化妝品糞大腸菌群有幾種檢測方法

❶ 化妝品做質量檢測，應該有哪些步驟、准備哪些東西

化妝品做質量檢測需要准備好企業證明材料、樣品到當地的技術監督局，填寫技術監督局出具的表格。

之後將會按照以下質量檢驗的方法進行檢驗：

1.全數檢驗；

2.抽樣檢驗。

根據產品的不同特點和要求，質量檢驗的方式也各不相同：

1.按檢驗工作的順序分，有預先檢驗，中間檢驗和最後檢驗。

2.按檢驗地點不同，分為固定檢驗和流動檢驗。

3.按檢驗的預防性可分為首件檢驗和統計檢驗。

其目的在於，保證不合格的原材料不投產，不合格的零件不轉下工序，不合格的產品不出廠；並收集和積累反映質量狀況的數據資料，為測定和分析工序能力，監督工藝過程，改進質量提供信息。

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質量檢測的報告內容：

（1）原材料、外購件、外協件進廠驗收檢驗的情況和合格率指標；

（2）產品出廠檢驗的合格率、返修率、報廢率、降級率以及相應的金額損失；

（3）按車間和分小組的平均合格率、返修率、報廢率、相應的金額損失及排列圖分析；

（4）產品報廢原因的排列圖分析；

（5）不合格品的處理情況報告；

（6）重大質量問題的調查、分析和處理報告；

（7）改進質量的建議報告；

（8）檢驗人員工作情況報告。

報告的職能也就是信息反饋的職能。這是為了使高層管理者和有關質量管理部門及時掌握生產過程中的質量狀態，評價和分析質量體系的有效性。

為了能做出正確的質量決策，了解產品質量的變化情況，必須把檢驗結果，用報告形式，特別是計算所得的指標，反饋給管理決策部門和有關管理部門，以便做出正確的判斷和採取有效的決策措施。

❷ 化妝品致病菌檢測怎麼做

中科院中科檢測是化妝品備案檢測機構，化妝品致病菌檢測常見的有：耐熱大腸桿菌，銅綠假單胞菌、金黃色葡萄球菌

耐熱大腸桿菌檢測方法:

