水中大腸桿菌檢測方法

❶ 飲水中大腸桿菌數量的測定

一，用滅菌容器盛接一千毫升水樣，蓋好容器。二，培養皿中加上事先制備好的伊紅－美藍培養基十五毫升，冷凝後待用。三，用醋酸纖維素慮膜過慮樣品（水）四，完後，取慮膜（含細菌），放到培養基上，使慮膜與培養基完全貼緊，不能有氣泡。五，培養基放在三十七度下培養二十小時。六，根據濾膜出現的深紫色菌落數日（即為大腸桿菌個數）得出結論。

❷ 怎樣檢測自來水中大腸桿菌數和細菌總菌數

平板計數法：採用常規塗布平板法，37℃24h後計數。培養基為營養瓊指和伊紅美蘭瓊脂。
多管發酵法：採用五管法，培養劑為液體EC培養基。
細菌總數：採用AODC法， 具體操作按徐懷恕方法進行。
活菌直接計數：採用Kogure等方法：向水樣加入0.002%萘啶酮酸（Sigma 公司）和0.025%酵母膏，在37℃下培養6-24h，加入甲醛（最終濃度為2%）固定，再按AODC法鏡檢計數。

再可以看看下面這篇文章
水中細菌總數與大腸桿菌檢測方法的比較研究

❸ 水中大腸桿菌的檢測方法

大腸菌群測定的操作細則
大腸菌群系指一群能發酵乳糖、產酸產氣、需氧和兼性厭氧的革蘭氏陰性無芽胞桿菌。該菌主要來於人畜糞便,故以此作為糞便污染指標來評價食品的衛生質量,推斷食品中有否污染腸道致病菌的可能。
食品中大腸菌群數系以100ml(g)檢樣內大腸菌群最可能數(mpn)表示。
1
設備和材料
1.1
溫箱：36±1℃。
1.2
冰箱:0～4℃。
1.3
恆溫水浴
:44.5±0.5℃。
1.4
天平。
1.5
顯微鏡。
1.6
均質器或乳缽。
1.7
平皿:直徑為90mm。
1.8
試管。
1.9
吸管。
1.10
廣口瓶或三角燒瓶:容量為500ml。
1.11
玻璃珠:直徑約5mm。
1.12
載玻片。
1.13
酒精燈。
1.14
試管架。
2
培養基和試劑
2.1
乳糖膽鹽發酵管:按gb
4789.28中4.9規定。
2.2
伊紅美藍瓊脂平板:按gb
4789.28中4.25規定。
2.3
乳糖發酵管:按gb
4789.28中4.10規定。
2.4
ec
肉湯:按gb
4789.28中4.11規定。
2.5
磷酸鹽緩沖稀釋液:按gb
4789.28中3.22規定。
2.6
生理鹽水。
2.7
革蘭氏染色液:按gb
4789.28中2.2規定。
3
操作步驟
3.1
檢樣稀釋
3.1.1
以無菌操作將檢樣25ml(或g)放於有225ml滅菌生理鹽水或其他稀釋液的滅菌玻璃瓶內(瓶內予置適當數量的玻璃珠)或滅菌乳缽內,經充分振搖或研磨做成1:10的均勻稀釋液。固體檢樣最好用均質器,以8
000-10
000
r/min的速度處理1min,做成1:10的均勻稀釋液。
3.1.2
用1ml滅菌吸管吸取1:10稀釋液1ml,注入含有9ml滅菌生理鹽水或其他稀釋液的試管內,振搖試管混勻,做成1:100的稀釋液。
3.1.3
另取1ml滅菌吸管,按上條操作依次做10倍遞增稀釋液,每遞增稀釋一次,換用1支1ml滅菌吸管。
3.1.4
根據食品衛生標准要求或對檢樣污染情況的估計,選擇三個稀釋度,每個稀釋度,接種3管。
3.2
乳糖發酵試驗
將待檢樣品接種於乳糖
膽鹽發酵管內,接種量在1ml以上者,用雙料乳糖膽鹽發酵管,1ml及1ml以下者,用單料乳糖膽鹽發酵管。每一稀釋度接種3管,置36±1℃
溫箱內,培養24±2h,如所有乳糖膽鹽發酵管都不產氣,則可報告為大腸菌群陰性,如有產氣者,則按下列程序進行。
3.3
分離培養
將產氣的發酵管分別轉種在伊紅美藍瓊脂平板上,置36±1℃
溫箱內,培養18-24h,然後取出,觀察菌落形態,並做革蘭氏染色和證實試驗。
3.4
證實試驗
在上述平板上,挑取可疑大腸菌群菌落1-2個進行革蘭氏染色,同時接種乳糖發酵管,置
36±1℃溫箱內培養24±2h,觀察產氣情況。凡乳糖管產氣、革蘭氏染色為陰性的無芽胞桿菌,即可報告為大腸菌群陽性。
3.5
報告
根據證實為大腸菌群陽性的管數,查mpn檢索表,報告每100ml(g)大腸菌群的mpn值。
4
糞大腸菌群(faecal
coliform)
4.1
用接種環將所有產氣的乳糖膽鹽發酵管培養物(見3.2條)轉種於ec肉湯管內,置44.5±0.2℃水浴箱內(水浴箱內的水面應高於ec肉湯液面),培養24±2h,經培養後,如所有ec肉湯管均不產氣,則可報告為陰性;如有產氣者,則將所有產氣的ec肉湯管分別轉種於伊紅美藍瓊脂平板上,置
培養18-24h,凡平板上有典型菌落者,則證實為糞大腸菌群陽性。
4.2
結果報告
根據證實為糞大腸菌群的陽性管數,查mpn檢索表,報告每100ml(g)糞大腸菌群的mpn值。

