廣州病毒檢測方法

1. 廣州華銀檢測中心電話檢測結果慢啊

在迎戰新型冠狀病毒肺炎疫情的過程中，體外診斷企業扮演了重要的角色。根據網路數據，2018年國內體外診斷產業市場約為600億，體外診斷產業被納入廣州市發展IAB產業的重點領域。廣州市黃埔區、廣州開發區是廣州生物產業發展的核心區。目前全區聚集超過600家生物醫葯企業，生物醫葯產業規模占廣州市60%以上，體外診斷是其中一項核心產業。
據悉，區內企業達安基因、萬孚倍特、華銀醫葯、和信健康、微遠基因、賽默飛世爾等在1月25日前已經研發出新型冠狀病毒檢測試劑盒。廣州金域醫學檢驗中心、雲康廣州達安臨床檢驗中心、華銀醫學檢驗中心及凱普醫學檢驗所等為承擔廣東省重點人群排查的核酸檢測工作的第三方檢測機構。
近日，南都記者就針對病毒的核酸檢測產品的特點、緊急時期產品審批過程、第三方檢測機構的檢驗流程等邀請企業的多位專家揭秘。
頂級醫學雜志《柳葉刀》(The Lancet)公布的新型冠狀病毒(2019-nCoV)彩色照片。
每日檢測5000到1萬份樣本
篩查是疫情防控中重要的一環，及時找出傳播者，切斷傳播源，檢測機構在其中承擔著重要的責任。
「我們安排檢驗人員三班倒工作，保證儀器24小時不停機。」金域醫學感染性疾病學科負責人劉勇表示，隔天早上，各家醫院和患者就能收到檢驗中心的反饋結果。作為全國最大的第三方醫檢機構，金域醫學此前調動了200多名PCR檢驗員、3000人的醫療冷鏈物流團隊積極投入疫情防控工作。早在2018年，金域醫學便在廣州呼吸健康研究院專家團隊的指導下，按照P2+實驗室建設標准建設了「臨床呼吸道病毒診斷與轉化中心」。作為廣東省「三個必查」的主力軍，從1月30日起，金域醫學採用國家批準的新試劑和新檢驗方法，把篩查速度提升至原來的5倍，把日檢測樣本能力提升到1萬人份。
雲康廣州達安臨床檢驗中心參與了廣州市3個行政區與廣東省7個地市的發熱門診篩查工作，春節前後，達安臨檢實驗室迅速布局擴大PCR檢測實驗場所，組織200餘人的技術團隊，承擔起每日1萬例的樣本篩查任務，樣本量超出往常日產能數倍之多。華銀醫學檢驗中心也啟動了14台PCR擴增儀和相關配套儀器，每日可檢測5000份樣本。
短期研發成功在於過往的積累
據了解，早在1月13日，達安基因在獲得新型冠狀病毒的基因序列數據後，迅速開展研發，第一時間研製出《新型冠狀病毒（2019）核酸檢測試劑盒（PCR-熒光探針法）》，成為首批全國發布研製針對性檢測試劑盒的兩個廠家之一，同時也是廣東省內首家。
在該區廣州科學城的華銀醫葯，在1月13日就研發出《新型冠狀病毒2019-nCoV核酸檢測試劑盒（熒光PCR法）》，劑型可選常規液體或全組份凍干。微遠基因用5天時間即研製成功《新型冠狀病毒（2019-nCoV）核酸檢測試劑盒（恆溫CRISPR法）》。萬孚生物子公司萬孚倍特在1月20日宣布成功研發出新型冠狀病毒呼吸道病原體多重核酸檢測卡，打造出全自動全封閉的新型冠狀病毒呼吸道病原體多重核酸檢測模式。
華銀醫葯的研發總監蔣軍解釋說，之所以能在這么短時間內研發出來，在於以往的積累。「冠狀病毒常見的幾個亞型我們都有扎實的技術儲備，我們獲得第一條新型冠狀病毒序列時，就馬上啟動新項目研發，在基因序列差異最大的區域設置檢測靶點，並對新設計的實驗方案進行驗證，以最快的速度推出第一代產品。隨著後續各種相關信息的增加，不斷進行優化與評估。」
而緊急情況下，試劑產品的審批程序也縮短了。「常規的話，要先將報告送到臨檢所檢測，產品性能達到後要找3家醫院做臨床驗證，再通過省級報到國家批准，」凱普生物只使用了9天的時間開發出試劑產品，目前他們的試劑產品還在等待答辯。謝龍旭介紹說，應急審批流程目前省略了中間倫理審批環節（臨床試驗方案及附件是否合乎道德），「特殊時期，在中科院武漢病毒所，廣東疾控中心的樣本檢測結果都可以當成臨床數據來上報。」
實時熒光RT-PCR技術特異性強、靈敏度高
檢測病毒的方法有哪些？為什麼熒光RT-PCR技術成為首選？目前主要的根據國家發布的《新型冠狀病毒感染的肺炎診療方案（試行第五版）》，目前在鼻咽拭子、痰、下呼吸道分泌物、血液、糞便等標本中可檢測出新型冠狀病毒核酸。疑似病例具有呼吸道標本或血液標本實時熒光RT-PCR檢測新型冠狀病毒核酸陽性，或呼吸道標本或血液標本病毒基因測序，與已知的新型冠狀病毒高度同源。
雲康集團中心實驗室主任尹傑介紹說，「實時熒光PCR技術，是利用熒光探針在病毒核酸存在時通過酶的外切水解作用釋放熒光，由PCR儀實時記錄熒光強度，通過熒光強度分析判斷是否有病毒核酸的存在。」
