煙鹼液相色譜檢測方法

『壹』 液相色譜儀使用步驟是什麼

高效液相色譜儀的使用

1.色譜柱它包括空柱和填料。空柱是內壁拋光的不銹鋼管，內徑為4～5mm，長100～250mm。按氣相色譜法中洗滌空柱的方法洗凈，用勻漿法填充固定相。將此柱裝入儀器的管路中，用柱式機械往復泵輸入新鮮脫氣的流動相。等基線平直後可用苯、萘、菲的混合試液，用正己烷(含 0.05%甲醇)或甲醇：水(83：17)為流動相測定柱效及分離度塔板數在2～3萬/ml以上及分離度在1.5以上者，柱效好。為防止柱污染，常用1個 50mm長，4~5mm內徑，裝有硅膠(40-50mm)或立柱相同填料的保護柱(預柱)接在主柱之前，以延長色譜柱的壽命。反相鍵合相柱用畢。必須用水充分流經，以洗去鹽類、酸鹼等雜質防止柱生銹及填料中雜質的積聚，再用甲醇流經洗滌使色譜柱獲得再生。

2.流動相的洗脫方式配好經脫氣的流動相放於貯液瓶中，經過有濾過頭、內徑2mm的聚四氟乙烯管流入高壓泵進入色譜柱，最後自檢測器流出或收集或作廢液回收。用流動相洗脫的方式有恆溶劑脫洗法(isocratic dlution)，即自洗脫開始到結束，溶劑的配比恆定。另一類為梯度洗脫法(gradicnt clution),即使溶劑的極性強度在色譜過程中逐漸增加。須按一定程序不斷改變流動相的濃度配比，從而使同一個試樣中組分性質相差較小的及較大的都能在一次色譜過程中很好分離，而整個色譜過程縮短。必須注意，梯度洗脫法不能用於分子排阻色譜及用電化學檢測的反相高效液相色譜法中。

3.檢測器適用於血葯濃度的檢測器有紫外線吸收，熒光發射和電化學三種。紫外檢測器應用於對紫外光有吸收的葯物，大多數葯物分子對紫外光有吸收，故能較普遍採用，檢測限有0.1μg左右。紫外檢測器有固定波長型、可變波長型及掃描器，既能使流動相停流作組分的定性定量檢測，又能提高測定靈敏度，重現性較好。熒光發射檢測器對能產生熒光的葯物才能使用。80年代應用激光替代氙燈光源，光強度增加了3~4倍，對某些葯物的檢測限可達pg級。電化學檢測器是由一個碳糊或破碳做成的蒲層電解池。常用於檢測兒茶酚胺類及有酚類基團的各種葯物和代謝物。流出組分進入2μl的薄層電解池，在一暄電壓下電解產生電流，放大後檢測，檢測限pg級。

4.數據處理現代高效液相色譜儀帶有數據處理系統，除記錄譜外，還能自動記錄峰的保留時間，能自動積分求算峰面積，並能按照預定的程序作有關計算，報告分析結果。

高效液相色譜儀使用過程中常見問題及其解決方法

1 液相色譜儀系統

液相色譜儀主要由貯液瓶、泵、進樣器、柱、柱溫箱、檢測器、數據處理系統組成(如圖1所示)。對於整個系統而言，柱子、泵和檢測器是核心部件，同時也是容易出事故的主要場所。

2 常見問題及解決方法

2.1 針對柱壓問題(表1)

柱壓問題是使用高效液相色譜過程中需要密切注意的地方，柱壓的穩定與色譜圖峰形的好壞、柱效、分離效果及保留時間等密切相關。所謂柱壓穩定並不是指壓力值穩定於一個恆定值，而是指壓力波動范圍在50PSI之間。壓力過高、過低及波動較大都屬於柱壓問題，但柱壓的高低與色譜柱的種類、品牌、液相系統本身及使用的流動相種類相聯系。值得注意的是在使用梯度洗脫時，進柱壓的平穩緩慢的變化是允許的。

在實際應用中柱壓過高可從以下幾個方面來考慮[1]。首先考慮柱子是否被堵，此時可更換一根新柱子進行檢測。

2.2 針對保留時間漂移的問題 [2，3] (表2)

保留時間的改變是很多液相色譜使用者常碰到的問題，其包括了保留時間增大和減小。它的產生與很多原因有關。

2.3 針對異常色譜峰問題[2-4]