❹ 水中糞大腸菌群的測定

化妝品檢測項目中糞大腸菌群的檢測流程：
10g/mL樣品+90mL滅菌生理鹽水 →10mL+10mL雙倍乳糖膽（含中和劑）培養基→糞大腸菌群 44.5℃，48h培養
註：在化妝品檢測項目中，如果樣品含有油脂性的成分，如精油，在樣品前處理中需加入液體石蠟、吐溫80、生理鹽水進行均質，使樣品能夠均勻分散開來。
糞大腸菌群又是一個什麼樣的微生物呢？下面我們來詳細介紹下：
大腸菌群：大腸菌群並非細菌學分類命名，而是衛生細菌領域的用語，它不代表某一個或某一屬細菌，而指的是具有某些特性的一組與糞便污染有關的細菌，這些細菌在生化及血清學方面並非完全一致。
定義（GB2010）：在一定培養條件下能發酵乳糖、產酸產氣的需氧和兼性厭氧革蘭氏陰性無芽孢桿菌。
糞大腸菌群：大腸菌群的一種，又稱耐熱大腸菌群，培養溫度：44.5±0.5℃，糞大腸菌群是化妝品檢測項目中必檢的微生物項目。
大腸埃希氏菌：（(Escherichia. coli )通常稱為大腸桿菌。根據不同的生物學特性將致病性大腸桿菌分為5類：
致病性大腸桿菌(EPEC)、
腸產毒性大腸桿菌(ETEC)、
腸侵襲性大腸桿菌(EIEC)、
腸出血性大腸桿菌(EHEC)、
腸黏附性大腸桿菌(EAEC)。
您可能感興趣的檢測服務：

❺ 如何檢測水中的細菌

如果水中細菌密度較小，就該應用無菌技術將待測水樣通過專門過濾細菌的濾紙，這樣細菌就都留在濾紙上了，再將濾紙鋪到倒好平板的培養基中培養，長出菌落後數菌落數，數量除以過濾水的體積，就得出單位水樣里的細菌數

❻ 游泳池水中大腸菌群檢驗方法

詳細見SN0169-92,裡面對水的大腸菌群的檢測方法有嚴格的規定。中華人民共和國進出口商品檢驗行業標准

出口食品中大腸菌群、糞大腸菌群 SN 0169—92
和大腸桿菌檢驗方法 代替 ZB X09 002一88

Method for examination of coliform, fecal coliform
and escherichia coli in food for export

