『壹』 怎麼檢測蔬菜和水果的激素農葯殘留
農葯殘留的檢測技術，常見的有化學速測法、免疫分析法、酶抑製法和活體檢測法等。
化學速測法，主要根據氧化還原反應，水解產物與檢測液作用變色，用於有機磷農葯的快速檢測，但是靈敏度低，使用局限性，且易受還原性物質干擾。
免疫分析法，主要有放射免疫分析和酶免疫分析，最常用的是酶聯免疫分析（ELISA），基於抗原和抗體的特異性識別和結合反應，對於小分子量農葯需要制備人工抗原，才能進行免疫分析。
酶抑製法，是研究最成熟、應用最廣泛的快速農殘檢測技術，主要根據有機磷和氨基甲酸酯類農葯對乙醯膽鹼酶的特異性抑制反應。
活體檢測法，主要利用活體生物對農葯殘留的敏感反應，例如給家蠅餵食樣品，觀察死亡率來判定農殘量。該方法操作簡單，但定性粗糙、准確度低，對農葯的適用范圍窄。
『貳』 蔬菜水果中有機磷農葯的殘留如何檢測
攜帶型農葯殘留速測儀及卡片的檢測原理和使用方法攜帶型農葯殘留速測儀是根據國家標准方法GB/T5009.199 — 2003 )速測卡法(紙片法)而專門設計的儀器.主要用於果,蔬,茶,糧食,水及土壤中有機磷和氨基甲酸酯類農葯的快速檢測,特別適用於農產品質量檢測站的快速檢測,果蔬生產基地和專業戶採摘前田間地頭檢測,農貿批發銷售市場現場檢測,酒樓,食堂,家庭果蔬茶加工前安全檢測. 檢測原理: 儀器的檢測原理是利用速測卡中的膽鹼酯酶(卡②)可催化靛酚乙酸酯(卡①)水解為乙酸和靛酚,由於有機磷和氨基甲酸酯類農葯對膽鹼酯酶的活性有強烈的抑製作用,因此,根據顯色的不同,即可判斷樣品中含有機磷或氨基甲酸酯類農葯的殘留情況.①② 使用方法:(1)開機 按住面板上的"開 / 關"鍵約2秒鍾,儀器開機(開機後再次按次鍵可關機):按[模式]鍵切換至"溫度",當溫達到40℃時,儀器發出一聲提示音,預熱完成,可以開始測試.(2)裝片 將速測卡撕去上蓋膜對折後再展開,插入壓紙條下的各通道加熱板上(注意卡①一端在上方,卡②一端在下方),檢查速測卡放置位置是否正確,速測卡中間的虛線應與壓條對齊,不要歪斜.(3)取樣 選擇有代表性的蔬菜或瓜果皮 ,擦去表面泥土,剪成一平方厘米左右碎片,取5克放入帶蓋瓶中,加入10毫升純凈水或緩沖溶液震盪50次(有條件擁護可配備超聲波清洗器攪拌),靜置2分鍾以上,每批最好做9個檢樣,同時做一個純凈水或緩沖液的空白對照,每剪完一個樣品,尖刀要洗凈後方可處.理另一個樣品,以免交駐污染.用移液搶取80微升樣品液加到白色葯片上. 如果檢測是在采樣現場或條件簡陋的情況下進行,可直接在待檢蔬菜葉尖部位滴2-3滴洗脫液,用另一片菜葉尖部在滴液處輕輕摩擦,使蔬菜表面的殘留農葯充分溶入洗液中.然後滴一滴在(卡②)上.(4)測試 按〈啟動〉鍵,反應開始倒計時10分鍾("反應"指示符亮)當聽到儀器發出急促的蜂鳴提示音時關閉上蓋,顯色開始倒計時3分鍾("顯色"指示符亮):待儀器出緩和的蜂鳴提示音時,打開儀器上蓋,進行結果判定.結果判定與空白對照卡比較,若(卡②)不變色或略有淡黃色均為陽性結果,不變黃為強陽性結果,說明農葯殘留量較高,顯黃色色為弱陽性結果,說明農葯殘留量機對較低.