Ⅰ 臨床化學檢驗血液標本的採集和處理
臨床化學檢驗血液標本是指為完成某項或多項臨床化學檢驗項目而採集的一定量的血液,包括抗凝及非抗凝血。
(一)採取部位
1.靜脈采血:應用最多的采血方式。常用的靜脈為肘前靜脈、腕背靜脈,小兒和新生兒有時用頸靜脈和前囟靜脈。
2.動脈采血:主要用於血氣分析時。常用的動脈為股動脈、肱動脈、橈動脈和臍動脈。
3.毛細血管采血:適用於僅需微量血液的試驗或嬰幼兒。常用部位為耳垂、指端,小兒有時為大趾和足跟。采血針刺入皮膚深度應為2mm(<2.5mm),采血局部應無炎症、水腫等。
(二)標本類型
臨床化學檢驗血液標本分為血清、血漿和全血3種。血清和血漿為臨床常用,除前者不含纖維蛋白原外,其餘多數化學成分無差異;全血只有在紅細胞內成分與血漿成分相似時才用;血氣分析、血紅蛋白電泳等時用全血,一般臨床化學分析多不用全血。
血液標本採取後應盡可能早地自然地使血清(漿)從與血細胞接觸的全血中分離出來。一般應於采血後2h內分離出血清或血漿。全血處理為血清或血漿分為離心前、離心中和離心後三個階段,對各不同階段均有具體要求。
(一)離心前階段
即指標本採集到離心處理前的一段時間。
1.血清:標本離心前一般應令其自行凝集,不可用木棍等剝離凝血塊。通常於室溫(22~25oC)放置30~60min血標本可自發完全凝集;冷藏標本凝集緩慢;加促凝劑時凝集加快(標本採集後應輕輕顛倒混合5~10次,以確保促凝劑作用)。
2.血漿:需用血漿標本時,必須使用含抗凝劑的血液標本收集管,而且采血後必須立即輕輕顛倒采血管混合5~10次(以確保抗凝劑發揮作用),5~10min後即可分離出血漿。
3.冷藏標本:標本冷藏可抑制細胞代謝,穩定某些溫度依賴性成分?但全血標本一般不能冷藏;血鉀測定標本冷藏不得超過2h。血液中兒茶酚胺、pH/血氣、氨、乳酸、丙酮酸、胃泌素、甲狀腺激素等檢測時需用製冷的標本。
標本需要冷藏(2~8oC)時,標本採取後應立即將標本置於冰屑或冰水混合物(不可用大冰塊),並且必須保證標本與製冷物充分接觸,保證製冷物達到標本的高度。
4.代謝抑制劑和防腐劑:某些添加劑加入血液標本中能抑制細胞代謝,可以防止血液標本貯存時分析物濃度的變化。血液葡萄糖測定時,如在血液中加入氟化鈉,在血細胞未分離的情況下,葡萄糖在22~25oC時可穩定24h,2~8oC時可以穩定48h;但在新生兒和兒童標本,由於紅細胞壓積高,用氟化鈉難以控制細胞的糖酵解作用;甲醛-草酸鉀抗凝保存劑不適合血糖測定;氟化鈉-麝香草酚混合劑因能抑制酶活性,不適用於酶學測定。
5.標本採集現場:(1)標本採集後應盡快送往實驗室,尤其當收集區溫度超過22oC時此點更為重要;(2)血液標本採集後血管必須加塞、管口向上、垂直放置,以減少管中內容物振動,促進凝血完全,防止標本蒸發、污染和外濺等;(3)已收集的血液標本應溫和地處理,要防止標本管振盪所造成的溶血;溶血可影響測定結果。有嚴重影響(使結果升高)的項目有:乳酸脫氫酶、血清門冬氨酸氨基轉移酶、血清鉀和血紅蛋白;引起值得注意的影響的項目有:血清鐵(↑)、血清丙氨酸氨基轉移酶(↑)和血清甲狀腺素(↓);輕度受影響(增加)的有:總蛋白、白蛋白、血清磷、血清鎂、血清鈣和酸性磷酸酶;(4)應避免對光線敏感的分析物暴露在人造光或太陽光(紫外線)照射下。如VA、VB6、β-胡蘿卜素、卟啉、膽紅素等測定時,標本管應該用鋁箔或類似物質包裹保護起來。
6.標本運送:全血標本應盡快從采血現場運送至實驗室,如果運送距離較遠,特別是因分析物穩定性有影響,必要時可於采血現場分離出血清或血漿後,再送往實驗室;標本運送過程中要注意標本的包裝、溫度要求、處理方法等,要確保分析成分的穩定性;標本管在運送過程中要保持管口封閉、向上垂直放置。
7.實驗室接受標本及離心標本准備:(1)要有標本收取記錄(應認真核對檢驗中清單,對有關情況要認真記錄,標本接收及處理應簽字登記);(2)對接受的標本要予以分類准備離心;(3)實驗室接受標本後應仍保持標本管於密閉封口、管口向上,垂直位放置。管塞移去後血中CO2丟失,會造成pH增加,離子鈣和酸性磷酸酶減少,尤其pH變化會影響某些檢測結果的准確性;(4)標本凝集時間要充分;加抗凝劑的血液標本可以立即離心;加促凝劑的標本可於采血後5~15min盡早離心;抗凝的全血標本(鋅、鋰、原卟啉等測定時)可以不離心;(5)冷藏(2~8oC)標本應保持這個溫度直到准備離心。推薦用溫度控制離心機;(6)離心標本前不主張用小木棒或類似器材去剝離附著於試管壁和管塞上的凝塊,人為剝離會誘導溶血。如果必須露出試管壁或取下管塞時,一定要十分注意,動作一定要輕柔。
(二)離心階段
即指標本處於離心機里的一段時間。
1.離心時間和相對離心力(RCF):臨床化學分析血液標本離心時,RCF(1000~1200)×g,離心時間為5~10min。
2.溫度控制離心:離心時產熱不利於分析物穩定,臨床化學分析血液標本離心時必須採用溫度控制離心機。一些溫度依賴性分析物(如促腎上腺皮質激素、環腺苷酸、兒茶酚胺等)應在4oC分離;無特殊溫度要求的分析物,離心溫度應設定在20oC~22oC;溫度低於15oC可以人為地使血鉀測定值增高;冷藏運送的標本必須在要求的溫度下離心。
3.關於再離心:標本離心最好一次完成,若需再次離心,應距上次離心相隔時間很短;對於含有分離物質的血標本絕不可以再離心。