1. 熒光物含量測定方法的定量測定
熒光分析法的定量測定方法較多,可分為直接測定法和間接測定法兩類。
a.直接測定法:
利用熒光分析法對被分析物質進行濃度測定,最簡單的便是直接測定法。某些物質只要本身能發熒光,只須將含這類物質的樣品作適當的前處理或分離除去干擾物質,即可通過測量它的熒光強度來測定其濃度。具體方法有兩種。
1. 直接比較法:配製標准溶液的熒光強度Fx,已知標准溶液的濃度Cs,便可求得樣品中待測熒光物質的含量。
如果空白溶液的熒光強度調不到零,則必須從Fs和Fx值中扣除空白溶液的熒光強度F0,然後進行計算。
2. 標准曲線法:將已知含量的標准品經過和樣品同樣處理後,配成一系列標准溶液,測定其熒光強度,以熒光強度對熒光物質含量繪制標准曲線。再測定樣品溶液的熒光強度,由標准曲線便可求出樣品中待測熒光物質的含量。
為了使各次所繪制的標准曲線能重合一致,每次應以同一標准溶液對儀器進行校正。如果該溶液在紫外光照射下不夠穩定,則必須改用另一種穩定而熒光峰相近的標准溶液來進行校正。例如,測定維生素B1時,可用硫酸奎寧溶液作為基準校正儀器。
b、間接測定法:
有許多物質,它們本身不能發熒光,或者熒光量子產率很低,僅能顯現非常微弱的熒光,無法直接測定,這時可採用間接測定方法。
間接測定方法有以下幾種:
1.化學轉化法:通過化學反應將非熒光物質變為適合於測定的熒光物質。例如金屬與螯合劑反應生成具有熒光的螯合物。有機化合物可通過光化學反應、氧化還原、偶聯、縮合反等應,使它們轉化為熒光物質。
2.熒光猝滅法:這種方法是利用本身不發熒光的被分析物質能使某種熒光化合物的熒光猝滅的性質,通過測量熒光化合物熒光強度的下降,間接地測定該物質的濃度。
3.敏化發光法:對於很低濃度的分析物質,如果採用一般的熒s光測定方法,其熒光信號太弱而無法檢測,可使用一種物質(敏化劑)以吸收激發光,然後將激發光能傳遞給發熒光的分析物質,從而提高被分析物質測定的靈敏度。
2. 正確檢測熒光劑的方法
熒光劑(又稱增白劑、光學增白劑、熒光增白劑)檢測,這里提供一個簡單低成本的方法,可以使用365nm的紫外線小電筒照射(也可以是紫外線驗鈔機),如有發藍紫色熒光(一般為藍、紫,也有綠、紅,和原來的顏色對比發生變化,明顯鮮艷了很多並發亮,多照照幾個其他物品對比就知道了),則是含有熒光劑。這種電筒在TB上有賣,搜索(熒光劑檢測),不貴一般10-30多塊錢左右,還是比較實用的,紡織物、塑料製品、護膚品、紙張等(有的食品有特殊的熒光反應除外,比如大米的脂肪會有熒光反應)含有熒光劑都能照射出來。以後就注意檢測一下,特別是寶寶用的,或是貼身用品、護膚品。如果是三無產品確實有含熒光劑的風險。在日常生活中,接觸熒光劑的機會很多。只要不超過一定標准(上述方法只能檢測出是否含有熒光劑,不能檢查出是否超標),會給我們生活帶來不少好處。如果過量的與它接觸,會對人體造成傷害。提示:紫外線在不照射熒光物質下,是看不到的(如果有少量白光那是燈珠發出的部分可見光,並不是紫外線),如果反光能看到,說明被照射物體發生了熒光反應。紫外線對人體有害,避免直射人體和長時間使用。不懂的可以繼續問,望採納,謝謝。
3. 熒光檢測方法
熒光檢測是一種自然發光反應,通過熒光素酶與 ATP進行反應,可檢測人體細胞、細菌、黴菌、食物殘渣,在15秒鍾內得到反應結果。光照度通過專用設備進行測量,並以數字形式予以表示,在1975年首先被應用到食品工業中,在1985年在化妝品製造業中得到應用。
