血漿載脂蛋白的檢測的方法是

⑴ 脂蛋白代謝的生物化學檢驗

脂蛋白代謝的生物化學檢驗

脂蛋白代謝的生物化學檢驗知識你了解嗎?你知道應該如何對脂蛋白代謝進行化學檢驗嗎?下面是我為大家帶來的脂蛋白代謝的生物化學檢驗的知識，歡迎閱讀。

一、血漿脂質測定

(一)總膽固醇(TC)

是血液中各脂蛋白所含膽固醇之總和，分為酯化型膽固醇(CE)和游離型膽固醇(FC)， 其中CE佔60%～70%， FC佔30%～40%，兩種類型的比例在健康個體或個體之間是恆定的。

【測定方法】目前常規應用酶法測定，快速准確。

【參考范圍】 2007年《中國成人血脂異常防治指南》規定成人TC水平：

①在5.18mmol/L(200mg/dl)以下為合適范圍;②在5.18～6.19mmol/L(200～239mg/dl)范圍屬於邊緣升高;③在6.22mmol/L(240mg/dl)以上為TC升高。

【臨床意義】

1、TC濃度增高，冠心病等心血管疾病發生的危險性增高。影響TC水平的因素：

①年齡與性別：新生兒TC很低，哺乳後很快接近成人水平，之後常隨年齡而上升，但到70歲後不再上升甚或有所下降。中青年期女性低於男性，女性絕經後TC水平較同年齡男性高。

②飲食習慣：長期高膽固醇、高飽和脂肪酸攝入可造成TC升高。

③種族：黑人的總膽固醇水平要高於白人。

④遺傳因素。

2、TC並不是越低越好，研究顯示：①TC水平降低時增加心衰時的死亡率，而增高時可增加生存率;②在冠心病中，低血總膽固醇會增加死亡率;③TC水平升高可能可以防止痴呆。

(二)總脂質

主要包括FC、CE、PL和TG等。所採用的測定方法不同，正常參考值有一定的差異

【測定方法】 脂質抽提法和直接測定法

【參考范圍】成人4.0～7.5g/L;兒童3.0～6.0 g/L。

【臨床意義】

1、升高：高脂血症、動脈粥樣硬化、糖尿病、糖原貯積病、腎小球腎炎、腎病綜合征、甲狀腺功能減退、高血壓等。

2、降低：甲狀腺功能亢進症、急性肝炎、肝硬化、惡病質、吸收不良綜合征等。

二、甘油三酯(TG)

構成脂肪組織，參與TC、CE合成及血栓形成。

【測定方法】 建議酶法(如GPO-PAP法)作為臨床實驗室測定血清TG的'常規方法。

【參考范圍】目前《中國成人血脂異常防治指南》仍沿用1997年《血脂異常防治建議》的標准規定我國成人TG水平：①在1.7mmol/L(150mg/dl)以下為合適范圍;②1.7～2.25mmol/L(150～199mg/dl)為邊緣升高;③2.26mmol/L(200mg/dl)以上為升高。

【臨床意義】

1.生理性改變： TG受生活條件和飲食方式、年齡、性別等因素影響。如高脂肪飲食後TG升高;運動不足、肥胖可使TG升高。成年後隨年齡增大TG水平上升(中青年時，男性高於女性，50隨後反之)。人群中血清TG水平呈明顯的正偏態分布。

2.病理性改變： 輕至中度升高者，即2.26~5.63mmol/L(200~500 mg/dl)，患冠心病的風險增加。重度升高者，即≥5.63mmol/L(500mg/dl)時，常可伴發急性胰腺炎。

3.低TG血症：是指TG≤0.56mmol/L。原發性者見於無/低 β脂蛋白血症，為遺傳性疾病;繼發性者見於繼發性脂質代謝異常，如消化道疾病(肝病、吸收不良綜合征)內分泌疾病(甲亢、慢性腎上腺皮質功能不全)、癌症晚期、惡病質及葯物的應用(如肝素等)。

三、血漿脂蛋白測定

(一)高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)