蔣軍表示，目前檢測新型冠狀病毒的方法除了實時熒光RT-PCR鑒定，還有基因測序和膠體金免疫層析法等，「目前的檢測手段是PCR方法學，優點是特異性強、靈敏度高、快速、准確，可以實現一管多檢。膠體金免疫層析法的靈敏度不夠，在病毒濃度低的時候，會導致漏檢。基因測序比較慢，價格也比較昂貴，適合科學研究但不適合作為篩查手段。」
金域醫學呼吸道疾病學科帶頭人、金域醫學新型冠狀病毒肺炎疫情防控轉項小組檢驗組專家陳敬賢博士表示，還可以通過檢查病人呼吸道標本中有無病毒的抗原成分。但是這個方法研發周期比較長，目前最好的就是核酸檢測。
加入內標保證檢測質量
一般來說，試劑產品檢測靶點能覆蓋1-3個病毒基因靶點。如由達安基因研發的檢測試劑盒包含單基因、雙基因、三基因檢測，產品檢測樣本類型包括咽拭子、肺泡灌洗液和痰液，配合全自動提取設備，實驗全程自動化處理。
華銀醫葯的產品覆蓋冠狀病毒3個靶點（ORF1a/b基因、N基因、S基因）及1個內源性內標RNase P基因。中山大學達安基因股份有限公司生產的新型冠狀病毒2019-nCoV核酸檢測試劑盒（熒光PCR法）檢測可同時檢測新冠病毒的（ORF1a/b基因、N基因）。
企業在開發產品中還會加入內標，作為參照對比，保證檢測質量。凱普生物科技股份有限公司首席科學家、副總經理謝龍旭博士介紹說,「凱普生物目前已經開發了兩個平台，熒光PCR法和基因測序作為對比篩查。」PCR檢測體系包含有內標引物，即人RNA B2M基因，來監測樣本採集、提取過程，避免假陰性結果；另外設置防污染措施（加入一種酶），將可能存在的PCR產物污染充分降解，避免引起的假陽性結果。「熒光PCR法用於初篩，測出陽性，我們使用基因測序進行再確認。」
華銀醫葯應臨床機構的要求，則在產品中加入人源性內參基因RNase P的檢測，滿足臨床對樣本質量控制的需要，降低假陰性率。
新產品正在研製中，最快30分鍾出結果
早發現、早隔離是阻斷新型冠狀病毒傳播的最關鍵、最有效的途徑。定量檢測、快速檢測和快速確診，同時滿足常溫運輸、保存及使用，成為研發機構的重點攻克方向。
尹傑向記者介紹了檢測的流程：一次檢測從樣本處理到檢測完成大約需要3-3.5小時。過程大概包括2部分，一是核酸提取，通過自動化設備完成核酸提取，減少試驗人員與樣本的接觸時間，大約30-40分鍾；二是核酸檢測，將提取的核酸加入到PCR反應液中放入PCR儀中完成擴增檢測，此過程大約110分鍾。」
近日，為了研發新型冠狀病毒常溫快速檢測試劑盒，位於廣州科學城的廣納信捷與國家納米中心的研發人員從年前開始，研發團隊對引物和探針進行了理論設計和實驗優化，使用迄今為止最高效的轉錄酶和擴增體系，不僅提高了擴增效率，而且大大降低了假陽性率。
廣納信捷董事長馬萬順介紹，該技術可以從新型冠狀病毒感染的肺炎疑似病例、疑似聚集性病例患者的血液、尿液、呼吸道分泌物等樣本中，即可確診新型冠狀病毒ORF1a/b基因和N基因、E基因，最快30分鍾可出結果。
據悉，廣州國際生物島的廣州再生醫學與健康廣東省實驗室也正在加快開發一種可以實現即時檢測的方法，使用咽拭子，該技術只需要簡易儀器即可在30分鍾確定測試對象是否感染了新型冠狀病毒，對檢測環境的要求大幅降低。
核酸檢測是直接區別新型冠狀病毒感染的直接證據
近日，有媒體報道稱多地出現感染者在確診為陽性之前，多次核酸檢測為陰性。如2月7日，新京報報道一位武漢到北京的發熱肺炎患者三次咽拭子核酸檢測為陰性，通過肺泡灌洗檢測才發現新冠病毒核酸陽性。
「如果標本採集不當、標本存放時間過長（病毒及核酸發生降解）等都會造成PCR檢測結果出現假陰性。」蔣軍表示，「任何一種檢測手段都有該方法學的檢測極限濃度，低於這個濃度的檢測結果可靠性就會降低，甚至檢測不到。目前的技術水平來說，RT-PCR的分子檢測已經是檢測極限濃度最低、適合篩查的方法學。」
尹傑也表示，標本採集與標本保存時間不合適造成的假陰性情況比較多見。此外，他提出，有研究顯示少數患者的感染部位僅限下呼吸道，而不在鼻咽部，所以咽拭子反復檢測都是陰性，而CT顯示症狀不斷加重的情況是存在的，對於這種特殊患者建議取下呼吸道的肺泡灌洗液用來做冠狀病毒核酸檢測。
多位企業專家均表示，CT無法區別患者感染了哪種病毒，而核酸檢測能直接甄別出是新型冠狀病毒還是其它微生物感染，是直接的確診證據。
一號樓工作室出品
采寫：南都記者 張伊欣

