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dna質量檢測方法

發布時間:2023-07-05 00:40:05

『壹』 dna測試怎麼

第一、dna檢測的方法
1、傳統的親子鑒定是進行血型測試。一般孩子6個月以上才可以做,並需要大量的血液樣本。這種方法過程煩瑣、取樣痛苦且錯誤率高。傳統的血型判斷在一定程度上有其作用態睜螞,但親子鑒定並不能按照血型來鑒定。
2、DNA親子鑒定測試。DNA親子鑒定是通過人體任何組織取樣(例如口腔上皮細胞取樣),也可以在孩子早芹未出世前進行。該方法是目前親子測試中最准確的一種--准確率可達99.99999%,具有精巧、簡便、快速、經濟、實用的特點。父子關系相對機會(RCP),按照國內外親子鑒定的慣例,當RCP值大於99.73%時,則可以認為假設父與孩子具有親生關系。
3、SNP檢測。當前DNA親子鑒定利用人類基因組中的重復鹼基序列(STR作為第二代分子標記)和PCR技術進行個體識別,帆埋但STR具有很大的局限性,SNP是第三代分子標記技術是將來的發展方向,美國911屍體辨認即利用了此技術。

『貳』 DNA質量檢測相關方法,及效果

DNA質量檢測的方法有:基因組DNA片段大小的確定,基因組DNA濃度的測定,基因組DNA純度的測定三方面。
檢測的效果分析如下:
當OD260/OD280<
1.8,表示蛋白質含量較高;
當OD260/OD280>
2.0,表示RNA含量較高;
當OD260/OD280=1.8~2.0,表示DNA較純。

『叄』 dna檢測復雜嗎,有沒有簡單點的方法

基因突變檢測方法
(1) PCR-SSCP法是在非這性聚丙烯醯胺凝膠上,短的單鏈DNA和RNA分子依其大街基序列不同而形成不同構象,一個鹼基的改變將影響其構象而導致其在凝膠上的移動速度改變。其基本原理為單鏈DNA在中性條件下會形成二級結構,這種二級結構依賴於其鹼基組成,即使一個鹼基的不同,也會形成不同的二級結構而出刺同的遷移率。由於該法簡單快速,因而被廣泛用於未知基因突變的檢測。
(2)異源雙鏈分析法(HA) HA法直接在變性凝膠上分離雜交的突變型一野生型DNA雙鏈。由於突變和野生型DNA形成的異源雜合雙鏈DNA在其錯配處會形成一突起,在非變性凝膠中電泳時,會產生與相應的同源雙DNA不同的遷移率。該法與SSCP相似,所不同的是SSCP分離的是單鏈DNA,HA法分離的是雙鏈DNA,也只適合於小片段的分析。
(3)突變體富集PCR法(mutant-enriched PCR)本法的基本原理是利用ras基因家族某個密碼子部位存在已知的限制性內切酶位點,如K-ras基因第12密碼子的BstNI位點,第13密古巴子有BgⅠⅡ位點。用鏈續二次的巢式PCR來擴增包括K-ras第12、13密碼子的DNA片段,在兩次擴增反應之間用相應的內切酶消化擴增的DNA片段,野生型因被酶切而不能進入第二次PCR擴增,而突變型則能完整進入第二次PCR擴增並得到產物的富集。

『肆』 DNA製品可用哪幾種方法測定其含量,試從原理,准確性方面加以比較

測定DNA濃度的方法有兩種,即利用分光光度計法測定DNA的紫外光吸收值;另一種方法是測定樣品中溴化乙錠發射的熒光的強度來計算核酸的含量.
紫外光吸收法:因為組成核酸的鹼基(G,A,T,C)在260nm處具有強吸收峰,所以通過測定260nm的吸收峰即可對DNA進行定量.但有時也會因為所處溶液的pH值不同而導致吸光系數的不同.因此,一般在中性pH值左右的環境中進行測定.這種方法常用於測定比較純的樣品.
溴化乙錠熒光強度法:當DNA含量很低以及樣品中雜質含量高時,會影響紫外光吸收值的測定,這時,可以採用測定嵌入DNA中溴化乙錠分子受紫外光激發而發射出的熒光強度,因為這種熒光的強度與DNA總質量數成正比.

『伍』 DNA含量的測定方法

那要看你用什麼方法測定DNA和RNA:
(1)紫外吸收法也就是測量OD(260)和OD(280)的吸收值,這樣的方法其它的雜質對測量結果影響大一點,因為其它雜質在這兩個吸收波長也有吸收。
(2)熒光法,用PicoGreen熒光染料,測定DNA,RNA濃度比較靈敏,並且適合測量低濃度和微量DNA和RNA,並且受其它雜質的影響不大,缺點要有專門的熒光檢測儀器,試劑比較昂貴。
純化DNA可以買試劑盒,主要有膜吸附法,磁珠分離法,都很方便。

『陸』 鑒定dna的方法

第一步,DNA的提取就是把樣本的細胞核中所含的DNA提取出來,然後進行一定的純化;第二步,就是PCR擴增,簡單的說,這一步,就是把我們需要的片段,通過酶促反應在PCR儀上進行大量復制,放大到通過某些專用儀器可以看到的程度;第三步,就是後PCR反應,這一步主要就是上ABI測序儀檢測准備階段,將雙鏈的DNA打開,加一些檢測用的內標,主要是用來標記檢測的片段長度;第四步,就是毛細管測序儀檢測。由於DNA是帶有電荷的,通過毛細管電泳的方法就可以檢測處理一些數據;第五步,就是分析數據,出具報告;最後,出鑒定結論和報告。

