240 101.2
75 0.159 107.0
90 0.095 91.7
理論上在對樣品進行醇沉時，甲醇濃度越大醇沉效果越好，但是，由於NaFeEDTA在甲醇中的溶解度低，所以，醇沉時水的比例不能太小，根據表3的實驗結果可知，用75%的甲醇效果最佳。
根據表4的實驗結果，我們將醇沉時間定為30min。
2.5.2 顯色時溶劑的選擇 由於樣品顯色後生成的紅色絡合物在丙酮、乙醇等有機溶劑中的穩定性好，靈敏度高，所以，選擇在乙醇中顯色[1]。
表 4 不同醇沉時間樣品中NaFeEDTA 的回收率
Table 4 NaFeEDTA recovery in different precipitation times by alcohol treatment
醇沉時間（min） 30 60 120
樣品回收率（%） 100.5 102.1 101.9
2.5.3 樣品中NaFeEDTA 含量計算 在實驗中 ，發現游離的鐵離子，在中性和酸性條件下均可與硫氰酸氨生成紅色絡合物，而NaFeEDTA只有在酸性的條件下才可以與硫氰酸氨生成紅色絡合物[4]，所以，在中性條件下可測定游離鐵的含量，在酸性（pH≤0.5）條件下可測定總鐵的含量，鐵強化醬油中總鐵的量減去游離鐵的含量即為樣品中的NaFeEDTA的含量。
[參考文獻]：
[1]苗虹，於波，霍軍生，等。食品添加劑NaFeEDTA測定方法研究。食品科學，2000，21（8）：48-50
[2] 國家葯典委員會. 中華人民共和國葯典二部 . 北京： 化學工業出版社，2000，116-117
[3] 潘教麥， 陳亞森， 嚴恆太 . 顯色劑及其在光度分析中的應用. 上海 : 上海科學技術出版社，1982，51-56
[4] 於如* . 分析化學. 北京： 人民衛生出版社， 1989，161-162
甘薯原料在工藝上的優點：在酒精生產中，甘薯原料的出酒率較高。其優點是：首先甘薯的澱粉純度高（可用2%鹽酸轉化，測定其中所含澱粉，與用同樣方法測定別的原料比較，甘薯的澱粉純度高 ）。其次是甘薯的結構鬆脆，易於蒸煮糊化，為以後的糖化發酵創造有利條件。
甘薯是高澱粉作物。在相同條件下，單位面積澱粉產量比水稻高30.1％，比玉米高30.6％，比小麥高48.9％。而且每生產500公斤甘薯澱粉所需要的投資比水稻少25％，比玉米少20％，生產加工澱粉的競爭優勢很強。河北省盧龍縣種植甘薯並加工澱粉，每畝純收入1500元，收益是種植其它作物的3倍多。目前利用甘薯進行深加工最多的產品還有酒精、葡萄糖和檸檬酸等。甘薯原料需要量很大。