檢測丙二醛最常見的方法

⑴ TBA是什麼意思

硫代巴比妥酸(TBA)法：TBA法的原理是脂質過氧化的降解產物之一一丙二醛(MDA)，可以與硫代巴比妥酸成色。是肝細胞以膽固醇為原料直接合成的膽汁酸，包括膽酸、鵝脫氧膽酸及相應結合型膽汁酸。

TBA法是一非常簡便的方法，一般實驗室均可進行。此法與熒光法、化學發光法等有較好的相關性，但不足之處是靈敏度較差，某些因素應加以控制，如線粒體污染，樣品中的鐵離子等。

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硫代巴比妥酸(TBA)法在520nm處進行比色測定，可檢測丙二醛相對含量的變化，以了解生物膜質過氧化的情況。 TBA法是一非常簡便的方法，一般實驗室均可進行。

此法與熒光法、化學發光法等有較好的相關性，但不足之處是靈敏度較差，某些因素應加以控制，如線粒體污染，樣品中的鐵離子等。

⑵ 丙二醛的提取及含量測定的方法

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丙二醛(MDA)含量的測定
① 測定步驟
稱取剪碎的試材1g，加入2ml10%三氯乙酸(TCA)和少量石英砂，研磨至勻漿，再加8mlTCA進一步研磨，勻漿在4000r/min離心10分鍾，上清液為樣品提取液。吸取離心的上清液2ml(對照加2ml蒸餾水)，加入2ml0.6%硫代巴比妥酸溶液，混勻物於沸水浴上反應15min，迅速冷卻後再離心。取上清液測定532、600和450nm波長下的吸光度。
② 計算
(3-6)
式中：C—MDA的濃度， ；
A450，A532 和A600—分別代表450、532和600nm波長下的吸光度值。

⑶ 丙二醛用TBA檢測為什麼要測600nm的值

600nm一般用於排除非特異性吸收，如樣本自身的濁度或者顏色所導致吸光值上升，最終要減去

丙二醛在酸性和高溫條件，可以與硫代巴比妥酸(TBA)反應生成紅棕色的三甲川(3,5,5—三甲基惡唑2,4-二酮)，在532nm處有最大光吸收，在600nm處有最小光吸收，該復合物的吸光系數為155[mmol/( L.cm )] ，可按公式：A532－A600=155000×C×L算出MDA濃度C(μmol/L)，進一步算出單位重量鮮組織中 MDA 含量(μmol/g)。式中，A532和A600分別表示532nm和600nm處的吸光度值。L為比色杯厚度(cm )。

需要指出的是，植物組織中糖類物質對MDA-TBA反應有干擾作用。為消除這種干擾，經試驗，可用下列公式消除由蔗糖引起的誤差。

C(μmol/L)=6.45(A532－A600)-0.56A450

式中： A450、A532和A600分別表示450nm、532nm 和600nm處的吸光度值。算出植物樣品提取液中MDA的濃度後，可進一步算出其在植物組織中的含量。

⑷ 丙二醛的測量方法

一：原理
丙二醛（MDA）是常用的膜脂過氧化指標，在酸性和高溫度條件下，可以與硫代巴比妥酸（TBA）反應生成紅棕色的三甲川（3，5，5-三甲基惡唑-2，4-二酮），其最大吸收波長在532nm。但是測定植物組織中MDA時受多種物質的干擾，其中最主要的是可溶性糖，糖與TBA顯色反應產物的最大吸收波長在450nm，但532nm處也有吸收。植物遭受乾旱、高溫、低溫等逆境脅迫時可溶性糖增加，因此測定植物組織中MDA—TBA反應物質含量時一定要排除可溶性糖的干擾。低濃度的鐵離子能夠顯著增加TBA與蔗糖或MDA顯色反應物在532、450nm處的消光度值，所以在蔗糖、MDA與TBA顯色反應中需一定量的鐵離子，通常植物組織中鐵離子的含量為每克千重100—300ug/g，根據植物樣品量和提取液的體積，加入Fe3+的終濃度為0.5umol/L。
二：試劑
1：質量分數為10%三氯乙酸（TCA）；
2：質量分數0.6%硫代巴比妥酸：先加少量的氫氧化鈉（1mol·L-1）溶解，再用10%的三氯乙酸定容；
三：方法
1：MDA的提取 稱取剪碎的試材1g，加入2mll0%TCA和少量石英砂，研磨至勻漿，再加8mlTCA研磨，勻漿在4000r/min離心10min，上清液為樣品提取液。
2：顯色反應和測定 吸取離心的上清液2ml（對照加2ml蒸餾水），加入2ml0.6%TBA溶液，混勻物於沸水浴上反應15min，迅速冷卻後再離心。取上清液測定532、600和450nm波長下的消光度。
四：結果
C1=11.71D450
C2={6.45(D532 - D600) - 0.56D450}NW-1
C1——可溶性糖的濃度（mmol/L）
C2——MDA的濃度（·umol/L）
D450、0532、D600分別代表450、532和600nm波長下的消光度值。
N：提取液總體積（ml）
W：植物組織鮮重