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紫薯中氨基酸檢測方法及原理

發布時間:2023-10-02 23:13:39

㈠ 測定氨基酸序列的氨肽酶法 羧肽酶法的原理是什麼

氨基酸測序分為N端測序和C端測序,原理是用氨肽酶(N端測序法)或羧肽酶(C端測序法)將肽鏈從一端依次切下,並在一段時間內檢測切下的氨基酸的種類(時間過長則會出現多種氨基酸),並且重復該過程。

㈡ 氨基酸的定性鑒定原理

實驗原理:

紙層析法(paper chromatography)是生物化學上分離、鑒定氨基酸混合物的常用技術,可用於蛋白質的氨基酸成分的定性鑒定和定量測定。

紙層析法又稱紙色譜法,是用濾紙為支持物,所用展層溶劑大多由水和有機溶劑組成,濾紙纖維與水的親和力強,與有機溶劑的親和力弱,因此在展層時,紙纖維上吸附的水分是固定相,有機溶劑是流動相。溶劑由下向上移動的,稱上行法;由上向下移動的,稱下行法。將樣品點在濾紙上(此點稱為原點),進行展層,樣品中的各種氨基酸在兩相溶劑中不斷進行分配。

由於它們的分配系數不同,不同氨基酸隨流動相移動的速率就不同,於是就將這些氨基酸分離開來,形成距原點距離不等的層析點。


引申:

氨基酸的定性鑒別:紫外吸收光譜法

精密稱取酪氨酸、色氨酸、苯內氨酸各適量,分別用水製成1ml含20μg(色氨酸)、40μg(酪氨酸)、200μg(苯丙氨酸),在波長230~300nm測定各氨基酸的吸收光譜。 在20種天然氨基酸中,只有酪氨酸、色氨酸和苯內氨酸,在紫外區最大吸收,酪氨酸的最大吸收峰的波長275nm處,色氨酸的最大吸收峰在波長280nm處,同時在波長288nm處有一個肩峰,苯丙氨酸最大的吸收峰在波長258nm處,同時在257nm和264nm處有兩個較小的吸收峰。由此可見,這三種氨基酸可以通過紫外吸收光譜加以鑒別。

㈢ 列舉三種氨基酸的定量分析方法,說明其工作原理。

就給你找到兩種,將就著看吧..你找到了另一種,再告訴我一下
1、化學分析法——甲醛滴定法
甲醛滴定法用於氨基氮的測定, 可以測出樣品中總氨基酸的含量,其原理是在中性或弱鹼性水溶液中,氨基酸的α—氨基與醛類反應生Schiff鹼:α—氨基酸與甲醛反應生成亞甲基亞氨基衍生物
2、分光光度法——茚三酮法
茚三酮是一種能使氨基酸生成在可見光區有吸收的衍生試劑。該方法的基本原理是經陽離子交換柱分離出的氨基酸與茚三酮混合,經加熱反應後,一級胺與之生成藍紫色化合物,二級胺與之生成黃色化合物。兩種衍生物使用雙通道紫外檢測器同步檢測,檢測波長分別為570nm 和436nm。

㈣ 食品中氨基酸的測定,有簡單方法

氨基酸(amino acids):含有氨基和羧基的一類有機化合物的通稱。生物功能大分子蛋白質的基本組成單位,是構成動物營養所需蛋白質的基本物質。是含有一個鹼性氨基和一個酸性羧基的有機化合物,氨基一般連在α-碳上。
氨基酸的結構通式:構成蛋白質的氨基酸都是一類含有羧基並在與羧基相連的碳原子下連有氨基的喚轎賣有機化合物,目前自然界中尚未發現蛋白質中有氨基和羧基不連在同一個碳原子上的氨基酸。
其理化特性大致有:

1)都是無色結晶。熔點約在230°C以上,大多沒有確切的熔點,熔融時分解並放出CO2;都能溶於強酸和強鹼溶液中,除胱氨酸、酪氨酸、二碘甲狀腺素外,均溶於水;除脯氨酸和羥脯氨酸外,均難溶於乙醇和乙醚。

2)有鹼性[二元氨基一元羧酸,例如賴氨酸(lysine)];酸性[一元氨基二元羧酸,例如谷氨酸(Glutamic acid)];中性[一元氨基一元羧酸,例如丙氨酸(Alanine)]三種類型。大多數氨基酸都呈顯不同程度的酸性或鹼性,呈顯中性的較少。所以既能與酸結合成鹽,也能與鹼結合成鹽。