高密度脂蛋白是血清中顆粒最小密度最大的一組脂蛋白,被視為人體內具有抗動脈粥樣硬化的脂蛋白，同時大量的流行病資料表明，血清HDL-C水平與冠心病發病成負相關,因而HDL-C被稱為“好的膽固醇”。

【測定方法】直接測定法。

【參考范圍】

①合適范圍為>1.04mmol/L(40mg/dl)，

②1.55mmol/L(60mg/dl)以上為升高，

③1.04mmol/L(40mg/dl)以下為降低。

【臨床意義】隨著HDL-C水平降低，缺血性心血管病發病危險增加，HDL-C<1.04mmol/L的人群與HDL-C≥1.55mmol/L的人群相比，缺血性心血管病危險增加50%。

(二)低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)

【原理】參考方法為超速離心法。

可供選擇的方法：表面活性劑清除法(SUR法)，過氧化氫酶清除法(CAT法)，杯芳烴法(CAL法)，可溶性反應法(SOL法)和保護性試劑法(PRO法)

【參考范圍】

①合適范圍為<3.37mmol/L(130mg/dl)，

②邊緣升高(危險閾值)為3.37~4.12mmol/L(130mg/dl~159mg/dl)，

③升高為>4.14mmol/L(160mg/dl)。

NCEP ATP Ⅲ：高脂血症患者血LDL-C的治療目標值定為2.6mmol/L(100mg/dl)以下。

【臨床意義】LDL-C水平與缺血性心血管病發生相對危險及絕對危險上升趨勢及程度與TC相似。

LDL-C水平增高見於家族性高膽固醇血症(TC增高，LDL-C增高，伴有HDL-C減低)，Ⅱa型高脂蛋白血症(TC增高，LDL-C增高，TG正常或輕度增高)。

(三)脂蛋白(a)，即Lp(a)

【測定方法】 免疫濁度法和ELISA

【參考范圍】 健康成人血清Lp(a)<300mg/L。

【臨床意義】

1、生理性改變：一般認為Lp(a)對同一個體相當恆定，但個體間差異很大，波動范圍在0～1.0mg/L。Lp(a)水平高低主要有遺傳因素決定，基本不受性別、年齡、飲食、營養和環境影響;

2、病理性增高：缺血性心腦血管疾病 、心肌梗死、外科手術 、急性創傷、急性炎症 、糖尿病腎病等

3、病理性減低：肝臟疾病(慢性肝炎除外)

(四)血清載脂蛋白AⅠ和B100

【參考范圍】

ApoAⅠ：1.00 g/L～1.50g/L。ApoB100：0.50 g/L～1.10g/L。

ApoAⅠ/ApoB100：1.0~2.0。

【臨床意義】

1、血清ApoAⅠ主要存在於HDL中，一般情況下，它可反映HDL的水平，與HDL-C呈明顯正相關，其臨床意義與HDL-C基本相同。

2、ApoB100主要存在於LDL中，其含量主要代表LDL水平，與LDL-C成顯著正相關，其臨床意義與LDL-C基本相同。

3、臨床上常將Apo AⅠ/Apo B100﹤1.0作為冠心病的危險指標。

此外，研究發現：

1、TC/HDL-C比值比非HDL-C更能預示冠心病的危險。

2、TG/HDL-C比值有效測量血脂異常、高血壓和代謝綜合征

3、TC/HDL-C、TG / HDL-C、Apo B / Apo A-I、LDL-C/HDL-C比值可能比單項血脂檢測更具臨床意義，而Apo B/Apo A-I可能是其中最具說服力的指標。

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⑵ 血脂檢查的測定方法

醫院中開展的血脂檢查，主要是對血液（血漿）中所含脂類進行的一種定量測定方法。常用的檢查項目一般包括以下幾類：①總膽固醇（Tch或TC）和膽固醇酯（chE）測定 。
②三醯甘油（TG）測定。
③脂蛋白組分和亞組分測定。又可再分為高密度脂蛋白（HDL，亦稱為高密度膽固醇，HDL-C），低密度脂蛋白（LDL，亦稱為低密度膽固醇，LDL-C）和極低密度脂蛋白 (VLDL，亦稱為極低密度膽固醇，VLD-C）三類。
④磷脂（PL），主要是磷脂醯膽鹼、磷脂醯乙醇胺和神經磷脂等測定。
⑤非脂化脂肪酸（又稱游離脂肪酸，FFA）測定。
⑥微量的類固醇激素和脂溶性維生素測定。
⑦載脂蛋白測定。