異常的色譜峰指的是色譜圖中無峰或出現負峰、寬峰、雙峰、肩峰、峰形不對稱等情況。具體情況與原因分析如表3。

3 高效液相色譜儀的保養[5-7]

3.1 HPLC的日常操作條件

工作溫度10～30℃; 相對濕度<80%; 最好是恆溫、恆濕，遠離高電干擾、高振動設備。

3.2 泵的保養

使用流動相盡量要清潔;進液處的沙芯過濾頭要經常清洗;流動相交換時要防止沉澱;避免泵內堵塞或有氣泡。

3.3 進樣器的保養

每次分析結束後，要反復沖洗進樣口，防止樣品的交叉污染。

3.4 柱的保養

柱子在任何情況下不能碰撞、彎曲或強烈震動;當柱子和色譜儀連接時，閥件或管路一定要清洗干凈;要注意流動相的脫氣; 避免使用高粘度的溶劑作為流動相;進樣樣品要提純;嚴格控制進樣量;每天分析工作結束後，要清洗進樣閥中殘留的樣品;每天分析測定結束後，都要用適當的溶劑來清洗柱;若分析柱長期不使用，應用適當有機溶劑保存並封閉。

3.5 檢測器(UV)的保養

紫外燈的保養要在分析前、柱平衡得差不多時，打開檢測器;在分析完成後，馬上關閉檢測器。同時樣品池要保養。

4 結語

在高效液相色譜使用過程中故障排出時要遵守以下原則：一次只改變一個因素，從而確定假定因素與問題之間的聯系;如果通過更換組件來排查故障時要注意將拆下的完好組件裝回原位，從而避免浪費;養成良好的記錄習慣，一個良好的記錄是成功地進行故障排除的關鍵。

總之，在使用高效液相色譜時一定要注意樣品的前處理與儀器的正確操作和保養，儀器系統的干凈是用好儀器和維護維修儀器的關鍵。

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『貳』 液相色譜怎麼選擇檢測方法

簡單說9個字「出得來」、「分得開」、「跑得快」

出得來：所要檢測的物質要能被檢測到。要針對物質的特性要考慮檢測器的選用及參數設定，以及流動洗脫力的強弱。
分得開：所有的檢測組份要能完全分離，之間不相互干擾。要考慮流動相溶劑的選擇；比例的優化；流動相PH的控制，是否要加離子對試劑；色譜柱的選型等凡是影響色譜分離因素都要考慮到。以進行優化。
跑得快：在滿足可檢測性與完全分離的條件下，進一步優化各項條件，以達到快速檢測，降低分析運行時間，提高檢測效率。