3)由於有不對稱的碳原子,呈旋光性。同時由於空間的排列位置不同,又有兩種構型:D型和L型,組成蛋白質的氨基酸,都屬L型。 由於以前氨基酸來源於蛋白質水解(現在大多為人工合成),而蛋白質水解所得的氨基酸均為α-氨基酸,所以在生化研究方面氨基酸通常指α-氨基酸。至於β、γ、δ……ω等的氨基酸在生化研究中用途較小,大都用於有機合成、石油化工、醫療等方面。氨基酸及其 衍生物品種很多,大多性質穩定,要避光、乾燥貯存。
1、茚三酮反應 (ninhydrin reaction)


ninhydrin reaction
在加熱條件下,氨基酸或肽與茚三酮反應生成紫色(與脯氨酸反應生成紅色)化合物的反應。
茚三酮反應,即:所有氨基酸及具有游離α-氨基的肽與茚三酮反應都產生藍紫色物質,只有脯氨酸和羥脯氨酸與茚三酮反應產生黃色物質。
此反應十分靈敏,根據和逗反應所生成的藍紫色的深淺,在570nm波長下進行比色就可測定樣品中氨基酸的含量,也可以在分離氨基酸時作為顯色劑對氨基酸進行定性或定量分析。在法醫學上,使用茚三酮反應可採集嫌疑犯在犯罪現場留下來的指紋。因為手汗中含有多種氨基酸,遇茚三酮後起顯色反應。

2、坂口反應 (Sakaguchi reaction)

坂口反應;Sakaguchi reaction
本法廣帆巧泛用於精氨酸的分析與測定。精氨酸與α-萘酚在鹼性次溴酸鈉(或次溴酸鉀)中發生反應,得到如左式的紅色產物:當用茚三酮方法發現可能有精氨酸時,可用此法檢測確證。單取代的胍基衍生物如章魚肉鹼、胍基乙酸等對此反應敏感,顯示正反應。該反應可用於精氨酸的定性和定量測定。

3、米隆反應

HgNO3+HNO3+熱 紅色 (檢驗酚基 酪氨酸有此反應)

4、Folin-Ciocalteau反應

磷鎢酸-磷鉗酸 藍色 (檢驗酚基 酪氨酸有此反應)

5、黃蛋白反應

濃硝酸煮沸 黃色 (檢驗苯環 酪氨酸、苯丙氨酸、色氨酸有此反應)

6、Hopkin-Cole反應(乙醛酸反應)

乙醛酸+濃硫酸 乙醛與濃硫酸接觸面處產生紫紅色環 (檢驗吲哚基 色氨酸有此反應)

7、Ehrlich反應

P-二甲氨基苯甲醛+濃鹽酸 藍色 (檢驗吲哚基 色氨酸有此反應)

8、硝普鹽試驗

Na2(NO)Fe(CN)2*2H2O+稀氨水 紅色 (檢驗巰基 半胱氨酸有此反應)

9、Sulliwan反應

1,2萘醌、4磺酸鈉+Na2SO3 紅色 (檢驗巰基 半胱氨酸有此反應)

10、Folin反應

1,2萘醌、4磺酸鈉在鹼性溶液 深紅色 (檢驗α-氨基酸)

據我了解 武漢武達生物科技用頭發提取氨基酸技術生產的胱氨酸、亮氨酸、酪氨酸等系列產品,是世界公認的綠色生化製品,因此,可以說全球80%以上的氨基酸市場是屬於我們的,這就給我們提供了一個極好的發展空間。

㈤ 氨基酸的檢測方法哪些

1. 分光光度法氨基酸檢測:主要是利用氨基酸與衍生劑發生化學反應,產生藍紫色化合物,該化合物在某一波長處有最大吸收峰,根據吸收值大小得到氨基酸含量。常用的衍生劑為茚三酮。
2. 毛細管電泳法氨基酸檢測:根據分離原理的不同,可分為毛細管區帶電泳、毛細管凝膠電泳、毛細管等電電泳、毛細管等速電泳以及膠束電動力學毛細管電泳。其中,毛細管區帶電泳和膠束電動力學毛細管電泳可用於氨基酸檢測。
3. 近紅外光譜法氨基酸檢測:利用有機化合物的含氫基團在特定波長區域躍遷,產生光譜的變化,結合統計學方法間接地實現氨基酸的定量檢測。
4. 氣相色譜法氨基酸檢測:將氨基酸衍生化處理變為容易氣化的物質,根據氣態樣品中各組分在流動相和固定相中的分配系數的不同,實現對氨基酸的定量分析。
5. 高效液相色譜法氨基酸檢測:是最常用的一種氨基酸檢測方法。由於大多數氨基酸本身沒有紫外吸收和熒光反應,因此需要對樣品進行衍生化處理將其轉化為有紫外吸收和發射熒光的物質,衍生可分為柱前衍生和柱後衍生。

㈥ 檢驗氨基酸用什麼方法

1.茚三酮反應,氨基酸與其發生反應縮合成藍色物質。除開脯氨酸和羥脯氨酸,他們與其反應生成黃色衍生物。
2.桑格反應,氨基酸與其反應會生成黃色的2,4-二硝基氨基酸,可以用於鑒定多肽或蛋白質的N端氨基酸。
3.艾德曼反應(DNFB反應),即氨基酸與苯異硫氰酸反應生成相應的苯氨基硫甲醯氨基酸。

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