⑴ 總鐵結合力的測定
建立一種靈敏度高、選擇性好的鉻天青B血清總鐵結合力的直接測定法。方法 在pH4.5的條件下,結合鐵從轉鐵蛋白釋放,鉻天青B與血清中的鐵和過量的鐵標准液發生顯色反應,再加入鹼性緩沖液,在pH7.8的條件下,轉鐵蛋白從鐵和鉻天青B復合物中吸引鐵與其結合,溶液的吸光度值下降與血清總鐵結合力濃度呈正比。對反應條件和方法性能進行系統研究。結果 顯色絡合物的最大吸收波長為630nm,線性可達130.0μmol/L,回收率為98.3%~99.2%,批內變異系數為2.7%,批間變異系數為3.8%,與碳酸鎂作吸附劑的手工比色法比較有良好相關性,回歸方程為Y=0.994X+0.40,r=0.993。70例健康成人血清總鐵結合力含量為51.3~76.3μmol/L。結論 該法試劑穩定,具有操作快速、靈敏、簡便和結果准確等優點,適宜於血清總鐵結合力的手工測定和自動化分析。
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⑶ 鐵的測定方法有哪些
1)亞鐵嗪比色法原理:血清鐵和運鐵蛋白結合成復合物,在酸性介質中鐵從復合物中解離出來,再被還原劑還原成二價鐵,並與亞鐵嗪生成紫紅色化合物,在波長562nm處有一吸收峰,與同樣處理的標准液比較,即可求得血清鐵的含量。
2)雙聯吡啶比色法:在酸性條件下使鐵從與蛋白質結合狀態中游離出來。用鹽酸羥胺作還原劑使血清中三價鐵還原成二價鐵,後者與雙聯吡啶顯色劑反應生成紅色螫合物,在520nm處比色定量。本法簡便快速,但靈敏度差,干擾因素較多,尤以鐵質污染最為嚴重。溶血也會影響結果。
3)菲洛嗪比色法:三氯醋酸-鹽酸混合液使血清中的鐵從運鐵蛋白中釋放並使蛋白沉澱醫學教|育網|收集整理。釋放出來的三價鐵可用硫代乙醇酸還原成二價鐵,後者和菲洛嗪結合成紫紅色化合物,吸收峰為562nm。
4)血清總鐵結合力(TIBC):在血清樣品中加足量的鐵標准液使運鐵鐵蛋白被鐵飽和。過量的鐵用MgCO3除出,離心取上清液,按測血清鐵的方法求出鐵的含量,即為TIBC.