1.取 10mL 1：10 稀釋的檢液，加到 10mL 雙倍乳糖膽鹽（含中和劑）培養基中，置 44.5℃

±0.5℃培養箱中培養 24h，如既不產酸也不產氣，繼續培養至 48h，如仍既不產酸也不產

氣，則報告為耐熱大腸菌群陰性。

2. 如產酸產氣，劃線接種到伊紅美藍瓊脂平板上，置36℃±1℃培養18h—24h。同時取該

培養液 1—2 滴接種到蛋白腖水中，置 44.5℃±0.5℃培養 24h±2h。

經培養後，在上述平板上觀察有無典型菌落生長。耐熱大腸菌群在伊紅美藍瓊脂培養

基上的典型菌落呈深紫黑色，圓形，邊緣整齊，表面光滑濕潤，常具有金屬光澤。也有的

呈紫黑色，不帶或略帶金屬光澤，或粉紫色，中心較深的菌落，亦常為耐熱大腸菌群，應

注意挑選。

3. 挑取上述可疑菌落，塗片作革蘭氏染色鏡檢。

4. 在蛋白腖水培養液中，加入靛基質試劑約 0.5mL，觀察靛基質反應。陽性者液面呈玫

瑰紅色；陰性反應液面呈試劑本色。

銅綠假單胞菌檢測方法：

1.增菌培養：取 1:10 樣品稀釋液 10mL 加到 90mL SCDLP 液體培養基中，置 36℃±1℃培

養 18h—24h。如有銅綠假單胞菌生長，培養液表面多有一層薄菌膜，培養液常呈黃綠色或

藍綠色。

2. 分離培養：從培養液的薄膜處挑取培養物，劃線接種在十六烷三甲基溴化銨瓊脂平板

上，置 36℃±1℃培養 18h—24h。凡銅綠假單胞菌在此培養基上，其菌落扁平無定型，向周

邊擴散或略有蔓延，表面濕潤，菌落呈灰白色，菌落周圍培養基常擴散有水溶性色素。

在缺乏十六烷三甲基溴化銨瓊脂時也可用乙醯胺培養基進行分離，將菌液劃線接種於

平板上，置 36℃±1℃培養 24h±2h，銅綠假單胞菌在此培養基上生長良好，菌落扁平，邊緣

不整，菌落周圍培養基呈紅色，其他菌不生長。

3. 染色鏡檢：挑取可疑的菌落，塗片，革蘭氏染色，鏡檢為革蘭氏陰性者應進行氧化酶

試驗。

4. 氧化酶試驗：取一小塊潔凈的白色濾紙片置於滅菌平皿內，用無菌玻璃棒挑取銅綠假

單胞菌可疑菌落塗在濾紙片上，然後在其上滴加一滴新配製的 1%二甲基對苯二胺試液，在

15s—30s 之內，出現粉紅色或紫紅色時，為氧化酶試驗陽性；若培養物不變色，為氧化酶

試驗陰性。

5.綠膿菌素試驗：取可疑菌落 2 個—3 個，分別接種在綠膿菌素測定培養基上，置 36℃

±1℃培養 24h±2h，加入氯仿 3mL—5mL，充分振盪使培養物中的綠膿菌素溶解於氯仿液

內，待氯仿提取液呈藍色時，用吸管將氯仿移到另一試管中並加入 1mol/L 的鹽酸 1mL 左

右，振盪後，靜置片刻。如上層鹽酸液內出現粉紅色到紫紅色時為陽性，表示被檢物中有

綠膿菌素存在。

6 .硝酸鹽還原產氣試驗：挑取可疑的銅綠假單胞菌純培養物，接種在硝酸鹽腖水培養基

中，置 36℃±1℃培養 24h±2h，觀察結果。凡在硝酸鹽腖水培養基內的小倒管中有氣體者，

即為陽性，表明該菌能還原硝酸鹽，並將亞硝酸鹽分解產生氮氣。

7. 明膠液化試驗：取銅綠假單胞菌可疑菌落的純培養物，穿刺接種在明膠培養基內，置

36℃±1℃培養 24h±2h，取出放置於 4℃±2℃冰箱 10min—30min，如仍呈溶解狀或表面溶解

時即為明膠液化試驗陽性；如凝固不溶者為陰性。

8. 42℃生長試驗：挑取可疑的銅綠假單胞菌純培養物，接種在普通瓊脂斜面培養基上，

置於 42℃±1℃培養箱中，培養 24h—48h，銅綠假單胞菌能生長，為陽性，而近似的熒光假

單胞菌則不能生長。

金黃色葡萄球菌檢測方法：

1 增菌：取 1:10 稀釋的樣品 10mL 接種到 90mL SCDLP 液體培養基中，置 36℃±1℃培養

箱，培養 24h±2h。

註：如無此培養基也可用 7.5%氯化鈉肉湯。

2. 分離：自上述增菌培養液中，取 1—2 接種環，劃線接種在 Baird Parker 平板培養基，

如無此培養基也可劃線接種到血瓊脂平板，置 36℃±1℃培養 48h。在血瓊脂平板上菌落呈

金黃色，圓形，不透明，表面光滑，周圍有溶血圈。在 Baird Parker 平板培養基上為圓形，

光滑，凸起，濕潤，顏色呈灰色到黑色，邊緣為淡色，周圍為一混濁帶，在其外層有一透

明帶。用接種針接觸菌落似有奶油樹膠的軟度。偶然會遇到非脂肪溶解的類似菌落，但無

混濁帶及透明帶。挑取單個菌落分純在血瓊脂平板上，置 36℃±1℃培養 24h±2h。

3. 染色鏡檢：挑取分純菌落，塗片，進行革蘭氏染色，鏡檢。金黃色葡萄球菌為革蘭氏

陽性菌，排列成葡萄狀，無芽胞，無莢膜，致病性葡萄球菌，菌體較小，直徑約為 0.5mm —1mm。

