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分子水平檢測目的基因三種方法

發布時間:2023-07-25 08:48:30

A. 1.寫出基因工程第四個步驟中,要從分子水平上檢測的內容及採用的檢測方法

從分子水平上檢測有DNA分子雜交技術,分子雜交技術和抗原-抗體雜交技術。
1.DNA分子雜交技術檢測的是轉基因生物的DNA是否插入了目的基因。將轉基因生物的基因組DNA提取出來,在含有目的基因的DNA片段上用放射性同位素等作標記,以此作為探針,使探針與基因組DNA雜交,如果顯出雜交帶,就表明目的基因已插入染色體DNA中。
2.分子雜交技術檢測目的基因是否轉入出了mRNA。從轉基因生物中提取出mRNA,用標記的目的基因作為探針,與mRNA雜交,如果顯出雜交帶,則表明目的基因轉入出了mRNA。
3.抗原-抗體雜交檢測目的基因是否翻譯成蛋白質。從轉基因生物中提取蛋白質,用相應的抗體進行抗原-抗體雜交,若有雜交帶出現,表明目的基因已形成蛋白質產物。

B. 轉基因的具體步驟,從目的基因的獲得到最後的鑒定,謝謝

1:目的基因的獲取。有三種方法(1)從基因文庫中獲取(2)利用PCR技術擴增目的基因(3)人工合成
2:基因表達載體的構建。這個載體一般是質粒。
3:將目的基因導入受體細胞。這個導入植物細胞一般用農桿菌轉化法,也可用基因槍法或花粉管通道法。
導入動物細胞一般用顯微注射法。
導入微生物細胞一般用感受態細胞吸收DNA分子的方法。
4:目的基因的檢測與鑒定。這個分為4步:(1)用DNA分子雜交技術檢測目的基因是否進入受體細胞(2)用分子雜交技術檢測目的基因是否轉錄出RNA(3)用抗原抗體雜交技術檢測目的基因是否翻譯出蛋白質(4)進行生物個體水平的鑒定(這步不是一定的,也可不進行)。進行生物個體水平的鑒定舉個例子就是比如讓蟲子去啃食導入抗蟲基因的植株,看是否抗蟲。

C. 基因檢測方法

一般有三種基因檢測方法:生化檢測、染色體分析和DNA分析。

1.生化檢測

生化檢測是通過化學手段,檢測血液、尿液、羊水或羊膜細胞樣本,檢查相關蛋白質或物質是否存在,確定是否存在基因缺陷。用於診斷某種基因缺陷,這種缺陷是因某種維持身體正常功能的蛋白質不均衡導致的,通常是檢測測試蛋白質含量。還可用於診斷苯丙酮尿症等。

2.染色體分析

染色體分析直接檢測染色體數目及結構的異常,而不是檢查某條染色體上某個基因的突變或異常。通常用來診斷胎兒的異常。

常見的染色體異常是多一條染色體,檢測用的細胞來自血液樣本,若是胎兒,則通過羊膜穿刺或絨毛膜絨毛取樣獲得細胞。將之染色,讓染色體凸顯出來,然後用高倍顯微鏡觀察是否有異常。

3.DNA分析

DNA分析主要用於識刖單個基因異常引發的遺傳性疾病,如亨廷頓病等。DNA分析的細胞來自血液或胎兒細胞。

D. 檢測目的基因是不是只有酶切鑒定、PCR後電泳、測序這三種方法

還有其他的方法,比如分子雜交,根據你檢測的是DNA還是RNA可選用southern或Northern雜交。
還有轉基因,瞬時表達,熒光定量PCR等等。
主要是看你檢測基因的目的及所要達到的要求是什麼。如果是看構建的載體是否成功,可用酶切,或PCR方法;如果要檢測突變體,則用PCR+測序;如果想檢測目的基因表達量則用熒光定量PCR;如果想看載體是否導入目標生物體及其表達情況,則可用轉基因或瞬時表達或分子雜交。
希望對你有幫助!!

