瘧疾檢測方法

❶ 對於寄生蟲病的診斷，大家有多少了解的，請選擇一種你們比較熟悉的，說一說

舉例我國新五大寄生蟲中的血吸蟲和瘧原蟲

血吸蟲：

1 .病原學診斷

（1）糞檢 直接塗片法（對急性期病人）、尼龍篩集卵法、加藤厚塗片透明法（Kato』s thick smear）、集卵毛蚴孵化法+沉渣鏡檢

（2）腸鏡活組織檢查蟲卵 慢性和晚期病人腸壁增 厚、蟲卵排出受阻，糞便中不易查獲蟲卵。

2.免疫學診斷：免疫學方法診斷血吸蟲病，具有重要的輔助診斷價值

⑴皮內試驗（intradermal test，idt）：一般皮內試驗與糞檢蟲卵陽性的符合率為90%左右，易出現假陽性或假陰性反應，與其他吸蟲病可產生較高的交叉反應；並且病人治癒後多年仍可為陽性反應。此法簡便、快速、通常用於現場篩選可疑病例

⑵檢測抗體 （迄今為止，防治現場和臨床常以查特異性抗體為主。）方法有：

1）特有的方法：環卵沉澱試驗、尾蚴膜反應

2）最常用的方法：快速ELISA法，常規ELISA的改良，快速、敏感。已廣泛應用於臨床、現場多年

3）最簡便方法：快速簡便的試紙條法（Dip-stick)，可用於家庭自我檢測。

在國外，已廣泛用於S.m診斷。國內對血吸蟲病診斷研製成功。

⑶檢測循環抗原：

抗體檢測不能區分現症感染和既往感染，也不易於評價療效。循環抗原是生活蟲體排放至宿體內的大分子微粒，主要是蟲體排泄、分泌或表皮脫落物中具有抗原特性，又可為血清免疫學試驗所檢出。cag的檢測有其自身的優越性，能反映活動性感染，可以評價療效和估計蟲荷。

3類游離循環抗原，即腸相關抗原（gaa）、膜相關抗原（maa）和可溶性蟲卵抗原（sea）。在檢測方法上，採用檢測不同靶cag的探針，包括抗血吸蟲抗原不同表位──單克隆抗體、組合單克隆抗體以及多克隆抗體等。方法：斑點ELISA（dot-elisa），雙抗體夾心ELISA

瘧原蟲：

1. 病原檢查

（1）血膜染色鏡檢：取外周血製作厚、薄血膜-姬氏或瑞氏染劑染色-鏡檢

（2） 選擇適宜的采血時間：惡性瘧在發作前半小時至發作時；間日瘧在發作後數小時至10餘小時

2.免疫學診斷

（1）循環抗體檢測：主要用於瘧疾的流行病學調查、防治效果 評估及輸血對象的篩選。

方法： 間接熒光抗體試驗 、間接血凝試驗、酶聯免疫吸附試驗（ELISA）

（2）循環抗原檢測：是否有活動感染。方法: 放射免疫試驗、抑製法ELISA、夾心法ELISA

3.分子生物學技術：

（1）聚合酶鏈反應（PCR）具有敏感性高、操作簡便、套式PCR系統

（2）核酸探針：用於惡性瘧原蟲的檢測，具有敏感性高（0.0001％的原蟲密度）

（3）環介導等溫擴增（LAMP）

❷ 瘧疾的診斷

1.流行病學
有在瘧疾流行區居住或旅行史，近年有瘧疾發作史或近期曾接受過輸血的發熱患者都應被懷疑。
2.臨床表現
典型的周期性寒戰、發熱、出汗可初步診斷。不規律發熱，而伴脾、肝腫大及貧血，應想到瘧疾的可能。凶險型多發生在流行期中，多急起，高熱寒戰，昏迷與抽搐等。流行區嬰幼兒突然高熱、寒戰、昏迷，也應考慮本病。
3.實驗室檢查
主要是查找瘧原蟲，通常找到即可確診。血片找瘧原蟲應當在寒戰發作時采血，此時原蟲數多、易找。需要時應多次重復查找。並一定要做厚血片尋找。如臨床高度懷疑而血片多次陰性可做骨髓穿刺塗片查找瘧原蟲。
4.分子生物學技術診斷法
（1）聚合酶鏈反應（PCR）檢測檢測的靈敏性和特異性均較高。PCR檢測方法已在原來的基礎上發展成多種方法，如巢式PCR、反轉錄酶PCR、PCR-ELISA等。除可以直接檢測血樣中的瘧原蟲外，還可以檢測濾紙干血滴上的瘧原蟲。已從檢測惡性瘧原蟲發展到檢測間日瘧原蟲。
（2）DNA探針檢測DNA探針檢測具有良好的特異性和穩定性。
5.治療性診斷
臨床表現很象瘧疾，但經多次檢查未找到瘧原蟲。可試用殺滅紅內期原蟲的葯物（如氯喹），治療48小時發熱控制者，可能為瘧疾。但注意耐氯喹蟲株。