『柒』 植物DNA提取中怎樣檢測提取到DNA質量

第一種方法是測量260/280的比例,判斷是否有蛋白質的污染。在260nm和280nm處測定DNA溶液的光吸收,A260與A280之比應在1.75-1.80之間。低於此值表明制備物中殘留蛋白質成分較高或含有酚,高於此值表明有RNA的殘留。

第二種方法是凝膠電泳分析,看有無斷裂降解。

影響DNA提取質量的因素:

如果實驗開始植物樣品不經液氮處理,則提取液中的CTAB濃度需要提高到4%。

在大多數情況下,使用0.1%巰基乙醇,並不能完全抑制葉片中的氧化作用。但這種氧化作用不會影響限制性內切酶的活性。如果使用的巰基乙醇濃度高於0.1%,則會大大降低DNA提取的得率。

(7)dna質量檢測方法擴展閱讀:

DNA的提取方法:

一、酚抽提法:先用蛋酶K、SDS破碎細胞,消化蛋白,然後用酚和酚-氯萃取,高速離心後取上清,所得DNA大小為100-150kb

二、甲醯胺解聚法:破碎細胞同上,然後用高濃度甲醯胺解聚蛋白質與DNA的結合,再透析獲得DNA可得DNA200kb左右。

三、玻璃棒纏繞法:用鹽酸胍裂解細胞,將裂解物鋪於乙醇上,然後用帶鉤或U型玻璃棒在界面輕攪,DNA沉澱液繞於玻棒。生成DNA約80kb。

四、異丙醇沉澱法:基本同1法,僅用二倍容積異丙醇替代乙醇,可去除小分子RNA(在異丙醇中可溶狀態)

五、表面活性劑快速制備法:用Triton X-100A或NP40表面活性劑破碎細胞,然後用蛋白酶K或酚去除蛋白,乙醇沉澱或透析。

六、加熱法快速制備:加熱96℃-100℃,五分鍾,然後離心後取上清,可用於PCR反應。

七、鹼變性快速制備:先用NaOH作用20分鍾,再加HCI中和,離心後取上清,含少量DNA。

『捌』 如何使用簡單的實驗方法檢測DNA純度

實驗原理

DNA/RNA在260nm處有最大的吸收峰,蛋白質在280nm處有最大的吸收峰,鹽和小分子則集中在230nm處。因此,可以用260nm波長進行分光測定DNA濃度,OD值為1相當於大約50μg/ml雙鏈DNA。如用25px光徑,用 H2O稀釋DNA/RNA樣品n倍並以H2O為空白對照,根據此時讀出的OD260值即可計算出樣品稀釋前的濃度:

DNA(ug/ml)=50×OD260讀數×稀釋倍數。

RNA(ug/ml)=40×OD260讀數×稀釋倍數。
DNA/RNA純品的OD260/OD280為1.8或2.0,故根據OD260/OD280的值可以估計DNA的純度。若比值較高說明含有RNA,比值較低說明有殘余蛋白質存在。OD230/OD260的比值應在0.4-0.5之間,若比值較高說明有殘余的鹽存在.本實驗室機器顯示是OD260\OD230,則比值應在2-2.5之間,偏小則說明有殘余鹽剩餘。

實驗步驟
1. 將制備的DNA懸浮溶解於TE緩沖液中[pH8.O, 1Ommo1/L的Tris緩沖液,內含〈1mmol/L EDTA〉]或懸浮溶解在滅菌水中(依據DNA含量加水)。
2. 用可掃描的紫外分光光度計測定製備的DNA/RNA的紫外吸收曲線,測定OD260和OD280,並計算比值:OD260/OD280,純DNA的此比值約為1.8~2.0。純RNA的此比值約為大於2.0。
3. 根據:每毫升1微克的純DNA的OD260值= 0.020,計算所得DNA的純度;
每毫升1微克的純RNA的OD260值= 0.025,計算所得RNA的純度;

並討論純度較低的原因和解決辦法。
260、320、230、280nm下的吸光度分別代表了核酸、背景(溶液渾濁度)、鹽濃度和蛋白等有機物的值。一般的,只看OD260/OD280(Ratio,R)。

DNA: OD260/OD280比值應接近1.80,若R值大於1.8。說明存在RNA,可重新用RNaseA處理,酚:氯仿:異戊醇(23:24:1)抽提。若R值小於1.8,則說明有蛋白質等雜質存在,需再用蛋白酶K、SDS及盼、氯仿、異戊醇重新對DNA進行純化(也可加入1/8體積的3M NaAc(pH5.2)與冷乙醇一同促使DNA沉澱析出。

RNA: OD260/OD280比值在1.8-2.0時,認為RNA中蛋白或者時其他有機物的污染是可以容忍的,不過要注意,當你用Tris作為緩沖液檢測吸光度時,R值可能會大於2(一般應該是<2.2的)。當R<1.8時,溶液中蛋白或者時其他有機物的污染比較明顯,你可以根據自己的需要決定這份RNA的命運。當R>2.2時,說明RNA已經水解成單核酸了。

注意事項:
1. 有用品均需要高溫高壓,以滅活殘余的DNA酶/RNA酶。

2. 所有試劑均用高壓滅菌雙蒸水配製,RNA均用DEPC處理的水。

3. 用大口滴管或吸頭操作,以盡量減少打斷DNA的可能性。

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