4. 甘露醇發酵試驗：取上述分純菌落接種到甘露醇發酵培養基中，在培養基液面上加入

高度為 2mm—3mm 的滅菌液體石蠟，置 36℃±1℃培養 24h±2h，金黃色葡萄球菌應能發酵

甘露醇產酸。

5. 血漿凝固酶試驗：吸取1:4新鮮血漿0.5mL，置於滅菌小試管中，加入待檢菌24h±2h肉

湯培養物0.5mL。混勻，置36℃±1℃恆溫箱或恆溫水浴中，每半小時觀察一次，6h之內如呈

現凝塊即為陽性。同時以已知血漿凝固酶陽性和陰性菌株肉湯培養物及肉湯培養基各

0.5mL，分別加入無菌1:4血漿0.5mL，混勻，作為對照。

❸ 大腸桿菌檢測方法國標是用什麼方法檢測的

大腸桿菌檢測方法分為三種：

1、細菌分離鑒定法

分離培養與鑒定：糞便標本直接接種腸道桿菌選擇性培養基。血液先經肉湯增菌，然後轉種血瓊脂平板。其他標本同時接種血瓊脂平板和腸道桿菌選擇性培養基。

37℃孵育18～24小時後，觀察菌落塗片染色鏡檢。腸致病性大腸桿菌須先作血清學定型試驗。必要的時候檢定腸黴毒素。

2、衛生細菌學檢查法

大腸桿菌會不斷隨糞便排出體外，污染周圍環境水源、食品等。取樣檢查時，樣品中大腸桿菌越多，則表示樣品被糞便污染的越嚴重，表明樣品中存在腸道致病菌的可能性也就越大。

大腸菌數指數：指每立升中大腸菌群數，採用乳糖發酵法檢測。中國衛生標準是每1000ml飲水中不得超過3個大腸菌群，瓶裝汽水和果汁中每100ml大腸菌群不能超過5個。

3、全自動微生物定量分析儀（TEMPO）檢測法

全自動微生物定量分析（TEMPO）儀大腸桿菌群計數檢測有TEMPOTC和TEMPOCC兩種方法。

TEMPOTC的開發是為獲得NF ISO4832標准相當性能水平。

TEMPOCC法是TEMPO儀器上根據BAM方法專門用於24h計數食品中大腸桿菌群方法。

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大腸桿菌在生物技術中的應用

這些菌株由於失去了細胞壁等重要組分，所以在自然條件下已無法生長。甚至普通的清潔劑都可以輕易地殺滅這類菌株。即便由於操作不慎導致活菌從實驗室流出，也不易導致生化危機。

生物工程用的菌株基因組都被優化過，使之帶有不同基因型（例如β半乳糖苷酶缺陷型），可以更好的用於分子克隆實驗。

真核基因在大腸桿菌中表達，必須有合適的表達載體(Vector),常用載體：pBV220,pET系統。

目的基因在大腸桿菌中表達的情況：

大腸桿菌更適合原核基因的表達，外源基因表達產量與單位體積產量是正相相關的，外源基因拷貝數和表達 產物產量之間存在動態平衡，單個細胞的產量又與外源基因拷貝數，基因表達效率，表達產物的穩定性和細胞代謝負荷等因素有關。

❹ 糞大腸菌群的測定

糞大腸菌群

Fecal Coliforms
1 定義

本規范採用下列定義

糞大腸菌群（Fecal coliforms）系一群需氧及兼性厭氧革蘭氏陰性無芽胞桿菌，在44.5℃±0.5℃培養24h～48h能發酵乳糖產酸並產氣。

該菌直接來自糞便，是重要的衛生指示菌。

3 儀器

3.1 恆溫水浴箱或隔水式恆溫箱：44℃±0.5℃。

3.2 溫度計。

3.3 顯微鏡。

3.4 載玻片。

3.5 接種環。

3.6 電磁爐。

3.7 三角瓶，250mL。

3.8 試管：15×150mm。

3.9 小倒管。

3.10 pH計或pH試紙。

3.11 高壓滅菌器。

3.12 滅菌吸管，10mL、1mL。

3.13 滅菌平皿：直徑90mm。

4 培養基和試劑

4.1 雙倍乳糖膽鹽（含中和劑）培養基

成分：蛋白腖 40g

豬膽鹽 10g

乳糖 10g

0.4％溴甲酚紫水溶液 5mL

卵磷脂 2g

吐溫80 14g

蒸餾水 1000mL

製法：將卵磷脂、吐溫80溶解到少量蒸餾水中。將蛋白腖、膽鹽及乳糖溶解到其餘的蒸餾水中，加到一起混勻，調pH到7.4，加入0.4％溴甲酚紫水溶液，混勻，分裝試管（每支試管中加一個小倒管）。68.95kPa（115℃ 10 lb）20min滅菌。

4.2 伊紅美蘭（EMB）瓊脂

成分：蛋白腖 10g

乳糖 10g

磷酸氫二鉀 2g

瓊脂 20g

2％伊紅水溶液 20mL

0.5％美藍水溶液 13mL

蒸餾水 1000mL

製法：先將瓊脂加到900mL蒸餾水中，加熱溶解，然後加入磷酸氫二鉀蛋白腖，混勻，使之溶解。再以蒸餾水補足至1000mL。校正pH值為7.2～7.4，分裝於三角瓶內，103.43kPa（121℃ 15 lb）15min高壓滅菌備用。臨用時加入乳糖並加熱融化瓊脂。冷至60℃左右無菌操作加入滅菌的伊紅美藍溶液，搖勻。傾注平皿備用。