你所說的「10——90， 5——35,60——100，45——95等」應該是指的梯度洗脫吧？

『叄』 如何建立高效液相色譜法測定含量的方法

1 色譜條件的確定
專屬性是色譜條件建立的關鍵通常是採用
在被測物對照品(或供試品)中加入適量的雜質或輔
料以驗證所選色譜條件能否將各雜質與被測物
分離檢出
[2]
。應按1(w/w)被測物濃度的各雜質量
添加至被測物中模擬被測物中可能存在雜質的
狀態即有少量(約1)雜質存在時能否與被測物
達到完全分離(分離度大於1.5)以驗證系統適用
性。只有這樣才能較為客觀、科學地反映被測物的
實際情況。而不應將被測物與各雜質配製成相同濃
度的溶液因為實際檢測中不可能存在這種情況
且該濃度也不易確定。在實際檢測時由於被測物
濃度較大很易將相鄰雜質峰包含其中。另外還需
測定溶劑和輔料(檢測制劑時)是否有干擾。目前
美國葯典(USP)、英國葯典(BP)及許多進口產品的
質量標准中有關物質測定方法學的專屬性驗證均
採用此法。還須說明的是雜質與雜質峰間的分離
度達1.2即可而被測物與其相鄰雜質峰的分離度
必須大於1.5。
2 檢測波長的選擇
有關物質檢測的研究對象是雜質而非被測
物。但測定則是通過各自的峰面積來表達故波長
的選擇必須考慮被測物和各雜質在檢測波長下的校
正因子(f)是否相同。應分別制備相同濃度的被測
物與各雜質溶液經紫外掃描後以吸光度相近的波
長為檢測波長。在該檢測波長下分別進樣測定
由各峰面積計算校正因子。若f為0.81.2則表明
被測物與各雜質的f相同可消除f的影響。若f≤0.8
或f ≥1.2則應在計算時加入f。目前通常以被測物
的最大吸收波長為檢測波長、不加校正因子的計算
方法而未綜合考慮各雜質的f。
3 供試品溶液濃度的確定
供試品溶液濃度的確定也非常重要。雖然濃度
越高越能反映被測物中雜質存在的情況但若設定
過高會產生主峰嚴重拖尾、裂峰、柱超載和檢測器超載等情況若設定過低則靈敏度不夠無法
檢測雜質及其含量變化。
最低檢出濃度的測定可分為信噪比法和直接評
價法兩種
[3]
。後法是目前較為科學的做法即將儀
器的靈敏度調至較適宜的值(僅對靈敏度可調節的
儀器而言目前市場上主流品牌的液相色譜儀均已
設定了一個恆定、較為靈敏的值)然後將被測物
溶液不斷稀釋後進樣測定直至被測物峰面積無法
檢出為止此時的濃度即為最低檢出濃度。
最大進樣量則是採用不斷增加被測物溶液濃
度直至峰嚴重拖尾、裂峰、柱超載和檢測器超載
等情況出現。
根據最低檢出濃度採用「上推法」來確定
供試品溶液濃度如一般設定雜質總量小於1.0
對照液對照溶液的濃度至少應為最低檢出濃度的
2050倍供試品溶液濃度則應是最低檢出濃度的
20005000倍。同時還應考慮儀器、色譜柱等因
素對最低檢出濃度和最大進樣濃度的影響(即耐用
性因素)所以供試品溶液的濃度應在保證小於最
大進樣量的情況下適當設定得高些以保證該濃
度在任何試驗條件下均有足夠的檢測靈敏度。表
1為最低檢出濃度、最大進樣量、供試品溶液和對
照溶液間的比例關系(進樣量10µl規定雜質限度
1.0)。
4 線性試驗
在穩定性考察中如某雜質含量不斷增加
則說明被測物降解的途徑穩定、可循則有必要對
該雜質進行針對性地監控即採用該雜質對照品
(經確證結構後由人工合成獲得)以外標法准確測
定。此時與含量測定相似應進行線性試驗。
通常將雜質限度設定為該雜質的100濃度線性
驗證范圍10150(即相當於被測物測定濃度
表1 最低檢出量、最大進樣量、供試品溶液和對照
溶液間的比例關系
參數濃度/µg·ml
–
1
絕對量/ng相當於供試品
溶液濃度/與最低檢出
濃度的倍數
最大進樣量3000
最低檢出濃度0.110.02
供

『肆』 如何正確的進行液相色譜法的含量檢測

要得到准確可靠的HPLC定量結果你需要：
1.
有準確可靠的標准品來源和正確的配製過程。
2.
正確樣品的前處理比儀器參數的設置更為重要，消除被測組分可能存在的干擾物。
3.
有合適分離度的柱子，確保被測組分可以完全分離。
4.
選擇合適的流動相，採用等度洗脫還是梯度洗脫看被測組分間的分離效果。
5.
確保儀器的有良好的穩定性，否則請選擇一個合適的內標物校正。液相的穩定性通常還比較好，若液相的穩定很差，表明儀器存在著嚴重的故障需要立即進行維修。
6.
選擇合適的檢測器，一般來講選擇性的檢測器（如DAD,FLD,VWD）靈敏度高於通用性檢測器（如RID），通用性檢測器不適合測定痕量水平的組分，對不同含量水平的被測組分，選擇合適的檢測器非常重要。

『伍』 液相色譜儀操作及原理

工作原理：

流動相通過輸液泵流經進樣閥，與樣品溶液混合，流經色譜柱，在色譜柱中進行吸附、分離，最後每一組分分別經過檢測器轉變為電訊號，在色譜工作站上出現相應的樣品峰。

液相色譜儀操作過程：

1、開機操作：

①打開液相色譜儀電源，用Harb相連接時，注意Harb電源，打開計算機，打開Bootp Server(一般啟動時已打開）。

②自上而下打開個組件電源，Bootp Server里顯示有信號時（有六行字元），打開工作站（先打開Online)。

③打開沖洗泵頭的10%異丙醇溶液的開關（需用針捅抽），控制流量大小，以能流出的Z小流量為准。

④注意各流動相所剩溶液的容積設定，若設定的容積低於Zdi限會自動停泵，注意洗泵溶液的體積，及時加液。

⑤使用過程中要經常觀察液相色譜儀工作狀態，及時正確處理各種突發事件。

2、先以所用流動相沖洗系統一定時間（如所用流動相為含鹽流動相，必須先用水沖洗20分鍾以上再換上含鹽流動相），正式進樣分析前30min左右開啟D燈或W燈，以延長燈的使用壽命。

