核酸檢測最省試劑盒的方法

① pcr核酸檢測是什麼意思方法及步驟

核酸檢測是目前全球用來對是否攜帶新冠病毒進行確定的一種有效方式。目前大家主要使用的是鼻拭子、咽拭子以及抗體血清lgm進行參考。但是根據最新的新加坡入境要求是進行pcr核酸檢測，那麼pcr核酸檢測是什麼意思呢？

pcr核酸檢測是什麼意思

PCR的意思是聚合酶鏈式反應，能夠用來擴增DNA，從而將微量的DNA擴增到能夠檢測的程度。有些病毒的核酸是DNA，需要採用這個方法進行檢測。所以PCR並不是進行的檢查，而是檢測DNA的一種方法。比如乙肝病毒DNA定量，用的就是這一種方法。檢查DNA的目的，一方面是可以診斷疾病，如果連病原體的DNA都能檢測到，就說明感染了這種病原體;另一方面是判斷病毒復制的多少，從而判斷病情嚴重程度或者治療效果。

pcr核酸檢測方法與步驟

進行核酸檢驗，需要經過取樣、留樣、留存、核酸提取、上機檢測五個步驟。

核酸檢測的第一步就是採集人體分泌物，用鼻試子或咽試子擦拭鼻腔或咽後壁及雙側咽扁桃體處。

第二步醫務人員進行留樣，將試子頭浸入細胞保存液中，折斷尾部後立即旋緊管蓋。

第三部要將樣本放入密閉袋中，保存好並及時送檢。

第四步將樣本送進實驗室，提取核酸。

第五步，將提取物進行熒光PCR擴增反應。

核酸是什麼

核酸(nucleicacid)，是一類由核苷酸(nucleotide)構成的生物大分子，分為核糖核酸(ribonucleic
acid，宴前者RNA)和脫氧核糖核酸(deoxyribonucleic
acid，DNA)兩類，其中RNA多為單鏈結構，DNA多為雙鏈結構。除朊病毒(prion)外，核酸是構成生命所必需的生物大分子，其主要作用是構成生命體的遺傳信息載體，除此之外，還有部分核酸可作為及參與構成具有生物活性的酶分子或晌薯其他分子機器
。

核酸檢測是什麼

核酸檢測顧名思義就是針對核酸開展檢測。

核酸檢測有何獨特的優勢呢?為何能作為新冠病毒確診的「金標准」呢?

其實每一種檢測方法都有其擅長的應用場景。以病毒檢測為例，通常的免疫學檢測方法(膠體金、ELISA、化學發光等)的檢測對象是病毒的抗原或抗體，相當於「側面描繪」。由於從感染到可檢測存在一個時間窗口期，因此免疫學檢測方法一般不合適作為早期診斷。

假陽性與假陰性

1、假陽性

假陽性通常比較少。一般實驗室人員操作不當會導致樣本間交叉污染或擴增產物的遺留污染，該種情況下可能會導致假陽性。

不過假陽性可以通過嚴格控制檢測流程、以及執行若干個陰性樣本隨機參與檢測的策略而有效規避。

2、假陰性

在這里需要說明的是，PCR檢測的假陰性與臨床的假陰性實際上不是一個概念。

以網路上激烈討論的新冠病毒的診斷為例，臨床假陰性是指臨床症狀和影像學高度疑似被感染、但PCR檢測卻多次或始終為陰性的情況;而PCR檢測假陰性是指所採集樣本中存在足夠量的新型冠狀病毒但卻沒有檢出悔簡的情況。

避免核酸檢測的假陰性，主要需要解決：(1)被感染者的細胞中有足量的病毒、(2)採集樣本中可以採集到含有病毒的細胞、以及(3)檢測出樣本中的病毒這三個環節。

其中PCR試劑盒的技術參數優劣主要影響第三個檢測環節。

僅針對第三個檢測環節，若樣本中病毒數量低於一個程度(低於最低檢測限)，PCR試劑盒就無法檢出。從這個角度看，PCR檢測的假陰性是無法完全避免的。這也是為何需要補充開發病毒的特異抗體檢測的原因所在。

沈陽PCR核酸檢測實驗室

實驗室建設堅持高標准、嚴要求，嚴格按照國家《醫學生物安全二級實驗室建築技術標准》進行建設，建設面積100餘平方米，分為試劑貯存和准備區、標本制備與提取區、擴增和產物分析區三個區域。實驗室內配置全自動核酸提取儀、實時熒光定量PCR儀、擴增儀、高壓滅菌器、B2型生物安全櫃、超凈工作台、超低溫冰箱等儀器，消毒和防護設施齊全，符合相關生物實驗室安全標准。為防止實驗室外的區域被污染，實驗室的氣壓均為負壓，有效降低感染風險。此外，實驗室配備了污水處理系統，達到了廢液的合理排放和處理。

