❶ 乳酸、丙酮酸和乙酸如何鑒定
丙酮酸檢測試劑盒可測各種動物血清(漿)、組織以及培養細胞、細胞培養上清液等樣本中丙酮酸含量。丙酮酸與顯色劑反應,反應產物在鹼性溶液中顯紅棕色,顏色深淺與丙酮酸含量成正比,通過比色可以測定出丙酮酸的含量。
原理:丙酮酸鹽檢測試劑盒提供了一種簡單、直接和可自動化操作的程序來測量不同生物學標本中丙酮酸的含量。適用標本類型包括:食物、細胞、培養基和發酵培養基。丙酮酸鹽檢測試劑盒基本原理如下:丙酮酸鹽被丙酮酸酶氧化,在酶反應過程中產生顏色(λ=570 nm)或者熒光(Ex/Em=535/587 nm),可使用酶標儀或熒光計檢測到。光的強度與丙酮酸含量是成正比的,因此通過檢測光的強度即可精確的得到丙酮酸的含量。試劑盒檢測范圍為1-10 uM丙酮酸。
丙酮酸檢測試劑盒
丙酮酸分子式CH3COCOOH,原稱焦性葡萄酸(德Brenztr-aubensure),是參與整個生物體基本代謝的中間產物之一。丙酮酸可通過乙醯CoA和三羧酸循環實現體內糖、脂肪和氨基酸間的互相轉化,因此,丙酮酸在三大營養物質的代謝聯系中起著重要的樞紐作用。
丙酮酸是糖無氧代謝的產物,研究工作者將丙酮酸和乳酸一同測定,並用二者的比值推測循環衰竭的嚴重程度;此外,它還對維生素B1缺乏有一定的研究意義,同時作為一種重要的精細化工中間體,廣泛應用於醫葯、農葯、食品等領域,尤其是作為醫葯中間體,具有良好的發展前景。
應用[4][5]
用於大腸桿菌丙酮酸代謝途徑改造及丙酮酸高產菌株培育
丙酮酸作為最重要有機酸之一,在醫葯、食品、化工等領域以及科學研究中都具有廣泛的用途。目前高質量的丙酮酸在國內市場缺口較大,丙酮酸工業化生產的前景十分廣闊。
從野生型大腸桿菌K-12 MG1655菌株出發,利用CRISPR/Cas9技術敲除了乳酸脫氫酶基因(ldh A),截斷了乳酸合成途徑;敲除了丙酮酸氧化酶基因(pox B)、磷酸轉乙醯基酶基因(pta)和乙酸激酶基因(ack A),截斷了乙酸合成途徑;敲除了丙酮酸-甲酸裂解酶基因(pfl B),截斷了甲酸合成途徑;敲除了磷酸烯醇丙酮酸合成酶基因(pps A),減少了丙酮酸生成磷酸烯醇式丙酮酸;敲除了磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶基因(ppc),減少了磷酸烯醇式丙酮酸的消耗;通過敲除延胡索酸還原酶復合體基因(frd BC),削弱了三羧酸循環途徑。最後得到了一株可以初步積累丙酮酸的基因工程改造菌株MG1655-GP7(E.coli K-12 MG1655Δldh AΔpfl BΔack AΔptaΔpox BΔppcΔfrd BCΔpps A),這株菌在使用5 L發酵罐發酵68小時後丙酮酸產量達到32.07 g/L。
這表明只利用基因工程的手段是可以使大腸桿菌積累丙酮酸的。大腸桿菌利用葡萄糖作為碳源時,葡萄糖經糖酵解途徑會產生過量的ATP與NADH從而抑制丙酮酸的積累,使用氧化程度較高的葡萄糖酸作為碳源可解決此問題;當葡萄糖進入細胞後不經EMP途徑而是進入Entner-Doudoroff(ED)途徑,產生的ATP與NADH的量只有前者的一半,會相應的促進丙酮酸的積累。為了進一步提高產量,作者又敲除磷酸葡萄糖異構酶基因(pgi)以抑製糖酵解途徑;同時敲除6-磷酸葡萄糖酸脫氫酶基因(gnd)以抑制磷酸戊糖途徑,並減少6-磷酸-葡萄糖酸的消耗;還在敲除磷酸葡萄糖轉移酶基因(pts G)和磷酸烯醇丙酮酸葡萄糖轉移酶基因(pts I)的基礎上敲入運動發酵單胞菌中葡萄糖轉運蛋白基因(glf)來改良葡萄糖轉運系統,減少大腸桿菌細胞轉運葡萄糖時磷酸烯醇式丙酮酸的消耗。
並計劃上調葡萄糖-6-磷酸脫氫酶基因(zwf)、葡萄糖酸-6-磷酸脫水酶基因(edd)和2-酮-3-脫氧葡萄糖酸-6-磷酸醛縮酶基因(eda)的表達以強化ED途徑,平衡ATP和NADH的水平,引導碳流更多的流向丙酮酸合成方向。
目前通過基因編輯的方法得到了一株生產丙酮酸能力理論上較MG1655-GP7菌株有所提高的MG1655-GP12(E.coli K-12 MG1655Δldh AΔpfl BΔack AΔptaΔpox BΔppcΔfrd BCΔpps AΔgndΔpgiΔpts GΔpts I::glf)菌株,該菌株的生產能力正在評估中。但經多次基因改造後,基因工程菌株MG1655-GP12出現了較野生型菌株生長緩慢的現象,本實驗對該菌株進行了實驗室適應性進化,經多次傳代後篩選到一株生長速度恢復到野生型菌株75%的MG1655-GP12-1菌株。
❷ 有機化學鑒定題 丙酮酸,丙氨酸,丙酸,草酸的鑒別
1、加銀氨溶液,丙酮酸產生銀鏡,其他無.
2、加茚三酮,丙氨酸顯色,其他無.
3、加高錳酸鉀,草酸能使其退色,丙酸不行.
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全部鑒別完畢
❸ 如何鑒別丙酮 丙酸 丙酮酸
一、熔點不同
1、丙酮:熔點為−94.9℃(178.2 K)。
2、丙酸:熔點為-21.5。
3、丙酮酸:熔點為11.8℃。
二、性質不同
1、丙酮:易溶於水和甲醇、乙醇、乙醚、氯仿、吡啶等有機溶劑。易燃、易揮發,化學性質較活潑。
2、丙酸:純丙酸是無色、有腐蝕性的液體,有刺激性氣味。
3、丙酮酸:淺黃色至黃色的透明液體。有醋酸氣味。有酸味。天然品存在於薄荷及蔗糖發酵液中;加熱時緩慢聚合,富有反應性,容易與氮化物、醛、鹵化物、磷化物等反應,參與生物體的糖代謝、膠質、氨基酸、蛋白質等的生化合成、代謝、醇的發酵等。
三、作用不同
1、丙酮:主要作為溶劑用於炸葯、塑料、橡膠、纖維、製革、油脂、噴漆等行業中,也可作為合成烯酮、醋酐、碘仿、聚異戊二烯橡膠、甲基丙烯酸甲酯、氯仿、環氧樹脂等物質的重要原料。也常常被不法分子做毒品的原料溴代苯丙酮。
2、丙酸:主要用作食品防腐劑和防霉劑,也可用作啤酒等中黏性物質抑制劑,硝酸纖維素溶劑和增塑劑,還可用於鍍鎳溶液的配製、食品香料的配製以及醫葯、農葯、防霉劑等的製造。
3、丙酮酸:作為一種基本化工原料廣泛應用於化學、制葯、食品、農業及環保等各個領域中,可通過化學合成和生物技術多種方法制備。