3、建立色譜操作方法，注意保存為自己命名的Method，勿覆蓋或刪除他人的方法及實驗結果。

4、使用液相色譜儀手動進樣器進樣時，在進樣前和進樣後都需用洗針液洗凈進樣針筒，洗針液一般選擇與樣品液一致的溶劑，進樣前必須用樣品液清洗進樣針筒3遍以上，並排除針筒中的氣泡。

5、溶劑瓶中的沙芯過濾頭容易破碎，在更換流動相時注意保護，當發現過濾頭變臟或長菌時，不可用超聲洗滌，可用5%稀硝酸溶液浸泡後再洗滌。

6、實驗結束後，一般先用水或低濃度甲醇水溶液沖洗整個管路30分鍾以上，再用甲醇沖洗。沖洗過程中關閉D燈、W燈。

7、關機時，先關閉泵、檢測器等，再關閉工作站，然後關機，Z後自下而上關閉液相色譜儀各組件，關閉洗泵溶液的開關。

8、使用者須認真履行液相色譜儀使用登記制度，出現問題及時向老師報告，不要擅自拆卸儀器。

『陸』 液相色譜儀使用及工作原理。

工作原理：

流動相通過輸液泵流經進樣閥，與樣品溶液混合，流經色譜柱，在色譜柱中進行吸附、分離，最後每一組分分別經過檢測器轉變為電訊號，在色譜工作站上出現相應的樣品峰。

液相色譜的使用：

首先對樣品進行預處理，然後進樣，進樣完畢後，清洗進樣口，每次分析結束後，清洗通道，最後關閉儀器。

(6)煙鹼液相色譜檢測方法擴展閱讀：

液相色譜所用基本概念：保留值、塔板數、塔板高度、分離度、選擇性等與氣相色譜一致。液相色譜所用基本理論：塔板理論與速率方程也與氣相色譜基本一致，但由於在氣相色譜中以液體代替氣相色譜中氣體作為流動相，而液體和氣體的性質不相同。

此外，液相色譜所用的儀器設備和操作條件也與氣相色譜不同，所以，液相色譜與氣相色譜有一定的差別。

主要有以下幾力『面：

①操作條件及應用范圍不同

對於氣相色譜，是加溫操作。僅能分析在操作溫度下能汽化而不分解的物質，對高沸點化合物、非揮發性物質、熱不穩定化合物、離子型化合物及高聚物的分離、分析較為困難，致使其應用受到一定程度的限制，據統計只有大約20%的機物能用氣相色譜分析。

而液相色譜是常溫操作，不受樣品揮發度和熱穩定性的限制，它非常適合相對分子量較大，難汽化，不易揮發或對熱敏感的物質、離子型化合物和高聚物的分離分析，大約佔有機物的70%~80%。

②液相色譜能完成難度較高的分離工作

a.氣相色譜的流動相載氣是色譜惰性的，基本不參與分配平衡過程，與樣品分子無親和作用，樣品分子主要與固定相相互作用。而在液相色譜中流動相液體也與固定相爭奪樣品分子，為提高選擇性增加了一個因素。也可選擇不同比例的兩種或兩種以上的液體做流動相，增加分離的選擇性。

b.液相色譜固定相類型多，如離子交換色譜和排阻色譜等，作為分析時，選擇餘地大；而氣相色譜並不可能。

c.液相色譜通常在室溫下操作，較低的溫度，一般有利於色譜分離條件的選擇。

③由於液體的擴散性比氣體的小105倍，因此，溶質在液相中的傳質速率慢，柱外效應就顯得特別重要；而在氣相色譜中，由色譜柱外區域引起的擴張可以忽略不計。

④液相色譜中，制備樣品簡單，回收樣品也比較容易，而且回收是定量的，適合於大量制備，但液相色譜尚缺乏通用的檢測器，一起比較復雜，價格昂貴。在實際應用中，這兩種技術是相互補充的。

