維生素d定量檢測方法

1. 食品中維生素d 測定

簡要描述： 高效液相色譜法 1. 原理 樣品中脂溶性維生素在皂化過程中與脂肪分離，以石油醚萃取後，用正相色譜柱提取富集，用反相色譜柱，紫外檢測器定量測定。 2. 適用范圍 ...高效液相色譜法
1. 原理
樣品中脂溶性維生素在皂化過程中與脂肪分離，以石油醚萃取後，用正相色譜柱提取富集，用反相色譜柱，紫外檢測器定量測定。
2. 適用范圍
本方法來源於GB/T 5413.9-1997。適用於嬰幼兒配方食品和乳粉維生素A、維生素D、維生素E的測定；也適用於食品或強經食品及飼料中的維生素D含量的測定。
3. 主要儀器
1) 高壓液相色譜儀，具有可變波長的紫外檢測器，數據處理系統或記錄儀。
2) 旋轉蒸發器。
3) 平底燒瓶：250mL。
4) 分液漏斗：500mL。
4. 試劑
所有試劑，如未註明規格，均指分析純，所實驗用水均指蒸餾水。
1) 異丙醇：色譜純。
2) 2％焦性沒食子酸乙醇溶液：取2g焦性沒食子酸溶液於100mL無水乙醇中。
3) 75％氫氧化鉀溶液：取75g氫氧化鉀溶於100mL水中。
4) 石油醚：沸程30～60℃。
5) 甲醇：色譜純。
6) 正己烷：色譜純。
7) 環己烷:色譜醇。
8) 維生素D標准溶液
A. 維生素D2標准貯備液：含維生素D2100mg/ml的甲醇溶液。稱取10mg的維生素D2，用甲醇定容於100mL容量瓶中。
B. 維生素D3的標准貯備液：含維生素D3100mg/ml的甲醇溶液。稱取10mg的維生素D3，用甲醇定容於100mL容量瓶中。
5. 操作步驟
5.1樣品處理：准確稱取10g樣品，於250mL平底燒瓶中，加30mL蒸餾水。
5.2測定液的制備：
1) 於上述樣品溶液中加入100mL的20％沒食子酸乙醇溶液，充分混勻後加50mL75％氫氧化鉀溶液，在蒸汽浴上邊續迴流30min後，立刻冷卻到室溫。
2) 將皂化液轉入一500mL分液漏斗中，用100mL水分幾次沖平底燒瓶。洗滌液並入分液漏斗中。
3) 於上述分液漏斗中，加入100mL石油醚，蓋好瓶塞，倒置分液漏斗並劇烈振搖1 min.在振搖過程中，注意釋放瓶內壓力。靜置分層，將水相放入另一500mL分液漏斗中，重復上棕萃取過程2次，合並醚液到第一個分液漏斗中。用蒸餾水洗該醚液至中性，通過無水硫酸鈉過濾乾燥，在40℃和氮氣流下，於旋轉蒸發器上蒸至近於（絕不允許蒸干）後，用石油醚轉移至10mL容量瓶中，定容。
4) 從上述容量瓶中取7mL放入一試管中，用氮氣將石油醚吹乾，於試管中加1mL正己烷。
5.3測定：
1) 測定液的制備：
A) 儀器條件：
色譜柱：30cm×40cm，硅膠柱。
流動相：正己烷與環己烷按體積比1：1混合，並按體積分數0.8％加入異丙醇。
流速：1mL/min。
波長：265nm。
柱溫：20℃。
靈敏度：0.005AU/MV。
注射體積：200mL。
B) 注射50mL維生素D標樣和200mL樣品溶液，根據維生素D標樣保留時間收集維生素D於試管中，將試管用氮氣吹乾，准確加入0.2mL甲醇溶解。
2) 測定步驟：
A) 儀器條件：
色譜柱：4.6mm×25cm，C18或具同等性能的色譜柱。
流動相：甲醇。
流速：1mL/min。
波長：265nm。
柱溫：20℃。
靈敏度：0.005AU/MV。
注射體積：50mL。
B) 注射50mL維生素D標准溶液，注射50mL樣品溶液，得到標樣和樣品溶液中維生素D峰面積或峰高。
6. 計算
ρs×10∕7×40×100
X =
m
As
ρs= ---×ρsd
Asd
式中： X--樣品維生素D的量，mg/100g；
m--稱樣量，含量，IU∕100g；
ρs --進樣液中維生素D有濃度，mg/mL；
A s --進樣液中維生素D有峰高（或峰面積）；
A s d --標樣液中維生素D有峰高（或峰面積）；
ρsd --標樣中維生素D的濃度；
計算結果精確至小數點後一位。
7. 注意事項
1) 允許誤差及最小檢出量：同一樣品的2次測定值之差不得超過2次測定平均值的10％；最小檢出量為0.1國標單位。
2) 試劑焦性沒食子酸容易變性，應購習近期生產的試劑。
3) 如果皂化不完全，可適當增加氫氧化鉀的加入量。

