㈠ 核酸含量測定的方法和原理都有哪些
① 光吸收法：核酸中鹼基共軛結構在近紫外光波長260nm處有最大吸收，吸收強度與核酸濃度成正比,因此可以用於核酸定量。
② 定P法：核酸中P含量約為9.5%，因此可以通過測定樣品中的有機P量來進行核酸定量。
③ 核糖含量測定法：包括RNA的地衣酚法及DNA的二苯胺法。
④ 定量PCR法：定量PCR技術是指以外參或內參為標准，通過對PCR終產物的分析或PCR過程的監測，進行PCR起始模板量的定量。
⑤ 核酸雜交半定量法：通過探針與核酸在膜上雜交顯色，與標准品顯色進行比較從而進行半定量。
㈡ 簡述定量PCR的原理和過程
半定量反轉錄－聚合酶鏈反應（semi-,sqrt-pcr）是近年來常用的一種簡捷、特異的定量rna測定方法，通過mrna反轉錄成cdna，再進行pcr擴增，並測定pcr產物的數量，可以推測樣品中特異mrna的相對數量。以半定量rt-pcr為基礎建立起來的mrna含量測定技術，較含內標化的rt-pcr定量測定的mrna的方法更為簡便可行。這種方法不另設『內標准',排除了倆對不同引物之間的相互抑制和靈敏讀差異，而且具有明顯的劑量－效益關系和良好的重復性。步驟：1.抽提rna，2.反轉錄獲得cdna，3.以cdna為模板做pcr注意：步驟1，rna抽提質量一定要好，注意污染。內參的選擇，常用的有βactin和gapdh倆中。步驟3，半定量rt-pcr應該再兩管中進行，既內參和目的基因各一管，這樣便於控制，做圖的時候可以放在一各泳道里跑！指數期和平台期一定要摸清楚！㈢ PCR實驗是如何實現定性和定量的其定性和定量的詳細原理是什麼如何區別
定性應該較容易理解，大體是有或無，強和弱，要達到目的做常規PCR，通過產物條帶很容易看出。
定量現在一般分為半定量PCR和real-time PCR（實時定量PCR）兩種。半定量做法就是通過常規PCR，跑膠得到產物條帶，然後通過軟體對條帶進行分析，將條帶的強弱進行量化。real-time PCR定量更准確，它需要特定的儀器與試劑。原理是在PCR進行延伸的過程中其產物加上特定的熒游標記，然後通過機器讀出熒光的強度來反應檢測的樣本中c-DNA的豐度。