E. 基因檢測方法有哪些

基因是遺傳的基本單元,攜帶有遺傳信息的DNA或RNA序列,通過復制,把遺傳信息傳遞給下一代,指導蛋白質的合成來表達自己所攜帶的遺傳信息,從而控制生物個體的性狀表達。基因檢測是通過血液、其他體液、或細胞對DNA進行檢測的技術,是取被檢測者外周靜脈血或其他組織細胞,擴增其基因信息後,通過特定設備對被檢測者細胞中的DNA分子信息作檢測,分析它所含有的基因類型和基因缺陷及其表達功能是否正常的一種方法,從而使人們能了解自己的基因信息,明確病因或預知身體患某種疾病的風險。
基因檢測可以診斷疾病,也可以用於疾病風險的預測。疾病診斷是用基因檢測技術檢測引起遺傳性疾病的突變基因。應用最廣泛的基因檢測是新生兒遺傳性疾病的檢測、遺傳疾病的診斷和某些常見病的輔助診斷。
一般有三種基因檢測方法:生化檢測、染色體分析和DNA分析。
1.生化檢測
生化檢測是通過化學手段,檢測血液、尿液、羊水或羊膜細胞樣本,檢查相關蛋白質或物質是否存在,確定是否存在基因缺陷。用於診斷某種基因缺陷,這種缺陷是因某種維持身體正常功能的蛋白質不均衡導致的,通常是檢測測試蛋白質含量。還可用於診斷苯丙酮尿症等。
2.染色體分析
染色體分析直接檢測染色體數目及結構的異常,而不是檢查某條染色體上某個基因的突變或異常。通常用來診斷胎兒的異常。
常見的染色體異常是多一條染色體,檢測用的細胞來自血液樣本,若是胎兒,則通過羊膜穿刺或絨毛膜絨毛取樣獲得細胞。將之染色,讓染色體凸顯出來,然後用高倍顯微鏡觀察是否有異常。
3.DNA分析
DNA分析主要用於識別單個基因異常引發的遺傳性疾病,如亨廷頓病等。DNA分析的細胞來自血液或胎兒細胞。
基因檢測可以分為以下五類:
1.基因篩檢
主要是針對特定團體或全體人群進行檢測。大多數通過產前或新生兒的基因檢測以達到篩檢的目的。
2.生殖性基因檢測
在進行體外人工授精階段可運用,篩檢出胚胎是否帶有基因變異,避免胎兒患有遺傳性疾病。
3.診斷性檢測
多數用來協助臨床用葯指導。
4.基因攜帶檢測
基因攜帶者如果與某些特殊基因相結合,可能會導致下一代患基因疾病,通過基因攜帶者的檢測可篩檢出此種可能,作為基因攜帶者婚前檢查、生育時的參考。
5.症狀出現前的檢測
檢測目的是了解健康良好者是否帶有某種突變基因,而此基因與特定疾病的發生有密切的聯系。
臨床意義
1.用於疾病的診斷
如對結核桿菌感染的診斷,以前主要依靠痰、糞便或血液培養,整個檢驗流程需要在兩周以上,採用基因診斷的方法,不僅敏感性大大提高,而且在短時間內就能得到結果。
2.了解自身是否有家族性疾病的致病基因,預測患病風險
資料證實10%~15%的癌症與遺傳有關,糖尿病、心腦血管疾病等多種疾病都與遺傳因素有關。如具有癌症或多基因遺傳病(如老年痴呆、高血壓、糖尿病等)的人可找出致病的遺傳基因,就能夠有針對性地調整生活方式,預防或者延緩疾病的發生。
3.正確選擇葯物,避免濫用葯物和葯物不良反應
由於個體遺傳基因上的差異,不同的人對外來物質產生的反應也會有所不同,因此部分患者使用正常劑量的葯物時,可能會出現葯物過敏、紅腫發疹的現象。根據基因檢測的結果,可制定特定的治療方案,從而科學地指導使用葯物,避免葯物毒副反應。

F. 高二生物中的目的基因的檢測與鑒定

目的基因的檢測與鑒定分分子水平檢測和個體水平鑒定。
個體水平鑒定簡單說就是把導入了目的基因的生物體培養出來,看生物個體中是否能表達出你所需要的性狀。
分子水平檢測就相當麻煩了,它有三個步驟。
首先,要檢測轉基因生物的DNA上是否插入了目的基因。方法是採用DNA分子雜交技術,即將轉基因生物的基因組DNA提取出來,同時,在外面(像基因文庫中)取一段新的含有目的基因的DNA片段,用放射性同位素等作標記,以此來作為探針,將探針與基因組DNA雜交,來檢測。(實際上就是DNA復制的情況,DNA復制時,一條雙鏈的DNA分子解旋成了兩條單鏈的DNA,而探針也是一條雙鏈的DNA片段解旋成了兩條單鏈的DNA片段,因為探針上也有目的基因,基因組的DNA上也有目的基因,在重新形成新的2條DNA,也就是復制時,鹼基互補配對,則含目的基因的探針上的單鏈能與同樣含目的基因的基因組DNA單鏈配對,形成一條新的DNA雙鏈分子,一旦形成新的DNA分子後,放射性標記能在新的DNA分子中含目的基因處發出熒光,從而表明目的基因已導入。)
其次,就是大大你說的檢測目的基因是否轉錄出了mRNA,方法和上面一樣,但不同之處是,從轉基因生物中提取出的是mRNA,同樣,同時,在外面(像基因文庫中)取一段新的含有目的基因的DNA片段,用放射性同位素等作標記,以此來作為探針,將探針與mRNA雜交,來檢測。(這里實際上和DNA的轉錄翻譯有點像,畢竟mRNA是單鏈的,實際上是探針DNA解旋成兩條單鏈的DNA片段,就像轉錄一樣,這時的mRNA會與單鏈的DNA鹼基互補配對,顯現出標記的同位素熒光,表明mRNA上有目的基因。)所以說,mRNA與目的基因雜交,是和DNA雜交,不是mRNA與目的基因的轉錄出的mRNA雜交。
最後要檢驗的就是看目的基因能否翻譯成蛋白質,就不多說了。
不知道講的清不清楚,語文表達有限,希望你能理解啊。

G. 檢測dna上的目的基因是否表達常用的檢測方法是

A 對目的基因的檢測和表達檢測的方法混淆,不能准確應用。目的基因的檢測常採用DNA分子雜交技術,即將含有目的基因的DNA片段用放射性同位素作標記,以此作為探針,使探針與基因組DNA雜交,若出現雜交帶,則表明目的基因已插入到染色體中。DNA—RNA分子雜交與抗原——抗體雜交法是目的基因的表達檢測。目的基因是否轉錄出了相應的信使RNA分子,用DNA—RNA分子雜交法檢測。細胞內是否合成了由目的基因控制的蛋白質,使用抗原——抗體雜交法檢測。要准確區分目的基因的檢測和表達檢測使用的方法。顯微注射技術是目的基因導入受體細胞的方法。

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