2. 維生素d檢查之前吃飯喝水嗎

維生素d檢查之前可以吃飯喝水，對檢查結果沒影響，但是不能用食用維生素D3的維生素片等，檢查時要求應放鬆心情，配合醫生做好檢查。
維生素D(vitamin D)是類固醇的衍生物，分為迅此豎維生素D2和維生素D3。檢測維生素D主要通過以下方法測定：
1、血清25-羥維生素D3測定：25-羥維生素D3是維生素D3的主要代謝產物，測定其具有早期診斷的價值。
2、血畝大液生化檢查：其改變比X線影像顯示的骨扒御骼改變早。

3. 如果身體缺乏維生素ABCD，有什麼辦法可以自查

如果身體缺乏維生素ABCD，有什麼辦法可以自查？

維生素是體內必不可少的微量元素之一，如檢查維生素缺乏，需要到正規的三甲醫院掛內分泌科或者普內科行常規檢查。

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維生素是人體內必須的一種化合物質，缺乏維生素會導致人體出現各種各樣的疾病例如表麵皮膚乾燥、缺乏彈性、人體內缺乏營養物質，甚至會導致胃腸道功能減退及對營養物質的吸收、代謝能力降低從而引發各種繼發性疾病，引發胃潰瘍、胃炎等疾病，除此之外會導致患者精神狀態不佳、脾氣暴躁、記憶力下降等精神系統疾病，幼兒缺乏維生素會導致身體發育障礙。所以，缺乏維生素應該進行血液檢查，價格在20-50元不等，可以有效檢查出身體內缺乏的維生素。

4. 食品中維生素d檢測方法

食品中的維生素D的檢測方法很簡單的，只要用一些測量儀和試試劑就可以檢測出胃酸分泌的。

5. 維生素D3有那些方法學可以檢測出來

方法名稱：
維生素D3的測定—高效液相色譜法
應用范圍：
本方法採用高效液相色譜法測定維生素D3的含量。
本方法適芹啟用維生素D3。
方法原理：
供試品和內標均製成甲醇溶液，進入高效液相色譜儀進行色譜分離，用紫外吸收檢測器，於波長254nm處檢測維生素D3（C27H44O）和內標鄰苯二甲酸二甲酯的吸收值，計算出其含量。嫌友如
試劑：
1.異辛烷
2. 正己烷
3. 正戊醇
儀器設備：
1. 儀器
1.1 高效液相色譜儀
1.2 色譜柱
硅膠為填充劑，維生素D2峰與內標物質峰的分離度應符合要求。
1.3 紫外吸收檢測器
2. 色譜條件
2.1 流動相：正己烷+正戊醇= 997 3
2.2 檢測波長：254nm
2.3 柱溫：室溫
試樣制備：
1. 稱取供試品
精密稱取本品25mg，置100mL棕色量瓶中。
2. 對照品溶液的制備
精密稱取維生素D3對照品和維生素D3對照品25mg，置100mL棕色量瓶中，加異辛烷80mL，避免加熱，超告游聲處理1分鍾使完全溶解，並加異辛烷至刻度，搖勻，沖氮密塞，避光，0℃以下保存。
3. 內標溶液的制備
取鄰苯二甲酸二甲酯25mg，置25mL量瓶中，加正己烷溶解並稀釋至刻度，即得。
4. 供試品溶液的制備
上述供試品加三甲基戊烷80mL，避免加熱，用超聲處理1分鍾使溶解，加三甲基戊烷稀釋至刻度，搖勻，即得供試品溶液。
註：「精密稱取」系指稱取重量應准確至所取重量的千分之一。「精密量取」系指量取體積的准確度應符合國家標准中對該體積移液管的精度要求。
操作步驟：
分別精密吸取上述供試品溶液與對照品溶液，20μL 注入高效液相色譜儀，用紫外吸收檢測器，於波長254nm處測定維生素D3和內標鄰苯二甲酸二甲酯的吸收值，按內標法以峰面積計算，即得。

6. 葯明奧測維生素D檢測創新解決方案好不好

目前，全國多地正在推進疫情常態化，這促進了診療場景的進一步拓展，在社區、在第三方檢測機構、在轎慧塵家中，方便快捷地採集、檢測，已成為廣大人民群眾的普遍需求。葯明奧測維生素D檢測創新解決方案，開創性地利用了干血斑樣本（dried blood spot，DBS）進行血清總25-羥維生素D水平檢測，檢測者無需去醫院抽血，⌄在院外即可輕松完成采樣。其「金標准」質譜法，碧扮結果精準、過程便捷，DBS樣本與血液樣本檢測結果一致性達95%以上，打破了診療場閉禪景的局限，實現了高質量醫療服務的更廣覆蓋。