*目前我國多地區建設了PCR核酸檢測實驗室用以進行新冠病毒核酸檢測

② 自己在家怎麼做核酸檢測

自己在家做核酸檢測的方法：

先買一個自測核酸檢測盒。

1、清潔雙手：在抗原檢測之前，應當對雙手進行嚴格消毒、清潔。然後檢查試劑盒的包裝是否完好、破損。

2、樣本採集：清理鼻腔，頭稍向後仰。手持鼻拭子的尾部從一側鼻孔進入，慢慢向鼻腔深入，在鼻腔內部至少旋轉4圈，然後在另一側鼻腔重復這一操作。

3、樣本提取：取樣後立即將鼻拭子放入取樣管內，用力旋轉拭子使其充分與處理液混合。

4、檢測：折斷處理瓶的蓋子，取出檢測卡，垂直倒置處理瓶，滴三滴液體到樣品孔中，等待十五分鍾。檢測卡C處顯色而T處未顯為陰性，若C處和T處均顯色為陽性，T刻度線一條杠代表檢測無效。

5、廢物處理：要將檢測物品裝入醫療密封袋內，按醫療廢物處置。

抗原檢測原理：

需要將相應的病毒蛋白抗原固定在膠體金或乳膠等載體上，如果樣本中含有病毒蛋白，這些蛋白會與載體上的抗體結合，從而使試紙變顏色。新型冠狀病毒抗原檢測通常用於急性感染期，陽性結果可用於疑似人群的早期轉移和快速管理，但不能作為診斷新型冠狀病毒感染的依據。

③ 核酸檢測的方式都有什麼

核酸檢測主要有酸檢測試劑、抗體檢測兩種方法，第一種方法通常是通過咽拭子進行PCR檢測，基因擴增，然後再進行核酸檢測。 而抗體檢測是選擇抽血，抽血的方法得出結果看，觀察其抗體滴度是否升高，這種情況常常是指在抽血前常出現不能產生抗體的情況。

核酸檢測是一種「進行時」檢測，通過聚合酶鏈反應等方法檢測病毒基因組中特定的核酸序列，從而判斷被檢測者此刻是否感染了病毒。

與核酸檢測不同，新冠病毒抗體檢測顯示的是哪些人曾經被感染。抗體檢測又被稱為血清學檢測，目的是檢測血液樣本中的抗體。人體感染病毒後，會產生IgM或IgG抗體。

被感染初期，人體會迅速產生IgM抗體，以抗感染；相比之下，產生IgG抗體的速度更慢，但IgG抗體保留時間更長。抗體檢測就是檢測血清中是否有這些特異性抗體，以確定被測試者是否曾被感染。

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六種人不宜做核酸檢測

一、釆樣前30分鍾，對於有吸煙、喝酒、嚼口香糖等人群不宜做核酸檢測，以免影響檢測的准確度。

二、進食太飽的人不宜做核酸檢測，否則容易發生惡心嘔吐，影響採用結果的准確性。

三、核酸檢測前有口服抗病毒和抗感染的葯物的，應推遲做核酸檢測，避免影響檢測結果。

四、若是進行鼻拭子采樣的話，對於鼻咽部有病症的急性期，如出血、水腫等人群可以暫不予檢測。

五、剛進行核酸檢測時出現惡心嘔吐的人，應暫緩做核酸檢測，需等檢測者緩解後再予以進行。

六、被采樣者用手或其他物品觸及拭子采樣冠、棉簽的前端的不宜進行，否則容易造成污染，影響檢測結果，需更換進行重做。

④ 核酸檢測方法

對於新型冠狀病毒的核酸檢測，首先根據試劑盒說明書」樣本要求「部分進行樣本採集，常規的樣本類型包括咽拭子、鼻拭子、痰液、支氣管灌洗液、肺泡灌洗液等。

獲得患者樣本後，需盡快進行檢測，如無法立即檢測需要轉運的樣本，應按照說明書的要求進行低溫封裝，並送到專門的檢測機構進行檢測。檢測機構收到樣本後，對樣本進行核酸提取，核酸提取試劑應使用批准產品說明書中指定的核酸提取試劑盒。

病毒RNA需要首先逆轉錄為cDNA，再進行擴增檢測。PCR擴增和檢測應使用批准產品說明書中指定的熒光定量PCR儀，通過熒光定量PCR所得到的樣本Ct值的大小，可以判斷患者樣本中是否含有新型冠狀病毒。

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核酸檢測原理

所有生物除朊病毒外都含有核酸，核酸包括脫氧核糖核酸（DNA）和核糖核酸（RNA），新型冠狀病毒是一種僅含有RNA的病毒，病毒中特異性RNA序列是區分該病毒與其它病原體的標志物。新型冠狀病毒出現後，我國科學家在極短的時間里完成了對新型冠狀病毒全基因組序列的解析。

並通過與其它物種的基因組序列對比，發現了新型冠狀病毒中的特異核酸序列。臨床實驗檢測過程中，如果能在患者樣本中檢測到新型冠狀病毒的特異核酸序列，應提示該患者可能被新型冠狀病毒感染