━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━

1 主題內容與適用范圍
本標准規定了出口食品中大腸菌群、糞大腸菌群和大腸桿菌的檢驗方法。
本標准適用於出口食品的檢驗。

2 設備和材料
2.1 吸管: 1mL,具0.1mL刻度；5mL和10mL,具1mL刻度。
2.2 水浴箱：44.5±0.5℃。
2.3 培養箱：36±1℃,44.5±0.5℃。
2.4 冰箱: 0～5℃和-15～-20℃。
2.5 均質器。
2.6 乳缽和研棒。
2.7 平皿：直徑90mm。
2.8 天平：感量0.1g。
2.9 顯微鏡。
2.10 稀釋瓶：100mL、200mL和500mL三角燒瓶及廣口瓶。
2.11 玻璃珠：直徑約5mm。
2.12 菌落計數器。

3 培養基及試劑
3.1 月桂基硫酸鹽胰蛋白(月示)(LST)肉湯。
3.2 煌綠乳糖膽鹽(BGLB)肉湯。
3.3 EC 肉湯。
3.4 伊紅美藍瓊脂(EMB)。
3.5 營養瓊脂斜面。
3.6 色氨酸肉湯。
3.7 MR-VP培養基。
3.8 Korser氏枸椽酸鹽肉湯。
3.9 結晶紫中性紅膽鹽瓊脂(VRBA)。
3.10 Butterfield 氏磷酸鹽緩沖稀釋液。
3.11 生理鹽水。
3.12 革蘭氏染色液。
3.13 Kovacs氏靛基質試劑。
3.14 甲基紅指示劑。
3.15 Voges-pros kauer(V-P)試劑。

4 樣品制備
4.1 以無菌操作取有代表性的樣品。如有包裝則用75％乙醇在開口處擦拭後取樣。若不能
及時檢驗,應將冷凍樣品置於-15℃保存；非冷凍而易腐的食品,應置於4℃冰箱保存。檢
驗前冷凍樣品可於2～5℃ 18h內解凍,或在45℃以下15min內解凍。
4.2 不同食品樣品勻液的制備
4.2.1 液體食品
以滅菌吸管取樣25mL放入裝有225mL稀釋劑的滅菌玻璃瓶(瓶內預置適當數量的玻璃珠),
以30cm幅度、於7s內振搖25次(或以機械振盪器振搖),製成1:10的樣品勻液。
4.2.2 固體和半固體食品
以無菌操作取25 g樣品,放入裝有225 mL稀釋劑的滅菌均質杯內,於8000 r/min均質
1～2min,製成1:10樣品勻液(也可用滅菌乳缽研磨的方法代替)。
4.3 稀釋樣品勻液根據對樣品污染情況的估計,用稀釋劑將樣品勻液製成一系列十倍遞
增的樣品稀釋液,如10**-2、10**-3、10**-4……。從制備樣品勻液至稀釋完畢,全過程
不得超過15min。

5 大腸菌群的測定
5.1 大腸菌群MPN值的測定
5.1.1 對每個樣品,選擇適宜的三個連續稀釋度的樣品稀釋液。每個稀釋度接種三管月
桂基硫酸鹽胰蛋白(月示)(LST)肉湯,每管接種1mL。
5.1.2 將接種管置於36±1℃培養48±2h。
5.1.3 觀察試管的產氣情況：檢查倒管內是否有氣泡產生,記錄在24h和48h內產氣的LST
肉湯管數。如所有LST肉湯管均未產氣,則可報告為大腸菌群陰性；如有產氣者,則進一
步作證實試驗。

5.2 大腸菌群的證實試驗
5.2.1 將所有產氣管用直徑為3mm的接種環移種到煌綠乳糖膽鹽(BGLB)肉湯管中。
5.2.2 置BGLB肉湯管於36±1℃培養48±2h。
5.2.3 記錄所有BGLB肉湯管的產氣管數。
5.2.4 結果報告：按BGLB肉湯產氣管數,查MPN表[見附錄B (補充件)]報告每克(毫升)樣
品中大腸菌群的MPN值。