7. 維生素檢測用什麼分析儀器比較好

課程詳情介紹

維生素是消費者關注的營養成分之一，也是食品檢測行業的熱門項目。本課程結合維生素的類別、作用、檢測手段的發展歷史等，對目前國際國內各種維生素的測試方法及常用分析儀器進行講解。

本課程除了理論內容，我們還將安排學員進行實際操作練習，了解維生素測試的前處理過程及相關儀器分析技術。此外，我們還將給學員講解維生素測試的影響因素，並對如何消除這些因素、確保數據的准確性進行深入探討。

維生素檢測通常使用液相色譜儀。本課程根據維生素檢測所使用的液相色譜儀，詳細介紹其工作原理、結構特點和儀器維護要點，使學員掌握儀器的故障排查及日常維護方法。同時，講解液相色譜數據採集和處理方法的編輯過程，並安排練習，確保學員可以獨立操作液相色譜完成維生素日常檢測工作。
品質項目包括：

水分、含鹽量、含糖量、蛋白含量、脂肪含量、纖維含量、維生素含量、酸度等。對於這些項目的檢測，如果經費有限，都可以採用化學法分析，只需配製最簡單的烘箱、水浴、電爐、攪拌器、粉碎機、pH計等設備即可。

如果經費充足或檢驗批次較多，對應的檢測項目都有對應的專用儀器可供選購。此外，也有一些通用的儀器可供選購，如：紫外/可見分光光度計、近紅外分析儀、自動滴定儀等。檢測維生素A、E等有時還需配製熒光光度計。檢測營養元素，如，鈣、鋅、鐵等，可購置原子吸收儀-火焰檢測器。

(2)衛生項目包括：

微生物、添加劑、有害元素、農葯殘留、獸葯殘留、毒素等。對於一般食品企業，微生物檢測實驗室應該建。

（a)微生物：

建微生物實驗室要按照生物實驗室規范標准要求進行布局。必要的設備有潔凈台、培養箱、高壓滅菌鍋、電爐等，其它設備則根據具體檢測項目配置。經費少可以買國產的，經費多可以考慮買進口的，兩者的價錢相差很多。

（b)添加劑和有害元素：

有一部分項目可以用化學法，如，亞硝酸鹽、二氧化硫、重金屬含量、總砷等，但要想滿足現在國標的食品衛生要求，應該購置氣相色譜-氫火焰檢測器、液相色譜-紫外/可見光檢測器，這樣一般的防腐劑(苯甲酸、山梨酸等)、甜味劑(甜蜜素、糖精鈉等)、色素(檸檬黃、胭脂紅等)都可以檢測了。購置原子吸收儀-石墨爐檢測器，可以分別檢測鉛、鉻、鎘、銅、鎳等有害元素，還需要一台原子熒光儀，用來檢測砷和汞等。

（c)殘留農葯：

檢測殘留農葯氣相色譜必不可少，檢測有機氯農葯，需配電子俘獲ECD檢測器;檢測有機磷農葯，需配火焰光度FPD檢測器或氮磷NPD檢測器。現在，農殘檢測的項目越來越多，為提高通用性，建議配置毛細管柱分流/不分流進樣口，安裝毛細管色譜柱。與傳統填充色譜柱相比，毛細管柱分析項目多，分離度好，可以減少頻繁的更換色譜柱，提高分析效率。出口食品加工企業生產的產品在出口時需檢測的農殘項目越來越多，為了把好生產原料和產品質量關，可以配置氣相色譜-質譜儀。一般只需配製電子轟擊EI源，如果有必要可再配一個負化學NCI源，是選擇四級質譜還是離子阱質譜，個人認為都可以，兩種儀器各有優缺點。還是要看具體工作。

（d)殘留獸葯：

若進行殘留獸葯的檢測，項目不多且批次多，可以考慮配製酶聯免疫儀，該儀器一次投入不大，操作簡便，檢測靈敏度高。採用ELISA也有一些缺點，一是試劑盒為長期的消耗品，若檢測的批次少，成本會較高，二是特異性不好，可能會有假陽性，三是如果在相對長的一段時間內檢測項目較多，成本甚至比儀器分析還高。對於有一定規模的出口食品企業，為適應當前歐盟、美國、日本等發達國家檢測限量要求，最好配製一台液相色譜-串聯質譜儀。第一台儀器建議配置三重四級質譜儀，靈敏度高、重現性好。儀器不一定要追求高配置，夠用就行，但靈敏度、穩定性、抗污染等性能要好。最好買用戶較多的型號，有一個與自己檢測項目相近的用戶群，首先說明該型號儀器檢測擬檢的項目沒有問題，其次，也便於今後技術交流。