(卡②)變為橘黃色或與空白對照卡相同,為陰性結果.附加說明本方法是生物化學反應,應盡可能避免一些物理和化學因素對酶活性的影響.反應最適酸鹼度為PH7.5左右,檢樣偏酸或偏鹼時應改用磷酸緩沖液浸提處理. 反應中,葯片表面應保持濕潤,最好將每一批樣品處理好後統一加樣,以免是過長蒸發干. 蔥,蒜,蘿卜,芹菜,茭白,蘑菇及番茄汁液中含有對酶活性有影響的植物次生物質,容易產生假陽性.處理這類樣品時,不宣剪切過碎,浸提時間不宜過長,以免液汁過多釋放影響檢測檢測結果.必要時可採用整株(體)蔬菜浸提的方法進行測定.農葯速測卡在常溫條件下有效期為壹年,貯存時要求放在陰涼,乾燥和避光處,有條件者放於4℃冰箱中最佳.農葯速測卡開封後最好在三天內用完,如一次用不完可存放在乾燥器中.農葯速測卡果蔬農葯殘留快速檢測卡是用對農葯高度敏感的膽鹼酯酶和顯色劑做成的酶試紙,可以快速檢測蔬菜中有機磷和氨基甲酸酯這兩大類用量較大,毒性較高的殺蟲劑的殘留情況,選用的酶對甲胺磷敏感,抗干擾性強,操作簡便,不需要配製試劑,不需要專業的技術培訓,可以不需要任何儀器設備單獨使用,也可配套農葯殘留快速檢測儀使用,提高檢測效率.產品容易貯存,攜帶方便,是現場檢測的最佳方法.
『叄』 如何測定蔬菜中殘留農葯
一般常用兩種方法：
酶抑製法和色譜法
酶抑製法：
原理：有機磷和氨基甲酸酯類農葯能抑制昆蟲中樞和周圍神經系統中乙醯膽鹼酶的活性，造成神經傳導介質乙醯膽鹼的積累，影響正常傳導，使昆蟲中毒致死，根據這一昆蟲毒理學原理，用在對農葯殘留的檢測中。加入反應試劑後，用分光光度計測定吸光值隨時間的變化值，計算出抑制率，判斷蔬菜中含有機磷或氨基甲酸酯類農葯的殘毒情況。 乙醯膽鹼酯酶+有機磷或氨基甲酸酯類農葯——→酶活性被抑制
乙醯膽鹼酯酶+樣本提取液——→
1. 活性被抑制——→樣本中含有有機磷或氨基甲酸酯類農葯
2.活性正常 ——→樣本中不含有有機磷或氨基甲酸酯類農葯
如以乙醯硫代膽鹼（AsCh）為底物，在乙醯膽鹼酯酶（AchE）的作用下乙醯硫代膽鹼（AsCh）水解成硫代膽鹼和乙酸，硫代膽鹼和二硫雙對硝基本甲酸（DTNB）產生顯色反應，使反應液呈黃色，在分光光度計410nm處有最大吸收峰，用分光光度計可測得酶活性被抑製程度（用抑制率表示）。
速測卡用的也是這個原理，但是這個方法只能只能知道或許含有有機磷和氨基甲酸酯類農葯。而且不能定性定量的檢測，只是一個表徵。
色譜法：
前處理過程，取3KG的樣品，用食品加工機打碎，然後稱取25克，加入乙腈提取液均漿，過濾，加入食鹽，震盪，靜置分層，然後去上層有機相10毫升，到氮吹儀上吹至近干，用丙酮轉移，定容到5毫升，混勻，過膜，裝入1.5毫升的樣品瓶中，上氣相色譜儀（FPD），外標法，能檢測有機磷，講吹近乾的提取液，用正己烷烷、正己烷和丙酮的混合液轉移，過弗洛里矽柱到15毫升，再氮吹至5毫升以下，用正己烷定容到5毫升，轉移到樣品瓶，上氣象色譜儀（ECD）能檢測有機氯農葯。
其他種類的農葯，吡啶類、除草劑等就要上液相色譜儀，或者是質譜儀！