6 糞大腸菌群測定
6.1 用直徑為3mm的接種環將所有48±2h內產氣的LST肉湯管培養物移種於EC肉湯管中。
6.2 將所有接種的EC肉湯管在30min內放入帶蓋44.5±0.5℃水浴箱內,培養24±2h。水
浴箱的水平面應高於肉湯培養基液面。應以已知為44.5℃產氣陽性的大腸桿菌和44.5℃不
產氣的產氣腸桿菌或其他大腸菌群細菌作陽性和陰性對照。
6.3 記錄EC肉湯管的產氣情況。產氣管為糞大腸菌群試驗陽性；不產氣管為糞大腸菌群
試驗陰性。
6.4 結果報告：按產氣管數,查MPN表報告每克(毫升)樣品中糞大腸菌群的MPN值。

7 大腸桿菌測定
7.1 將6.3條中的EC肉湯管繼續培養24h,取其產氣管的培養物劃線接種於伊紅美藍(EMB)
平板,36±1℃培養24±2h。
7.2 檢查平板上有無具黑色中心有光澤或無光澤的典型菌落。
7.3 如有典型菌落,則從每個平板上至少挑取2個典型菌落；如無典型菌落,則從每個平
板上至少挑取2個可疑菌落。用接種針接觸菌落中心部位,移種到營養瓊脂斜面上,36±1℃
培養18～24h。
7.4 將斜面培養物移種到下列培養基中進行生化試驗。
7.4.1 色氨酸肉湯：在36±1℃培養24±2h後,加Kovacs氏試劑0.2～0.3mL,上層出現紅
色為靛基質陽性反應。
7.4.2 MR-VP培養基：在36±1℃培養48±2h。以無菌操作移取培養物1 mL至13mm×100mm
試管中,加5％α-萘酚乙醇溶液0.6mL,40％氫氧化鉀溶液0.2mL和少許肌酸結晶,振搖試
管後靜置2h,如出現伊紅色,為VP試驗陽性。
將MR-VP培養物的剩餘部分再培養48h滴加5 滴甲基紅溶液。如培養物變紅色,為甲基
紅試驗陽性,若變黃色則為陰性反應。
7.4.3 Koser氏枸椽酸鹽肉湯：於36±1℃培養96h記錄有無生長。
7.4.4 LST肉湯：於36±1℃培養48±2h,觀察試管中是否產氣。
7.4.5 革蘭氏染色：取18h營養瓊脂斜面培養物作革蘭氏染色。大腸桿菌為革蘭氏陰性。
7.4.6 大腸桿菌與非大腸桿菌生化鑒別如下：

━━━━━━┳━━━━━━┳━━━━━━┳━━━━━━┳━━━━━━━━━
靛 基 質┃ MR ┃ VP ┃ 枸椽酸鹽 ┃ 鑒定(型別)
━━━━━━╋━━━━━━╋━━━━━━╋━━━━━━╋━━━━━━━━━
＋ ┃ ＋ ┃ － ┃ － ┃典型大腸桿菌
－ ┃ ＋ ┃ － ┃ － ┃非典型大腸桿菌
━━━━━━╋━━━━━━╋━━━━━━╋━━━━━━╋━━━━━━━━━
＋ ┃ ＋ ┃ － ┃ ＋ ┃典型中間型
－ ┃ ＋ ┃ － ┃ ＋ ┃非典型中間型
━━━━━━╋━━━━━━╋━━━━━━╋━━━━━━╋━━━━━━━━━
－ ┃ － ┃ ＋ ┃ ＋ ┃典型產氣腸桿菌
＋ ┃ － ┃ ＋ ┃ ＋ ┃非典型產氣腸桿菌
━━━━━━┻━━━━━━┻━━━━━━┻━━━━━━┻━━━━━━━━━
如出現上表以外的生化反應類型,表明培養物可能不純,應重新劃線分離,必要時做
重復試驗。
7.5 結果報告：大腸桿菌為革蘭氏陰性無芽孢桿菌,發酵乳糖產酸產氣,IMViC試驗為＋＋
－－或－＋－－,再根據LST肉湯陽性管數查MPN表,報告每克(毫升)樣品中大腸桿菌MPN
值。

