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脂肪的檢測方法

發布時間:2022-02-01 13:53:52

『壹』 脂肪檢測的原理是什麼實驗操作流程

脂肪檢測方法可用索式提取法:

一、索式提取法(經典方法)

1、原理:

樣品經前處理後,放入圓筒濾紙內,將濾紙筒置於索式提取管中,利用乙醚或石油醚在水浴中加熱迴流,使樣品中的脂肪進入溶劑中,回收溶劑後所得到的殘留物,即為脂肪(粗脂肪)
採用這種方法測出遊離態脂,此外還含有磷脂、色素、蠟狀物、揮發油、糖脂等物質,所以用索氏提取法測得的脂肪為粗脂肪。

2、 適用范圍與特點

索氏提取法適用於脂類含量較高,結合態的脂類含量較少,能烘乾磨細,不宜吸濕結塊的樣品的測定。此法只能測定游離態脂肪,而結合態脂肪無法測出,要想測出結合態脂肪需在一定條件下水解後變成為游離態的脂肪方能測出。

另外此法是經典方法,對大多數樣品結果比較可靠,但需要周期長,溶劑量大。

二、實驗操作流程

1、濾紙筒的制備

將濾紙剪成長方形8×375px ,捲成圓筒,直徑為150px,將圓筒底部封好,最好放一些脫脂棉,避免向外漏樣。

2、稱取樣品,將樣品烘乾磨細,稱取一定量與紙筒封好上口,最好用測定水的樣品。

3、索式抽提器的准備

索氏抽提器由三部分組成,迴流冷凝管、提取管、提脂瓶組成。提脂瓶在使用前需烘乾並稱至恆重。其它要乾燥。

4、抽提

將裝好樣的紙筒放入抽提管 , 倒入乙醚,乙醚的量從提取管加入,加入的量為提取瓶體積的2/3 接上冷凝裝置,在恆溫水浴中抽提,水浴溫度大約為55℃左右,可用濾紙檢驗,理論值抽提6-8小時,實際值3-4小時,但也根據樣品性質來決定。
5、回收乙醚

當乙醚在提取管內即將虹吸時立即取下提取管,將其下口放到乙醚回收瓶內,使之傾斜,然後將提取瓶放到100-150℃烘箱烘至恆重。

6、計算

脂肪%= (W2-W1)/W x 100

W2——瓶和樣品重(g)W1——瓶子重量(g) W——樣品重量(g)

或:脂肪%=(抽提後濾紙與樣品重量—抽提前濾紙重量)/樣品重量 × 100

濾紙筒應事先放入燒杯與100-105℃烘箱烘至恆重。

(1)脂肪的檢測方法擴展閱讀

索式提取法注意事項

(1)樣品應乾燥後研細,裝樣品的濾紙筒一定要緊密,不能往外漏樣品,否則重做。

(2)放入濾紙筒的高度不能超過迴流彎管,否則乙醚不易穿透樣品,使脂肪不能全部提出,造成誤差。

(3) 碰到含多糖及糊精的樣品要先以冷水處理,等其乾燥後連同濾紙一起放入提取器內。

(4) 提取時水浴溫度不能過高,一般使乙醚剛開始沸騰即可(約45℃左右),迴流速度以8-12次/時為宜。

(5) 所用乙醚必需是無水乙醚,如含有水分則可能將樣品中的糖以及無機物抽出,造成誤差。

(6) 若用干樣品測定脂肪,可按下式計算原來樣品脂肪的含量

脂肪(%)= (W1-W2)(100-A) / W

A— 100克樣品中水分的含量(g)

(7) 冷凝管上端最好連接一個氯化鈣乾燥管,這樣不僅可以防止空氣中水分進入,而且還可以避免乙醚揮發在空氣中。這樣可防止實驗室微小環境空氣的污染,如無此裝置,塞一團干脫脂棉球亦可。