4.3 蛋白腖水（作靛基質試驗用）

成分：蛋白腖（或胰蛋白腖） 20g

氯化鈉 5g

蒸餾水 1000mL

製法：將上述成分加熱融化，調pH值為7.0～7.2，分裝小試管，103.43kPa（121℃ 15 lb）15min高壓滅菌。

4.4 靛基質試劑

柯凡克試劑：將5g對二甲氨基苯甲醛溶解於75mL戊醇中，然後緩慢加入濃鹽酸25mL。

試驗方法：接種細菌於蛋白腖水中，於44℃±0.5℃培養24h±2h。沿管壁加柯凡克試劑0.3mL～0.5mL，輕搖試管。陽性者於試劑層顯深玫瑰紅色。

註：蛋白腖應含有豐富的色氨酸，每批蛋白腖買來後，應先用已知菌種鑒定後方可使用。

4.5 革蘭氏染色液：

4.5.1 染液制備

4.5.1.1 結晶紫染色液：

結晶紫 1g

95％乙醇 20mL

1％草酸銨水溶液 80mL

將結晶紫溶於乙醇中，然後與草酸銨溶液混合。

4.5.1.2 革蘭氏碘液：

碘 1g

碘化鉀 2g

蒸餾水加至 300mL

將碘與碘化鉀先進行混合，加入蒸餾水少許，充分振搖，待完全溶解後，再加蒸餾水至300mL。

4.5.1.3 脫色液：95％乙醇。

4.5.1.4 復染液：

a 沙黃復染液：

沙黃 0.25g

95％乙醇 10mL

蒸餾水 90mL

將沙黃溶解於乙醇中，然後用蒸餾水稀釋。

b 稀石碳酸復紅液：稱取鹼性復紅10g，研細，加95％乙醇100mL，放置過夜，濾紙過濾。取該液10mL，加5％石碳酸水溶液90mL混合，即為石碳酸復紅液。再取此液10mL加水90mL，即為稀石碳酸復紅液。

4.5.2 染色法

4.5.2.1 將塗片在火焰上固定，滴加結晶紫染色液，染1min，水洗。

4.5.2.2 滴加革蘭氏碘液，作用1min，水洗。

4.5.2.3 滴加95％乙醇脫色，約30s，或將乙醇滴滿整個塗片，立即傾去，再用乙醇滴滿整個塗片，脫色10s，水洗。

4.5.2.4 滴加復染液，復染1min，水洗，待干，鏡檢。

4.5.3 染色結果

革蘭氏陽性菌呈紫色，革蘭氏陰性菌呈紅色。

註：如用1:10稀釋石碳酸復紅染色液作復染，復染時間僅需10s。

5 操作步驟

5.1 取10mL 1:10稀釋的檢液，加到10mL雙倍乳糖膽鹽（含中和劑）培養基中，置44℃±0.5℃培養箱中培養24h～48h，如不產酸也不產氣，則報告為糞大腸菌群陰性。

5.2 如產酸產氣，劃線接種到伊紅美藍瓊脂平板上，置36℃±1℃培養18h～24h。同時取該培養液1～2滴接種到蛋白腖水中，置44℃±0.5℃培養24h±2h。

經培養後，在上述平板上觀察有無典型菌落生長。糞大腸菌群在伊紅美藍瓊脂培養基上的典型菌落呈深紫黑色，圓形，邊緣整齊，表面光滑濕潤，常具有金屬光澤。也有的呈紫黑色，不帶或略帶金屬光澤，或粉紫色，中心較深的菌落，亦常為糞大腸菌群，應注意挑選。

5.3 挑取上述可疑菌落，塗片作革蘭氏染色鏡檢。

5.4 在蛋白腖水培養液中，加入靛基質試劑約0.5mL，觀察靛基質反應。陽性者液面呈玫瑰紅色；陰性反應液面呈試劑本色。

6 檢驗結果報告

根據發酵乳糖產酸產氣，平板上有典型菌落，並經證實為革蘭氏陰性短桿菌，靛基質試驗陽性，則可報告被檢樣品中檢出糞大腸菌群。

❺ 化妝品檢測是什麼

化妝品的檢測也包括感官檢驗，理化檢驗和微生物檢驗這幾項，日常的檢驗按照標准來進行就行了，每年進行兩次的外部送檢。