熒光定量:採用國際主流的熒光定量PCR技術,迅速提升技術水平。
結果穩定:檢測結果CV值與進口全自動PCR儀接近,具有自檢功能,避免錯誤數據的輸出。
封閉操作:全部檢測過程均為閉管操作,於反應管處檢測熒光,有效防止污染,解決PCR技術中最棘手之難題。
准確定量:滿足臨床對量化的需求,定量盪圍寬,可涵蓋大部分病原微生物,自動曲線擬合。
靈敏度高:利用光譜信號靈敏性的優勢,有效提高檢測靈敏度。
安全:全程無毒檢測。
操作簡便:省去後處理的煩瑣過程。
直接列印:直接列印結果,無須記錄大量數據。
升級版:FS1000有與電腦連接的數傳輸口,可以連接電腦,根據用戶需要提供先進分析軟體,全面分析實驗數據。(電腦和列印機選配件)
故障率低:維護非常簡單。
節約資源:可利用現用PCR擴增儀,最大限度節約資源。
4. 熒光pcr法是什麼
一種在DNA擴增反應中,以熒光化學物質測每次聚合酶鏈式反應(PCR)循環後產物總量的方法。通過內參或者外參法對待測樣品中的特定DNA序列進行定量分析的方法。
Real-timePCR是在PCR擴增過程中,通過熒光信號,對PCR進程進行實時檢測。由於在PCR擴增的指數時期,模板的Ct值和該模板的起始拷貝數存在線性關系,所以成為定量的依據。
技術原理
將標記有熒光素的Taqman探針與模板DNA混合後,完成高溫變性,低溫復性,適溫延伸的熱循環,並遵守聚合酶鏈反應規律,與模板DNA互補配對的Taqman探針被切斷,熒光素游離於反應體系中。
在特定光激發下發出熒光,隨著循環次數的增加,被擴增的目的基因片段呈指數規律增長,通過實時檢測與之對應的隨擴增而變化熒光信號強度,求得Ct值,同時利用數個已知模板濃度的標准品作對照,即可得出待測標本目的基因的拷貝數。
5. 熒游標記法是什麼
熒光物標記法,神經纖維的末梢可以吸收很多熒光化合物或熒光染料,經軸突逆向運輸到細胞體內,從而建立逆行熒游標記法。
例如:Kuypers等(1977)用這種方法在熒光顯微鏡下根據所用熒光物標記物特有的波長顯示吸收熒光物的神經細胞。
相關信息:
熒游標記所依賴的化合物稱為熒光物質。熒光物質是指具有共軛雙鍵體系化學結構的化合物,受到紫外光或藍紫光照射時,可激發成為激發態,當從激發態恢復基態時,發出熒光。
熒游標記技術指利用熒光物質共價結合或物理吸附在所要研究分子的某個基團上,利用它的熒光特性來提供被研究對象的信息。熒游標記的無放射物污染,操作簡便等優點,使得熒游標記物在許多研究領域的應用日趨廣泛。
6. 如何檢測熒光劑
1、紫光燈照射。
2、驗鈔機檢測。
3、手機檢測。
4、濾紙。
5、專業的檢測機構檢測。
7. 如何測定一種有機化合物是否具有熒光性質
如果化合物有紫外吸收,應該有熒光性質。
常溫物質經紫外線或X射線照射,吸收光能後進入激發態,並且立即退激發並發出比入射光的的波長長的出射光即熒光。。
熒光光譜有兩個主要優點:第一是靈敏度高.由於熒光輻射的波長比激發光波長長,因此測量到的熒光頻率與入射光的頻率不同.另外,由於熒光光譜是發射光譜,可以在與入射光成直角的方向上檢測,這樣,熒光不受來自激發光的本底的干擾,靈敏度大大高於紫外-可見吸收光譜,測量用的樣品量很少,且測量方法簡便.第二,熒光光譜能提供較多的信息,例如激發譜,發射譜,峰位,峰強度,熒光壽命。