2. 做一次病毒核酸檢測要經歷什麼過程需要多少費用

新冠病毒是可怕的，現在國內正在千方百計尋找和發現感染源、以及核酸檢測發現被感染者，那麼做一次病毒核酸檢測要經歷什麼過程？需要多少費用呢？本文就來簡單分享一下這方面的知識：

然後再將樣本試管放入密封袋中送檢，在這個過程中需要在2-8℃中保存。檢測時先將病毒滅活後進行核酸提取，最後進行熒光PCR擴增反應和核酸檢測。整個過程需要約6小時，如果第一次檢測結果「陽性」，還需要再重復操作一次進行復核，所以一份陽性報告至少需要12小時。因為核酸檢測的過程非常高危，所以進行采樣工作的醫生，防護措施要更加嚴格，除了全套防護服之外，他們還要另加一個頭套，肩膀以上的部位，全部都在頭套里。檢驗醫生在檢測室中要做的工作繁多而復雜，總共有十幾個步驟，主操作手常常要連續好幾個小時，保持雙手懸空操作，而且不能輕易離開操作平台。而這次疫情中，檢測病毒核酸是非常緊急任務，面對眾多需要檢測的核酸樣本，檢驗醫生的辛苦就不言而喻了，可以說，通過上述介紹，我們必須致敬疫情中這些可敬的醫生們！

3. 怎樣使用試劑盒檢測

《應用方案》）。今天（4月13日），廣州市疫情防控新聞發布會上透露，即日起，白雲區的街鎮交叉進行核酸檢測和抗原檢測。另據了解，今天市內其他部分區域居民、部分高三師生中也使用了抗原檢測的方法進行篩查。

什麼是新冠病毒抗原檢測？和核酸檢測相比有什麼不同？檢測前、操作中、檢測後各有什麼需要注意的事項？廣州日報·新花城記者采訪疾控專家、檢驗科專家進行了解，更特邀專家示範「抗原自測12步」。專家提醒，做完抗原自測後，有一個關鍵步驟切莫做錯，否則可能前功盡棄！

