豬口蹄疫檢測診斷的幾種方法

1. 老母豬得口蹄疫，怎樣救治

1．豬回蹄疫的診斷 豬口蹄疫主要症狀表現在蹄冠、蹄踵、蹄叉、副蹄和吻突皮膚、口腔胯部、頰部以及舌面粘膜等部位出現大小不等的水泡和潰瘍，水泡也會出現於母豬的乳頭、乳房等部位。病豬還有精神不振、體溫升高、厭食等症狀，當病毒侵害蹄部時，蹄溫增高，跛行明顯，常導致蹄殼變形或脫落，病豬卧地不能站立。水泡充滿清朗或微濁的漿液性液體，水泡很快破潰，露出邊緣整齊的暗紅色糜爛面，如無細菌繼發感染，經1～2周病損部位結痂癒合。若蹄部嚴重病損則需3周以上才能痊癒。口蹄疫對成年豬的致死率一般不超過3％。妊娠母豬可發生流產。 剖檢時，病豬咽喉、氣管、支氣管和胃粘膜有爛斑或潰瘍，小腸、大腸粘膜可見出血性炎症。仔豬心包膜有彌散性出血點，心肌切面有灰白色或淡黃色斑點或條紋，心肌松軟似煮熟狀。豬口蹄疫的臨床特徵與豬水泡病、豬水泡性口炎、豬水泡疹極方相似，故應根據情況，及時送當地獸醫院進行實驗室診斷。 2．豬口蹄疫的防制（1）常規性防制措施 ①疫苗注射。母豬在懷孕初期和分娩前1個月各接種1次滅活苗（有單價滅活苗、口蹄疫滅活病毒與豬瘟弱毒的聯苗等），仔豬在40日齡或80日齡注射1次，即可獲得較強的免疫能力。 ②嚴格消毒。常用消毒葯有1～2％氫氧化鈉、30％熱草木灰、1～2％甲醛溶液。正確的消毒程序是：噴灑周圍環境，保持4小時以上→徹底清掃糞尿、垃圾、泥土、污物，堆積發酵或焚燒→第2次噴灑並維持4小時以上→有水泥地面的豬舍及運載工具用自來水沖洗干凈，自然晾乾後→第3次噴霧或噴灑，自然乾燥後啟用。（2）緊急預防措施 堅持「早發現，嚴封鎖，小范圍內及時撲滅」的原則。 ①用2～3％苛性鈉或1：500濃度的滅毒凈每天噴霧1～2次，進行全面消毒；限制豬群的移動。 ②對未發病的豬群緊急接種疫苗，常規苗每頭5毫升，高效苗每頭3毫升；或用口蹄疫高免血清或康復動物血清進行被動免疫，按每公斤0.5～1 毫升皮下注射。15天後加強免疫1 次。 ③患口蹄疫的病畜，症狀輕微的一般經過10天左右多能自愈，但為了促進早日康復，縮短病程，防止繼發感染，應在嚴格隔離、加強護理的條件下，進行對症治療。對口腔病變用清水、食鹽或0.1％高錳酸鉀液洗滌潰瘍面，徐以1～2％明礬溶液或碘甘油。對蹄部病變，用3％來蘇兒洗凈，然後塗擦龍膽紫溶液、碘甘油、青黴素軟膏或木焦油凡士林（1:1）等，用綳帶包紮。也可將煅石膏與鍋底灰各半，研成粉未，加少量食鹽粉撤在蹄的患部。對乳房病變，用肥皂水或2～3％硼酸水清洗，然後塗以青黴素軟膏或其他刺激性較小的軟膏。對惡性口蹄疫，除局部治療外，可用強心劑和滋補劑，如安鈉咖、葡萄糖鹽水等。