綜上所述，液相色譜具有柱效高，選擇性高，靈敏性高，分析速度快，重復性好，應用范圍廣等優點，該法已成為現代分析技術的主要手段之一。目前在化學，化工，醫葯，生化，環保，農業等科學領域獲得廣泛的應用。

高效液相色譜應用非常廣泛，幾乎遍及定量定性分析的各個領域。

(1)分離混合物

高效液相色譜法只要求樣品能製成溶液，不受樣品揮發性的限制，流動相可選擇的范圍寬，固定相的種類繁多，因而可以分離熱不穩定和非揮發性的、離解的和非離解的以及各種分子量范圍的物質。

通過與試樣預處理技術相配合，高效液相色譜法所達到的高解析度和高靈敏度，可分離並同時測定性質上十分相近的物質，能夠分離復雜混合物中的微量成分。並且隨著固定相的發展，還可在充分保持生化物質活性的條件下完成對其的分離。

(2)生化分析

由於高效液相色譜法具有高解析度、高靈敏度、速度快、色譜柱可反復利用，流出組分易收集等優點，因而被廣泛應用到生物化學、食品分析、醫葯研究、環境分析、無機分析等各種領域，並已成為解決生化分析問題最有前途的方法。

(3)儀器聯用

高效液相色譜儀與結構儀器的聯用是一個重要的發展方向。高效液相色譜一質譜聯用技術受到普遍重視，如分析氨基甲酸酯農葯和多核芳烴等：高效液相色譜一紅外光譜聯用也發展很快，如在環境污染分析測定水中的烴類等．使環境污染分析得到新的發展

『柒』 高效液相色譜儀分析樣品的步驟有哪些

一、預處理：
1、固體樣品：含水較低，粉碎過篩。含水量較高，取使用部分烘乾後，粉碎過篩。
2、液體樣品：攪拌混合均勻。
3、特殊樣品：根據實驗要求進行特殊處理。
二、提取：
1、浸提法(固-液萃取法)：將樣品浸泡在溶劑中，把固體樣品中的某些組分浸出。
2、萃取法(液-液萃取法)：利用被提取組分在互不相溶的兩種溶劑中分配系數的不同實現分離。
三、凈化：
1、萃取法：適用於液體樣品，少量多次。
2、化學法：通過使雜質或待測物發生化學反應而改變其溶解性，使其與原體系分離。
3、層析法：利用混合物中各組分理化性質的不同，使各組分在支持物上的移動速度不同，而將各組分分離。
四、濃縮：
1、常壓濃縮：通過升高溫度，將溶劑由液態轉化成氣態被抽走，從而達到濃縮目的。適用於揮發性和沸點相對較低的樣品。
2、減壓濃縮：通過抽真空，使容器內產生負壓，在不改變樣品化學性質的前提下降低樣品的沸點，使一些高溫下化學性質不穩定或沸點高的溶劑在低溫下由液態轉化成氣態被抽走，從而達到濃縮目的。
3、冷凍乾燥：冷凍的同時抽真空減壓，使溶劑升華。適用於生物活性樣品。
4、氮吹儀www.cnpetjy.com濃縮：採用氮氣對加熱樣品進行吹掃，使樣品迅速濃縮，達到快速分離純化的效果。適用於農殘檢測和制葯行業等樣品的批量處理。

『捌』 高效液相色譜法檢測保健食品中肉鹼的含量要怎麼檢測

高效液相色譜法檢測保健食品中肉鹼的含量

1范圍

建立了高效液相色譜法測定保健食品中肉鹼含量的方法。

本法適用於以肉鹼為主要原料的保健食品中肉鹼的測定。

2原理

用0.5mmol/l鹽酸溶液超聲提取樣品中的肉鹼，用反相高效液相色譜法分離。標准樣品的保留時間是定性的，外部標准方法是定量的。

3試劑和材料

註：除非另有規定，本方法所用試劑均為分析純，水為GB/T 6682規定的一級水。

3.1 試劑

3.1.1 磷酸氫二鉀（K2HPO4）。

3.1.2辛烷磺酸鈉(C8H19NaO3S)。

3.1.3 鹽酸（HCl）。

3.1.4磷酸（H3PO4）。

3.1.5硅藻土（SiO2）：化學純。

3.1.6乙腈(C2H3N)：色譜純度。

3.2 試劑配製

3.2.1鹽酸溶液（0.50 mmol/L）：吸收4.2 ml鹽酸，用水稀釋，體積為100 ml。然後取1mL上述溶液，用水稀釋，定容至1L·L~(-1)。

3.2.2緩沖液：分別稱取磷酸氫二鉀8.7g，辛烷磺酸鈉0.4325g，溶於水，稀釋至1L，用磷酸調節至pH 2.5。

3.3 標准品

肉鹼（C7H15NO3）：純度≥98%或經國家認證認可的標准物質..