8 大腸菌群固體培養基測定法
8.1 樣品制備同第4章。
8.2 計數
8.2.1 選取適宜的三個連續稀釋度的樣品液,每個稀釋度接種兩個滅菌平皿,每皿1mL。
另取1mL稀釋劑加入一個滅菌平皿中,作空白對照。
8.2.2 將冷至45±0.5℃的結晶紫中性紅膽鹽瓊脂(VRBA)10～15mL傾注於每個平皿中。小
心旋轉平皿,將培養基與樣液充分混勻。
8.2.3 待瓊脂凝固後,再加3～4mL VRBA覆蓋平板表層。
8.2.4 翻轉平板,置於36±1℃培養18～24h。
8.2.5 選用有30～150個菌落的平板,計數平板上出現的典型大腸菌群菌落。典型菌落為
紫紅色,菌落周圍有紅色的膽鹽沉澱環。菌落直徑為0.5mm或更大。
8.2.6 證實
8.2.6.1 從VRBA平板上挑取10個不同類型的典型和可疑菌落,移種於BGLB肉湯管內, 36±
1℃培養24h和48h,觀察產氣情況。
8.2.6.2 將出現產氣的肉湯管判為大腸菌群陽性。對形成菌膜的陽性管,應進行革蘭氏
染色,以便排除革蘭氏陽性桿菌。
8.2.7 結果報告
經最後證實為陽性(產氣,革蘭氏陰性桿菌) 的試管百分比乘以於8.2.5條中計數的平
板菌落數,再乘以稀釋倍數,即為每克(毫升)樣品中大腸菌群數。
例：10**-4樣品稀釋液1mL,在VRBA平板上有100個典型和可疑菌落,挑取其中10個接
種BGLB肉湯管,證實有6個陽性管,則該樣品的大腸菌群數為：
100×6/10×10**4/g(mL)＝6.0×10**5/g(mL)

附 錄 A
培養基和試劑
(補充件)

A1 月桂基硫酸鹽胰蛋白(月示)(LST)肉湯
胰蛋白(月示)或胰酪腖(Trypticase) 20g
氯化鈉 5.0g
乳糖 5.0g
磷酸氫二鉀(K2HPO4) 2.75g
磷酸二氫鉀(KH2PO4) 2.75g
月桂基硫酸鈉 0.1g
蒸餾水 1000.0mL
將各成分溶解於蒸餾水中。分裝到有倒立發酵管的20mm×150mm試管中,每管10mL。
121℃高壓滅菌15min。最終pH6.8±0.2。

A2 煌綠乳糖膽鹽(BGAB)肉湯
蛋白腖 10.0g
乳糖 10.0g
牛膽粉(oxgall或oxbile)溶液 200.0mL
0.1％煌綠水溶液 13.3mL
蒸餾水
將蛋白腖乳糖溶於約500mL蒸餾水中,加入牛膽粉溶液200mL(將20.0g脫水牛膽粉溶於
200 mL蒸餾水中,pH7.0～7.5),用蒸餾水稀釋到975mL,調pH7.4。再加入0.1％煌綠水溶
液13.3mL,用蒸餾水補足到1000mL,用棉花過濾後,分裝到20mm×150mm試管(管內有倒立
的小發酵管)中,每管10mL。121℃高壓滅菌15min。最終pH7.2±0.1。

A3 EC肉湯
胰蛋白(月示)或胰酪(月示) 20.0g
3號膽鹽或混合膽鹽 1.5g
乳糖 5.0g
磷酸氫二鉀(K2HPO4) 4.0g
磷酸二氫鉀(KH2PO4) 1.5g
氯化鈉 5.0g
蒸餾水 1000.0mL
將以上成分溶解於蒸餾水中,分裝16mm×150mm試管(管內有倒立的小發酵管),每管
8mL。121℃高壓滅菌15min,最終pH6.9±0.1。