『肆』 有機磷農葯(OrganophosphatePestcides)的測定
氣相色譜法
方法提要
敵敵畏、馬拉硫磷、甲基對硫磷等有機磷農葯可溶於丙酮、二氯甲烷等有機溶劑，經丙酮、二氯甲烷混合溶劑-加速溶劑提取、凈化後，毛細管柱分離-氣相色譜-火焰光度檢測器檢測。
方法適用於土壤中敵敵畏、樂果、甲胺磷、速滅磷、內吸磷、甲基對硫磷、久效磷、二嗪磷、殺螟硫磷、馬拉硫磷、倍硫磷、對硫磷等多組分殘留量的測定。當取樣量為10g時，檢出限為0.50～1.20μg/kg。
儀器與裝置
氣相色譜儀帶氮磷檢測或火焰光度計。
快速溶劑萃取系統ASE-300型，配22mL和33mL萃取池，美國Dionex公司。
旋轉蒸發濃縮器。
微量注射器5μL，10μL等。
DB-1彈性石英毛細管柱型號30m×0.25mmi.d;0.25μm膜厚。
試劑與材料
中性氧化鋁100～200目，層析用。500℃烘4h，存放於乾燥器備用。
硅藻土。
碳粉分析純。
二氯甲烷、丙酮農殘級。
農葯標准溶液敵敵畏、馬拉硫磷、甲基對硫磷、樂果、甲拌磷、速滅磷、二嗪磷、異稻瘟凈、殺螟硫磷、溴硫磷、水胺硫磷、稻豐散、殺撲磷等，100μg/mL，-18℃保存備用。
替代物標准磷酸三苯酯，100μg/mL。
載氣、燃燒氣及助燃氣分別為氮氣，氫氣和空氣。氮氣純度為99.9%，經去氧管過濾，氧的含量小於5×10-6。
樣品的採集與保存
按有關規定採集土壤樣品，充分混勻後裝入250mL樣品瓶中，另取5g測定含水量。土壤樣品保存在-18℃冷凍箱中，保存期不超過7d。
分析步驟
1)試樣前處理。准確稱取10.00g土壤樣品、4.0g硅藻土、0.5g中性氧化鋁、0.2g活性炭，加入6μL10.0μg/mL磷酸三苯酯溶液，混勻後裝入22mL萃取池中。萃取條件:提取溶劑為丙酮-二氯甲烷(1+1)混合溶劑，提取溫度60℃，壓力10.3MPa，預熱5min，靜態提取10min，淋洗體積為60%池體積，氮氣吹掃時間90s，循環提取2次，收集全部提取液。氮氣吹掃濃縮至1.0mL，正己烷換相定容1.0mL，GC-FPD分析。
2)校準曲線。用正己烷逐級稀釋有機磷農葯標准儲備液到1μg/mL溶液，再配製成0.00ng/mL、5.00ng/mL、10.0ng/mL、20.0ng/mL、50.0ng/mL、100ng/mL、150ng/mL等濃度水平的混和標准系列，各標准點加入10.0μg/mL磷酸三苯酯6μL。通過濃度與對應響應值峰面積建立校準曲線。
確證標准。配製30.0ng/mL的標准溶液，作為確證標准。氣相色譜分析樣品時，至少每10個試樣或試樣分析結束時，應用確證標准驗證儀器及校準曲線的穩定性。當確證標准與初始標準的偏差超過20%時，應重新配製校準曲線，偏差區間內所分析的試樣需要重新測定。
3)氣相色譜條件。色譜柱，DB-1彈性石英毛細管柱(30m×0.25mmi.d;0.25μm);氣化室溫度220℃;檢測器溫度250℃;柱前壓12×6895Pa;氫氣流速75mL/min;空氣流速100mL/min;尾吹氣，氮氣，流速為15mL/min;不分流進樣，進樣量1μL。升溫程序，120℃保持5min，以10℃/min升至180℃，保持5min，再以30℃/min升至250℃保持5min。
