尿碘分光光度計檢測方法原理

Ⅰ 分光光度計的工作原理

分光光度計的基本工作原理是基於物質對光（對光的波長）的吸收具有選擇性，不同的物質都有各自的吸收光帶。

所以，當光色散後的光譜通過某一溶液時，其中某些波長的光線就會被溶液吸收。在一定的波長下，溶液中物質的濃度與光能量減弱的程度有一定的比例關系，即符合比爾定律。

T = I/Io lg（Io/I）=εcb

式中，T為透過率，Io為入射光強度，I為透射光強度，A為消光值（吸光度），ε為吸收系數，b為溶液的光徑長度，c為溶液的濃度。從以上公式可以看出，當入射光、吸收系數和溶液厚度一定時，透光率是根據溶液的濃度而變化的。

分光光度計已經成為現代分子生物實驗室常規儀器。常用於核酸，蛋白定量以及細菌生長濃度的定量。

注意事項：

1、該儀器應放在乾燥的房間內，使用時放置在堅固平穩的工作台上，室內照明不宜太強。熱天時不能用電扇直接向儀器吹風，防止燈泡燈絲發亮不穩定。

2、使用本儀器前，使用者應該首先了解本儀器的結構和工作原理，以及各個操縱旋鈕之功能。在未按通電源之前，應該對儀器的安全性能進行檢查，電源接線應牢固，通電也要良好，各個調節旋鈕的起始位置應該正確，然後再按通電源開關。

3、在儀器尚未接通電源時，電表指針必須於「0」刻線上，若不是這種情況，則可以用電表上的校正螺絲進行調節。

Ⅱ 請問分光光度法測物質含量的原理及方法是什麼

分光光度計原理大致是採用一個可以產生多個波長的光源，通過系列分光裝置，從而產生特定波長的光源，光線透過測試的樣品後，部分光線被吸收，計算樣品的吸光值，從而轉化成樣品的濃度。樣品的吸光值與樣品的濃度成正比。
根據朗伯比爾定律單色光輻射穿過被測物質溶液時，被該物質吸收的量與該物質的濃度和液層的厚度（光路長度）成正比，其關系如下式：
A=-lg(I/I。)=-lgT=kLc
式中 :A 為吸光度；
I。為入射的單色光強度；
I 為透射的單色光強度；
T 為物質的透射率；
k 為摩爾吸收系數；
L 為被分析物質的光程，即比色皿的邊長
c 為物質的濃度
物質對光的選擇性吸收波長，以及相應的吸收系數是該物質的物理常數。當已知某純物質在一定條件下的吸收系數後可用同樣條件將該供試品配成溶液，測定其吸收度,即可由上式計算出供試品中該物質的含量。在可見光區，除某些物質對光有吸收外，很多物質本身並沒有吸收但可在一定條件下加入顯色試劑或經過處理使其顯色後再測定,故又稱比色分析。由於顯色時影響呈色深淺的因素較多，且常使用單色光純度較差的儀器，故測定時應用標准品或對照品同時操作。