A4 伊紅美藍瓊脂(EMB)
蛋白腖 10.0g
乳糖 10.0g
磷酸氫二鉀(K2HPO4) 2.0g
瓊脂 15.0g
伊紅γ(水溶性) 0.4g或2％水溶液20mL
美藍 0.065g或0.5％水溶液13mL
蒸餾水 1000.0mL
在1000mL蒸餾水中煮沸溶解蛋白腖、磷酸鹽和瓊脂,加水補足至原量。分裝於三角燒
瓶中。每瓶100mL或200mL,高壓滅菌15min。最終pH7.1±0.2。使用前將瓊脂融化,於每
100mL瓊脂中加5mL滅菌的20％乳糖水溶液、2mL的2％伊紅γ水溶液和1.3mL0.5％的美藍水
溶液,搖勻,冷至45～50℃傾注平皿。

A5 營養瓊脂斜面
牛肉膏 3.0g
蛋白腖 5.0g
瓊脂 15.0g
蒸餾水 1000.0mL
將各成分加於蒸餾水中,煮沸溶解。分裝合適的試管。121℃高壓滅菌15min。最終
pH7.3±0.1。滅菌後擺成斜面備用。

A6 色氨酸肉湯
胰腖或胰酪腖 10.0g
蒸餾水 1000.0mL
加熱攪拌溶解胰腖或胰酪腖於蒸餾水中。分裝試管,每管5mL。121℃高壓滅菌15min。
最終pH6.9±0.2。

A7 MR-VP培養基
(月示)腖 7.0g
葡萄糖 5.0g
磷酸氫二鉀(K2HPO4) 5.0g
蒸餾水 1000.0mL
將各成分溶於蒸餾水中,分裝試管,121℃高壓滅菌15min,最終pH6.9±0.2。

A8 Koser氏枸椽酸鹽肉湯
磷酸氫銨鈉(NaNH4HPO4·4H2O) 1.5g
磷酸氫二鉀(K2HPO4) 1.0g
硫酸鎂(MgSO4·7H2O) 0.2g
枸椽酸鈉(含2H2O) 3.0g
蒸餾水 1000.0mL
將各成分溶解於蒸餾水中,分裝試管,每管10 mL,121℃高壓滅菌15min。最終pH6.7
±0.2。

A9 結晶紫中性紅膽鹽瓊脂(VRBA)
蛋白腖 7.0g
酵母膏 3.0g
乳糖 10.0g
氯化鈉 5.0g
膽鹽或3號膽鹽 1.5g
中性紅 0.03g
結晶紫 0.002g
瓊脂 15～18g
蒸餾水 1000.0mL
將上述成分溶於蒸餾水中,靜置幾分鍾,充分攪拌,調至pH7.4±0.1。煮沸2min,將
培養基冷至45～50℃傾注平板。臨用時制備,不得超過3h。

A10 Butterfield氏磷酸鹽緩沖稀釋液
貯存液
磷酸二氫鉀(KH2PO4) 34.0g
蒸餾水 500mL
將磷酸二氫鉀溶於蒸餾水中,用1 mol/L氫氧化鈉約175 mL調至pH7.2。用蒸餾水加至
1000mL貯存於冰箱。
稀釋液
取貯存液1.25mL, 用蒸餾水稀釋至1000mL,分裝於合適容器後,121℃高壓滅菌15min。