3.4 標准溶液配製

3.4.1肉鹼標准儲備液（1.0 mg/ml）：肉鹼標准品25 mg（精確至0.1 mg）精密稱取25 ml容量瓶中，溶於鹽酸溶液中，定容至刻度，搖勻。

3.4.2肉鹼標准工作液：標准肉鹼標準保留液在5 mL瓶中，用鹽酸稀釋至規模化，經0.50 mL、1.0 mL、2.0 mL、3.0 mL、4.0 mL、5.0 mL准確吸收，得到0.10 mg/mL、0.20 mg/mL、0.40 mg/mL、0.60 mg/mL、0.80 mg/mL、1.0mg/mL的標准工作液。

4儀器

4.1高效液相色譜法：配備紫外檢測器或二極體陣列檢測器。

4.2平衡：靈敏度為0.1mg和0.01mg

4.3 超聲波提取器。

5分析步驟

5.1 試樣制備

5.1.1 試樣處理

5.1.1.1 固體試樣

樣品粉碎混合均勻稱取0.1g~2g（精確至0.001g）（含待測組分約5mg~50mg）。將鹽酸溶液加入50ml容量瓶中，超聲提取10min，冷卻，用鹽酸溶液稀釋至刻度，混勻，過濾，計數一次濾液毫升數，收集濾液，經0.45um水相膜過濾，取連續濾液進行檢測。

5.1.1.2 軟膠囊試樣

樣品被切開、擠壓和混合，重量為0.1g≤2g(精確到0.001g)，加入相同量的硅藻土，進行均勻分散研究，並說其中一部分(精確到0.001g，約5 mg~50 mg)，被測組分用塞狀三角瓶轉移到250 ml，吸收鹽酸溶液50 ml，加入三角瓶，稱重，填充超聲萃取10 min，冷卻，與鹽酸溶液混合，在毫升中丟棄初始濾液，收集濾液，經過0.45μm的水相濾膜，取濾液進行測量。

5.1.1.3 液體試樣

精密測量：1毫升～5毫升（含約5毫克～50毫克的待測組分），35毫升鹽酸溶液加入50毫升容量瓶，超聲提取10分鍾，冷卻，用鹽酸溶液稀釋，混合，過濾，丟棄一級濾液毫升，收集濾液，通過0.45微米水相濾膜，取連續濾液進行測定。

5.1.2 稀釋

根據樣品中肉鹼的含量，將溶液中的肉鹼稀釋至0.10mg/mL~1.0mg/mL。用鹽酸溶液。

5.2 色譜參考條件

5.2.1柱：C18柱：4.6*250 mm，5微米或同性能柱。

5.2.2流動相：緩沖溶液90 10。

5.2.3流量：0.8ml/min。

5.2.4 檢測波長：210nm。

5.2.5 進樣量：20μL。

5.3 標准曲線的製作

將肉鹼標准工作液(3.4.2)分別從低濃度到高濃度注入高效液相色譜(HPLC)中，並測定相應的峰面積。以標准工作液濃度為橫坐標，峰面積為縱坐標繪制標准曲線

5.4待測溶液的測定

在相同的色譜條件下，將待測液（5.1.1.1，5.1.1.2，5.1.1.3，5.2.1）注入高效液相色譜法按保留時間定性測定峰面積，按標准曲線計算待測溶液中肉鹼的濃度

6 分析結果的表述

試樣中肉鹼含量按式（1）計算：

X—固體樣品中肉鹼含量為g/100g，液體樣品中肉鹼含量為g/100ml。

根據每毫升毫克標准曲線(毫克/毫升)計算待測溶液中肉鹼的濃度。

V—試樣的稀釋體積，單位為毫升（ml）；

M/L-取樣質量，以克(G)為單位；抽樣量，以毫升(毫升)為單位；

F——稀釋倍數；

100——單位轉換；

1000——單位轉換。