⑶ 血脂各指標測定方法有哪些

在生化檢查的時候，經常會查血脂四項，就是甘油三酯、總膽固醇、低密度脂蛋白膽固醇和高密度脂蛋白膽固醇。
一般甘油三酯的正常范圍是小於1.7mmol/L，如果超過2.3mmol/L，就可能會帶來身體的損害。高密度脂蛋白膽固醇是一個好的膽固醇，能夠從外周把血管內皮上的膽固醇運回肝臟，所以稱它為能清除外周膽固醇的膽固醇水平，所以它的水平增高，心血管疾病的風險是降低的，正常值一般是要在1.0mmol/L以上。
低密度脂蛋白膽固醇是肝臟合成的脂蛋白所攜帶的膽固醇，它把膽固醇運送到周圍組織來供給它們使用，低密度脂蛋白膽固醇水平增高，心腦血管疾病的風險就會增加，所以低密度脂蛋白膽固醇有不同的正常范圍。如果這個人沒有心腦血管疾病的風險，一般認為低密度脂蛋白膽固醇的水平只要小於3.4mmol/L就是可以的。
但是如果本身是糖尿病、高血壓，或者已經出現了頸動脈斑塊形成，這部分患者的正常范圍就可能是在2.6mmol/L以下了，需要在1.8~2.6mmol/L。如果更嚴重的一些患者，已經出現了血管病變，比如冠心病、下肢血管閉塞，或者頸動脈狹窄70%以上，這部分人群的正常范圍就應當是在1.8mmol/L以下。因此不同人群有一個不同的正常范圍，或者有不同的適宜范圍，可能更合理一些。

⑷ 載脂蛋白E的檢測方法

等電聚焦（IEF）
由於三種主要ApoE異構體E2、E3和E4的等電點（pⅠ）分別為5.89、6.02和6.68，E4比E3多一個正電荷，而E2比E3少一個正電荷。因此，可應用1EF檢測這些異構體間電荷差異而確定不同ApoE表型。傳統ApoE表型檢測方法多採用超速離心法或化學沉澱法分離VLDL，脫脂後進行IEF，然後進行染色分析。這種方法需要血清量較多，昂貴、費時，又需要大型設備，不適合大規模研究。ApoE異構體之間染色程度之間差異及電泳過程中泳動距離的變異性也造成結果的不穩定性。 免疫印跡法（immunoblotting）
血清脫脂後，經IEF電泳將ApoE與其他蛋白質分離，然後將凝膠中蛋白質轉移到硝酸纖維素（NC）膜上，用抗ApoE抗體作為一抗進行免疫印跡反應或採用直接的免疫固定法，即可靈敏而特異地顯示出ApoE區帶的位置，從而確定ApoE表型。此方法利用抗原-抗體的特異反應，排除了血清其他蛋白質的干擾，不需超速離心分離VLDL，血清用量少，是國內外實驗室檢測ApoE表型常用的方法之一。但此類方法亦存在一些缺點，如對於存在與普遍異構體具有相同電荷的罕見異構體標本，或在糖尿病等病理狀態時，由於轉錄後修飾引起蛋白質變化的標本檢測時，就會給出錯誤的結果。 雙相電泳（two-dimensional electrophoresis）
第一相應用IEF電泳將等電點不同的蛋白質分離；第二相根據蛋白質分子量不同及濃度的差異，應用SDS-PAGE進行分離，由此確定ApoE表型。此技術能解決IEF遇到的一些轉錄後修飾的問題，臨床標本用量也很少，並且可以同時進行定性和定量分析，但由於成本昂貴而且費時，有時也難以清晰地分辨表型，故臨床上應用較少。