測抗原：操作簡便出結果快

廣州市疾病預防控制中心病毒免疫部副部長李魁彪介紹，從檢測原理上來說，抗原就像病毒外面所穿的「衣服」，而核酸則是病毒裡面的基因，新冠病毒抗原檢測法的原理是檢測標本中是否存在新冠病毒蛋白。

抗原檢測試劑盒約兩根手指長寬，就像一個U盤大小，和核酸檢測方法相比，操作簡便，出結果快。中山大學附屬第一醫院醫學檢驗科劉敏主任表示，根據現有檢測技術，做新冠病毒核酸檢測最快要一小時才能獲得結果。抗原檢測只需要十幾分鍾，並且不需要特殊的儀器檢測，在家裡就可以做，是核酸檢測的有效補充手段。

「抗原檢測在家裡或是基層醫療機構都可以使用，就像用驗孕棒檢測是否懷孕一樣簡單。居民在家自測如果不會自采鼻咽拭子，采咽拭子也是可以的。」李魁彪說。

看準了！這三類人適用抗原檢測

李魁彪表示，根據3月11日國家衛健委發布的《新冠病毒抗原檢測應用方案（試行）》明確指出，抗原檢測適用人群包括三類：

第一類是基層醫療衛生機構就診，伴有呼吸道、發熱等症狀且出現症狀5天以內的人員；

第二類隔離觀察人員，包括居家隔離觀察、密接和次密接、入境隔離觀察、封控區和管控區內的人員；

第三類是有抗原自我檢測需求的社區居民。

4. 誰知道廣州市番禺石基人民醫院是用什麼方法檢測hiv

檢測方法編輯
檢測HIV感染者體液中病毒抗原和抗體的方法，操作方便，易於普及應用，其中抗體檢測尤普通。但HIv P24抗原和病毒基因的測定，在HIV感染檢測中的地位和重要性也日益受到重視。

抗體檢測
抗體檢測
血清中HIV抗體是判斷HIV感染的間接指標。根據其主要的適用范圍，可將現有HIV抗體檢測方法分為篩檢試驗和確證試驗。
確證試劑
篩檢實驗陽性血清的確證最常用的是Western blot（WB），由於該法相對窗口期較長，靈敏度稍差，而且成本高昂，因此只適合作為確證實驗。隨著第三代和第四代HIV診斷試劑靈敏度的提高，WB已越來越滿足不了對其作為確證實驗的要求。
FDA批準的另一類篩檢確證試劑是-免疫熒光-試驗（IFA）。IFA比WB的成本低，而且操作也相對簡單，整個過程在1-1.5小時內即可結束。此法的主要缺點是需要昂貴的熒光檢測儀和有經驗的專業人員來觀察評判結果，而且實驗結果無法長期保存。現在FDA推薦在向WB不能確定的供血員發布最終結果時以IFA的陰性或陽性為准，但不作為血液合格的標准。
篩檢試驗
篩檢試驗主要用於對供血員進行篩查，因此要求操作簡便，成本低廉，而且靈敏、特異。2012年，世界上主要的篩檢方法仍然是ELISA，還有少數的顆粒凝集試劑和快速ELISA試劑。ELISA有很高的靈敏度和特異性，操作簡單，僅需要實驗室配備酶標儀和洗板機即可應用，特別適合於試驗室大規模篩檢使用。
顆粒凝集實驗是另一種操作簡單方便，成本低廉的檢測方法，該方法結果可通過肉眼判定，靈敏度很高，特別適合發展中國家或大量篩選供血員時使用，缺點是必須使用新鮮樣品，特異性較差。
80年代後期發展起來的斑點印跡檢測（Dot-blot assay）是一種快速ELISA（Rapid ELISA）方法，這種方法操作極為簡便，過程短暫，整個過程多數在5-10分鍾內甚至3分鍾內即可結束，但該法比ELISA和顆粒凝集試劑昂貴得多。
人類免疫缺陷病毒抗體口腔粘膜滲出液檢測試劑盒（膠體金法）就屬於側向免疫層析法（金免疫）類別，基於免疫層析技術通過手工操作、肉眼讀取結果、20分鍾即可定性得出檢測結果的快速診斷試劑，用於檢測口腔粘膜滲出液樣本中的HIV-1型和HIV-2型抗體。可用於自願咨詢檢測、不願采血、暈針患者的初篩。該方法適用於初篩檢測，凡由該試劑測定為陽性者，需進行進一步篩查確認。[3]
【HIV陰性】說明從人體內檢測不到HIV抗體，陰性符號以（-）表示。不能說沒有感染HIV, 要看是什麼時候檢測的，在窗口期內，感染者的體內還沒有產生HIV抗體，或還沒有產生足量的HIV抗體，這時HIV檢測是陰性結果，如果在窗口期之後檢測的，可以排除感染HIV的可能。
【HIV陽性】說明從人體內檢測到了HIV抗體，陽性符號以（+）表示。
【檢測結果不定因素】
感染還處於窗口期：從HIV進入體內到檢測這段時間還不夠長，因此血清還沒有形成典型的抗體反應
艾滋病進展到終末期，抗體水平下降
其他非病毒蛋白抗體的交叉反應：自身免疫性疾病、某些惡性疾病、懷孕、輸血或器官移植等情況下，身體可以產生一些抗體，其反應與HIVP24核心蛋白抗體引起的反應很相似