A11 生理鹽水
氯化鈉 8.5g
蒸餾水 1000.0mL
將氯化鈉溶於蒸餾水中,121℃高壓滅菌15min。

A12 革蘭氏染色液
結晶紫染色液：
結晶紫 1.0g
95％乙醇 20.0mL
1％草酸銨水溶液 80.0mL
將結晶紫完全溶解於乙醇中,然後與草酸銨溶液混合。
革蘭氏碘液：
碘 1.0g
碘化鉀 2.0g
蒸餾水 300.0mL
將碘與碘化鉀先行混合,加入蒸餾水少許充分振搖,待完全溶解後,再加蒸餾水至
300mL。
沙黃復染液：
沙黃 0.25g
95％乙醇 10.0mL
蒸餾水 90.0mL
將沙黃溶解於乙醇中,然後用蒸餾水稀釋。
染色法
a. 將塗片在火焰上固定,滴加結晶紫染液,染1min,水洗。
b. 滴加革蘭氏碘液,作用1min,水洗。
c. 滴加95％乙醇脫色約15～30s,直至染色液被洗掉,不要過分脫色,水洗。
d. 滴加復染液,復染1min,水洗、待干、鏡檢。
結果：革蘭氏陽性菌呈紫色,革蘭氏陰性菌呈紅色。

A13 Kovacs氏靛基質試劑
對二甲氨基苯甲醛 5.0g
戊醇 75.0mL
鹽酸(濃) 25.0mL
將對二甲氨基苯甲醛溶於戊醇中,然後慢慢加入濃鹽酸即可。

A14 甲基紅指示劑
甲基紅 0.1g
95％乙醇 300mL
將甲基紅溶解於300mL乙醇中,加水稀釋至500mL。

A15 Voges-Pros kauer(V-P)試劑
甲液
α-萘酚 5.0g
無水乙醇 100.0mL
乙液
氫氧化鉀 40.0g
用蒸餾水加至 100.0mL

附 錄 B
1g檢樣中最近似值(MPN)表
(補充件)

使用三管法,接種量分別為0.1,0.01和0.001g。

━━━━━━━━━┳━━━━┳━━━━━━━━━━┳━━━━
陽 性 管 數 ┃ ┃ 陽 性 管 數 ┃
━━━━━━━━━┫ MPN ┣━━━━━━━━━━┫ MPN
0.1 0.01 0.001 ┃ ｜ 0.1 0.01 0.001 ┃
━━━━━━━━━╋━━━━╋━━━━━━━━━━╋━━━━
0 0 0 ┃ ＜3 ┃ 2 0 0 ┃ 9.1
0 0 1 ┃ 3 ┃ 2 0 1 ┃ 14
0 0 2 ┃ 6 ┃ 2 0 2 ┃ 20
0 0 3 ┃ 9 ┃ 2 0 3 ┃ 26
0 1 0 ┃ 3 ┃ 2 1 0 ┃ 15
0 1 1 ┃ 6.1 ┃ 2 1 1 ┃ 20
0 1 2 ┃ 9.2 ┃ 2 1 2 ┃ 27
0 1 3 ┃ 12 ┃ 2 1 3 ┃ 34
0 2 0 ┃ 6.2 ┃ 2 2 0 ┃ 21
0 2 1 ┃ 9.3 ┃ 2 2 1 ┃ 28
0 2 2 ┃ 12 ┃ 2 2 2 ┃ 35
0 2 3 ┃ 16 ┃ 2 2 3 ┃ 42
0 3 0 ┃ 9.4 ┃ 2 3 0 ┃ 29
0 3 1 ┃ 13 ┃ 2 3 1 ┃ 36
0 3 2 ┃ 16 ┃ 2 3 2 ┃ 44
0 3 3 ┃ 19 ┃ 2 3 3 ┃ 53
━━━━━━━━━╋━━━━╋━━━━━━━━━━╋━━━━
1 0 0 ┃ 3.6 ┃ 3 0 0 ┃ 23
1 0 1 ┃ 7.2 ┃ 3 0 1 ┃ 39
1 0 2 ┃ 11 ┃ 3 0 2 ┃ 64
1 0 3 ┃ 15 ┃ 3 0 3 ┃ 95
1 1 0 ┃ 7.3 ┃ 3 1 0 ┃ 43
1 1 1 ┃ 11 ┃ 3 1 1 ┃ 75
1 1 2 ┃ 15 ┃ 3 1 2 ┃ 120
1 1 3 ┃ 19 ┃ 3 1 3 ┃ 160
1 2 0 ┃ 11 ┃ 3 2 0 ┃ 93
1 2 1 ┃ 15 ┃ 3 2 1 ┃ 150
1 2 2 ┃ 20 ┃ 3 2 2 ┃ 210
1 2 3 ┃ 24 ┃ 3 2 3 ┃ 290
1 3 0 ┃ 16 ┃ 3 3 0 ┃ 240
1 3 1 ┃ 20 ┃ 3 3 1 ┃ 460
1 3 2 ┃ 24 ┃ 3 3 2 ┃ 1100
1 3 3 ┃ 29 ┃ 3 3 3 ┃＞1100
━━━━━━━━━┻━━━━┻━━━━━━━━━━┻━━━━
注: ①本表採用3個稀釋度 [0.1g(mL)、0.01g(mL)和0.001g(mL)],每個稀釋度接種3管。
②表內所列檢樣量如改用1g(mL)、0.1g(mL)和0.01g(mL)時,表內數字應相應降低10
倍；如改用0.01g(mL)、0.001g(mL)和0.0001g(mL)時,則表內數字應相應增加10倍,其餘
類推。