2. 口蹄疫的檢測

1.蹄疫反轉錄聚合酶鏈反應（RT-PCR），用於檢測疑似感染動物水皰皮或水皰液中所有血清型口蹄疫病毒，適用於口蹄疫病毒的檢測、診斷和流行病學調查。
原理：利用異硫氰酸胍方法提取RNA，在反轉錄酶的作用下，以RNA為模板，以引物為起點合成與RNA模板互補的cDNA鏈。利用西安天隆科技有限公司生產的DTC型基因擴增儀，在TaqDNA聚合酶的作用下，經高溫變性、低溫退火、中溫延伸的循環，使特異性DNA片段的基因拷貝數放大一倍。經過35個循環，最終使基因放大數百萬倍。將擴增產物進行電泳，經溴化乙錠染色後，在紫外燈照射下，肉眼可見DNA片段的擴增帶。該方法可以檢測所有亞型的口蹄疫病毒，檢測結果為陽性，需進一步採用分型診斷試劑盒進行進一步檢測。
2.血清學試驗 ，ELISA是目前檢測FMDV感染較為常用的診斷方法，其與補結試驗、中和試驗及間接血凝抑制、免疫擴散沉澱試驗相比較、具有靈敏、快速、價廉等優點。

3. 口蹄疫實驗室檢查方法有哪些

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口蹄疫病毒具有多型性，而其流行特點和臨床症狀一樣，其病毒屬於哪一型，需經實驗室檢查才能確定。另外，豬口蹄疫與豬水皰病的臨床症狀幾乎無差別，也有賴於實驗室檢查予以鑒別。首先將病豬蹄部用清水洗凈，用干凈剪子剪取水皰皮，裝人青黴素（或鏈黴素）空瓶，最好採取3-5頭病豬的水皰皮，冷藏保管，一並迅速送到有關檢驗部門檢查。

傳統的方法是補體結合試驗和乳鼠血清保護試驗。以後又採用反向間接血凝試驗和瓊脂擴散試驗，近來常用酶聯免疫吸附試驗。據報道，酶聯免疫吸附試驗比反向間接血凝試驗更靈敏可靠，阻斷夾心酶聯免疫吸附試驗已用於進出口動物血清的檢測。

4. 豬病常用的血清學診斷方法有哪些

抗原和相應的抗體在動物體內或體外都能發生特異性結合反應，這種反應稱為抗原抗體反應，習慣上把體內的抗原抗體反應稱為免疫反應，體外的抗原抗體反應稱為血清學反應，因為抗體主要存在於血清中。

血清學反應可以用已知的抗體檢查未知的抗原，也可用已知抗原測定未知的抗體。人們根據抗體能與相應抗原發生反應並出現可見的抗原—抗體復合物的原理，設計了許多血清學診斷方法，不僅可以檢測動物體內乃至體外的病原微生物，或其抗原性成分，而且還可以測定動物機體對病原微生物的侵襲或對其抗原成分的免疫反應。在抗原—抗體復合物成不可見狀態時，可以通過瓊脂擴散、凝集實驗以及酶標記等指示系統，使其變為可見或可測狀態。

目前已知的血清學診斷方法很多，現僅介紹幾種在目前條件下規模化豬場通過學習都能做到的診斷方法：

（1）凝集試驗豬病診斷過程中常用的操作方法有以下幾種：

①全血平板凝集試驗實踐中主要用於細菌性疾病的抗體檢測和抗原（經分離培養後）的鑒定。現舉例用已知豬丹毒抗原（丹毒桿菌的純培養液）測定被檢豬血清中的抗體。其操作步驟如下：

a.材料豬丹毒凝集抗原，玻片，9號針頭，酒精棉球，酒精燈，鉑耳（取血環）等。b.操作用鉑耳取已知抗原1滴，置於玻片上。用酒精棉球擦拭針頭，鉑耳在酒精燈上灼燒消毒。用針頭刺破被檢豬的耳靜脈，以鉑耳取血與玻片上的抗原等量混合，在2～3分鍾內觀察結果。c.結果判定出現顆粒狀的凝集，為陽性反應。否則為陰性。

②試管凝集試驗是一種定量法，用於測定被檢血清或其他體液中有否某種抗體及其效價，可做臨床的輔助診斷，或用於流行病學監測。在豬場中，本法常用於豬布氏桿菌病的診斷。

A.材料布氏桿菌病試管凝集抗原（1∶20倍稀釋），布氏桿菌病陽性血清、陰性血清（1∶25倍稀釋），稀釋液（0.5 %石炭酸生理鹽水），滅菌小試管，1毫升吸管，試管架，待檢血清等。B.操作取試管7支置於試管架上，設陽性和陰性血清及抗原對照各1支，測定管4支，以後每增加1個樣品，只需增加4支測定管。

按表10示意稀釋血清，加抗原，完成後每支試管內應含1毫升液體。