抗原檢測
病原檢測主要指用病毒分離培養、電鏡形態觀察、病毒抗原檢測和基因測定等方法從宿主標本中直接檢測病毒或病毒基因。由於前兩種方法難度大，且需要特殊設備和專業技術人員。因此僅抗原檢測和RT-PCR(反轉錄－PCR)可用於臨床診斷。HIV-1P24抗原檢測可用於HIV-1抗體不確定或窗口期的輔助診斷；HIV-1抗體陽性母親所生嬰兒早期的輔助鑒別診斷；第四代HIV-1抗原/抗體ELISA試劑檢測呈陽性，但HIV-1抗體確認陰性者的輔助診斷。P24抗原檢測一般用ELISA雙抗體夾心法試劑，試劑必須經過SDA批准注冊、在有效期內，其陽性結果必須依據試劑說明書經中和試驗確認。HIV-1P24抗原檢測的敏感性為30-90%，該結果僅作為HIV感染的輔助診斷依據，不能據此確診；HIV-1 P24抗原檢測陰性只表示在本試驗中無反應，不能排除HIV感染，臨床中一般不作為常規診斷項目。

核酸檢測
HIV核酸檢測可用於HIV感染的輔助診斷、病程監控、指導治療方案及療效判定、預測疾病進展等。常用的HIV病毒載量檢測方法包括逆轉錄PCR實驗（RT-PCR）、核酸序列擴增實驗（NASBA）、分支DNA雜交實驗（bDNA）以及實時熒光定量PCR技術。值得注意的是，每一種HIVRNA定量系統都有其最低檢測限，即可以測出的最低拷貝數或國際單位，RNA定量檢測時未測出不等於樣品中不含有病毒RNA，因此HIV核酸定性檢測陰性，只可報告本次實驗結果陰性，但不能排除HIV感染；HIV核酸檢測陽性，可作為診斷HIV感染的輔助指標，不能單獨用於HIV感染的診斷。報告HIV核酸定量檢測結果時應按照儀器讀數報告結果，註明使用的實驗方法、樣品種類和樣品量，當測定結果小於最低檢測限時，應註明最低檢測限水平。
HIV核酸定性檢測也可用於HIV感染的輔助診斷，在分析HIV基因亞型和變異等基礎研究中應用。通常使用PCR或RT-PCR技術，使用分子生物學實驗室通用的擴增試劑，引物可來自文獻或自行設計，應盡量覆蓋所有或常見的毒株，也可使用復合引物。報告定性檢測結果時應註明反應條件和所使用的引物序列。此外，利用核酸檢測方法的高度敏感性，使用集合核酸擴增檢測技術和方法，對高度懷疑感染人群且抗體陰性的樣品進行集合核酸檢測，可及時發現窗口期感染者。該方法較單份樣品的核酸檢測具有更高的成本效益。

試紙上有兩條線。上面為質控線也叫對照線，下面的叫檢測線。

檢測時如果只顯示上面一條結果為陰性，如果顯示兩條判讀為陽性，
如果只有下面一條或者一條也沒有為無效結果，建議復測。aware天貓