━━━━━━━━━━━
附加說明：
本標准由中華人民共和國國家進出口商品檢驗局提出。
本標准由中華人民共和國秦皇島進出口商品檢驗局、安徽進出口商品檢驗局、山西進
出口商品檢驗局負責起草。
本標准主要起草人李桂生、湯鵬飛、於桂華。
本標准主要參考美國公職分析化學家協會(AOAC)法定分析方法第14版第46章(1984年)。
━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━
中華人民共和國國家進出口商品檢驗局1992-12-28批准 1993-05-01實施

❼ 大腸桿菌檢測方法國標是用什麼方法檢測的

大腸桿菌檢測方法分為三種：

1、細菌分離鑒定法

分離培養與鑒定：糞便標本直接接種腸道桿菌選擇性培養基。血液先經肉湯增菌，然後轉種血瓊脂平板。其他標本同時接種血瓊脂平板和腸道桿菌選擇性培養基。

37℃孵育18～24小時後，觀察菌落塗片染色鏡檢。腸致病性大腸桿菌須先作血清學定型試驗。必要的時候檢定腸黴毒素。

2、衛生細菌學檢查法

大腸桿菌會不斷隨糞便排出體外，污染周圍環境水源、食品等。取樣檢查時，樣品中大腸桿菌越多，則表示樣品被糞便污染的越嚴重，表明樣品中存在腸道致病菌的可能性也就越大。

大腸菌數指數：指每立升中大腸菌群數，採用乳糖發酵法檢測。中國衛生標準是每1000ml飲水中不得超過3個大腸菌群，瓶裝汽水和果汁中每100ml大腸菌群不能超過5個。

3、全自動微生物定量分析儀（TEMPO）檢測法

全自動微生物定量分析（TEMPO）儀大腸桿菌群計數檢測有TEMPOTC和TEMPOCC兩種方法。

TEMPOTC的開發是為獲得NF ISO4832標准相當性能水平。

TEMPOCC法是TEMPO儀器上根據BAM方法專門用於24h計數食品中大腸桿菌群方法。

(7)水中大腸桿菌檢測方法擴展閱讀：

大腸桿菌在生物技術中的應用

這些菌株由於失去了細胞壁等重要組分，所以在自然條件下已無法生長。甚至普通的清潔劑都可以輕易地殺滅這類菌株。即便由於操作不慎導致活菌從實驗室流出，也不易導致生化危機。

生物工程用的菌株基因組都被優化過，使之帶有不同基因型（例如β半乳糖苷酶缺陷型），可以更好的用於分子克隆實驗。

真核基因在大腸桿菌中表達，必須有合適的表達載體(Vector),常用載體：pBV220,pET系統。

目的基因在大腸桿菌中表達的情況：

大腸桿菌更適合原核基因的表達，外源基因表達產量與單位體積產量是正相相關的，外源基因拷貝數和表達 產物產量之間存在動態平衡，單個細胞的產量又與外源基因拷貝數，基因表達效率，表達產物的穩定性和細胞代謝負荷等因素有關。