(8)如果沒有無水乙醚可以自己制備,制備方法如下:在100ml乙醚中,加入無水石膏50克,振搖數次,靜止10小時以上,蒸餾,收集35℃以下的蒸餾液,即可應用。

(9)將提取瓶放在烘箱內乾燥時,瓶口向一側傾斜45度防止揮發物乙醚易與空氣形成對流,這樣乾燥迅速。

(10)如果沒有乙醚或無水乙醇時,可以用石油醚提取,石油醚沸點30-60℃為好。

(11)使用揮發乙醚或石油醚時,切忌直接用火源加熱,應用電熱套、電水浴、電燈泡等。

(12) 這里恆重的概念有區別,它表示最初達到的最低重量,即溶劑和水分完全揮發時的恆重,此後若在繼續加熱,則因油脂氧化等原因會導致重量增加。

(13) 在乾燥器中的冷卻時間一般要一致。

『貳』 國標規定脂肪的測定方法有哪幾種

有四種,一是索氏提取法,二是酸水解法,三是鹼水解法,四是蓋勃氏法

『叄』 檢驗脂肪的方法

測定身體內脂肪重量的方法很多,現在簡單地介紹幾種。

1、重水法 用重水法可以測出被測人全身的含水量。已知人體除脂肪部分(LBM)的含水率是72%,由全身的含水量和LBM的含水率就可以計算出被測人的除脂肪重量,進而求出身體內的脂肪重量。

2、放射性同位素40K法 人體除脂肪部分(LBM)中天然鉀(K)的含量是一定的。天然鉀(K)由穩定性同位素39K和41K及放射性同位素40K組成。天然鉀(K)中放射性同位素40K的百分含量也是一定的。一克天然鉀(K)中的放射性同位素40K每分鍾發生二十八次?-衰變。用全身記數器測定被測人體內每分鍾發生?-衰變時放出的?粒子數,就可以計算出被測人的除脂肪體重。然後,求出身體內的脂肪重量。

以上兩種方法測量身體的脂肪重量時,都需要相當復雜而精密的儀器。

3、水中測量法 水中測量是一種比較精確而又比較簡單的方法。就是使被測的人的身體浸在水中,測量身體在水中的浮力,然後,算出被測人的體積。假定人體脂肪的比重是0.9千克/立方分米。身體的除脂肪部分(LBA)的比重是1.095千克/立方分米,就可以算出身體內除脂肪部分的重量和脂肪的重量。

水中測量法的具體做法是:做一個具有管狀框架的椅子,將這樣的椅子掛在大稱的稱鉤上。被測者坐在椅子上,使管狀框架的椅子和被測人的身體全部浸在水中。人體內骨骼和肌肉的重量越大,被測人的身體就越往下沉,在水裡的體重越重。人體內的脂肪越多,越有向上浮的傾向,在水中的重量越輕。

4、測量皮膚褶厚度的方法 測量皮膚褶的厚度可以粗略地推算出身體脂肪的百分數。皮膚褶厚度可以反映皮下脂肪的含量,但不能反映隱藏在肌肉里的脂肪。這種方法比較簡單。

測量皮膚褶方法如下: 用拇指和食指捏起皮膚,不要把肌肉包括在內。用測量儀器或卡尺(也可用普通尺子)測量雙折皮膚的厚度,以間接算出身體脂肪的百分數。

測量皮膚褶的部位在肩胛骨下角處、腹部、上臂外側三角肌等三個部位。肩胛骨下角處在背部左肩下和右肩下。測量腹部皮膚褶時,要提捏上腹左前方和右前方的皮膚褶。測量出這三個部位的皮膚褶厚度以後,參考身體脂肪百分數推算表,就可以推算出自己的身體脂肪百分數。

在正常情況下,身體脂肪隨年齡增長而增加,從20歲到60歲之間,每增長10歲,脂肪百分數增加百分之一。健康女子的身體脂肪率以22%為限,男子以15%為限,優秀運動員則更低呢。

『肆』 脂肪的檢驗方法是什麼

常規的脂肪檢測,需要到醫院做脂肪肝的檢查,可以做肝臟的超聲,脂肪肝的患者往往脂肪都是增多的,通過肝臟的超聲可以判斷是輕度脂肪肝,重度脂肪肝還是中度脂肪肝,重度脂肪肝的人往往體內脂肪是很多的。

『伍』 脂肪可用什麼試劑來檢測檢測過程是什麼

用蘇丹Ⅲ或蘇丹Ⅳ染液

步驟:

1:首先取一粒浸泡過的花生種子,右手持刀片,將子葉削去一片,形成一個平面。

2、用滴管在花生子葉薄片上滴上幾滴蘇丹3染液,染色兩到三分鍾。

3、用吸水紙吸去薄片周圍多餘的染液,滴上1到2滴酒精溶液,洗去浮色。

4、製成臨時裝片。

5、用高倍鏡觀察。

注意事項:

①切片要薄,如厚薄不均就會導致觀察時有的地方清晰,有的地方模糊。

②酒精的作用是:洗去浮色

③使用顯微鏡觀察
④使用不同的染色劑染色時間不同

『陸』 脂肪可用什麼試劑來檢測檢測過程是什麼

用蘇丹Ⅲ或蘇丹Ⅳ染液

步驟:

1:首先取一粒浸泡過的花生種子,右手持刀片,將子葉削去一片,形成一個平面。

2、用滴管在花生子葉薄片上滴上幾滴蘇丹3染液,染色兩到三分鍾。

3、用吸水紙吸去薄片周圍多餘的染液,滴上1到2滴酒精溶液,洗去浮色。

4、製成臨時裝片。

5、用高倍鏡觀察。

注意事項:

①切片要薄,如厚薄不均就會導致觀察時有的地方清晰,有的地方模糊。

②酒精的作用是:洗去浮色

③使用顯微鏡觀察
④使用不同的染色劑染色時間不同

『柒』 脂肪的鑒別方法

脂肪可以被蘇丹3染成橘黃色或被蘇丹4染成紅色。可以根據這些化學試劑所產生的顏色反應,鑒定生物組織的脂肪的存在。

脂肪是由甘油和脂肪酸組成的三醯甘油酯,其中甘油的分子比較簡單,而脂肪酸的種類和長短卻不相同。脂肪酸分三大類:飽和脂肪酸、單不飽和脂肪酸、多不飽和脂肪酸。

(7)脂肪的檢測方法擴展閱讀:

脂肪的生物合成包括三個方面:飽和脂肪酸的從頭合成,脂肪酸碳鏈的延長和不飽和脂肪酸的生成。脂肪酸從頭合成的場所是細胞液,需要CO2和檸檬酸的參與,C2供體是糖代謝產生的乙醯CoA。反應有二個酶系參與,分別是乙醯CoA羧化酶系和脂肪酸合成酶系。

首先,乙醯CoA在乙醯CoA羧化酶催化下生成,然後在脂肪酸合成酶系的催化下,以ACP作醯基載體,乙醯CoA為C2受體,丙二酸單醯CoA為C2供體,經過縮合、還原、脫水、再還原幾個反應步驟,先生成含4個碳原子的丁醯ACP,每次延伸循環消耗一分子丙二酸單醯CoA、兩分子NADPH,直至生成軟脂醯ACP。

產物再活化成軟脂醯CoA,參與脂肪合成或在微粒體系統或線粒體系統延長成C18、C20和少量碳鏈更長的脂肪酸。在真核細胞內,飽和脂肪酸在O2的參與和專一的去飽和酶系統催化下,進一步生成各種不飽和脂肪酸。高等動物不能合成亞油酸、亞麻酸、花生四烯酸,必須依賴食物供給。

『捌』 高中生物如何對脂肪進行檢測

1、材料的選取:
含脂肪量越高的組織越好,如花生的子葉。
2、步驟:
製作切片(切片越薄越好)將最薄的花生切片放在載玻片中央。
染色(滴蘇丹Ⅲ染液2~3滴切片上→2~3min後吸去染液→滴體積分數50%的酒精洗去浮色→吸去多餘的酒精)。
製作裝片(滴1~2滴清水於材料切片上→蓋上蓋玻片)。
鏡檢鑒定(顯微鏡對光→低倍鏡觀察→高倍鏡觀察染成橘黃色的脂肪顆粒)。

『玖』 高中生物脂肪的檢測為什麼有兩種方法

本質上來說兩種方法都是一種,只是形式有所不同。課本按觀察方法劃分,前者直接打碎滴加的是肉眼直接觀察法,用於觀察判斷脂肪是否存在,屬於宏觀上的。後者切片在顯微鏡下觀察是不破壞細胞結構,能夠看清細胞中脂肪存在形態的方法,屬於微觀上的。課本上還說了可以採用兩種試劑,蘇丹三和蘇丹四,兩種試劑各自獨立,染色過程相同,唯一區別是著色,蘇丹三呈黃色,蘇丹四呈橘紅色。(顏色記得不是很清楚,回答嚴格按課本詞彙即可。)

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