4)定性及定量分析。
a.定性分析。採用與標准目標物保留時間相比較的方式對試樣待測目標物進行定性，當試樣與標准同時分析時，試樣中待測目標物保留時間與標准目標物保留時間偏差不大於±0.06min，試樣待測目標物初步被定性為標准目標物。對試樣待測目標物含量達到方法檢出限3倍以上的組分，需要進行氣相色譜-質譜確證或性質不同的色譜柱進行確認。
b.定量分析。定量方法一般為外標法，也可以採用內標法。參見85.2.2.1定量分析部分。
5)方法性能指標。標准系列0.00ng/mL、5.00ng/mL、10.0ng/mL、20.0ng/mL、40.0ng/mL、150ng/mL建立的回歸方程的線性相關系數在0.995～0.999之間。
將質量分別為20.00ng的有機磷混合標准加入到空白土樣中，按試樣前處理分析方法操作，經濃縮定容後按選定的儀器工作條件分析。根據濃度與儀器的響應(峰高)計算檢出限，在0.50～1.20μg/kg之間。試樣加標回收率60.7%～108%。替代物磷酸三苯酯標准回收率控制限在60%～130%。
『伍』 請問 有機磷農葯的檢測有哪些方法,哪些又是最新的方法
在檢測技術方面，方法有很多，主要有酶抑製法、酶聯免疫法、光度法、色譜法及質譜法等。目前國際上已普遍採用多殘留檢測技術。這些方面的建立得益於氣質聯用（GC-MS）、液質聯用（LC-MS）技術的應用以及常規使用的氣相色譜儀（GC）、液相色譜儀（LC）技術上新的突破，並提高農葯定性定量、多農殘檢測、快速檢測等方面發揮著巨大的作用，色譜法以成為目前檢測的主流儀器。
2.1 酶抑製法
酶抑製法是利用殺蟲劑可以抑制乙醯膽鹼酯酶或是羧酸酯酶的活性的原理而建立的，即乙醯膽鹼酯酶或羧酸酯酶與樣品反應，若酶的活性受到抑制，則表示該類殺蟲劑的存在。因為酶的活性與殺蟲劑的含量有關，測定酶活性的抑制率，即可得殺蟲劑的殘留量。應用抑制原理快速測定法只能判斷是否有過高的有機磷和氨基甲酸酯農葯，而不能判斷超標的具體農葯品種和殘留量，因此只能作為快速測定方法。
2.2 酶聯免疫測試法
酶聯免疫檢測法是利用化學葯物在動物體中有促進其產生免疫抗體的原理，將某種農葯與大分子化合物的復合體注入實驗動物體內，使其對該種農葯產生抗體，然後將抗體的抽取物與蔬菜樣品農葯殘留抽取物進行離體試驗，以比色的方式確認農葯的殘留量。這種結果精確、靈敏度高、特異性強，可採用試劑盒檢測。但是，在實際應用中，農葯種類繁多，制備抗體的難度較大，具有一定的盲目性。
2.3 氣相色譜及其聯用技術
氣相色譜是一種簡易、快速、高效和靈敏的現代分離分析技術，是農葯殘留測定不可或缺的手段，由於農葯的種類很多，不同類型的農葯，結構差異很大，而每一種檢測器僅能對一類或幾類原子和官能團進行響應，因而不同類型的農葯常常需要採用不同類型的檢測器，加上農葯的殘留一般都比較低，所以檢測器的選擇十分關鍵，如分析有機氯和擬除蟲菊酯類農葯採用電子捕獲檢測器（ECD）、分析有機磷農葯採用火焰光度檢測器（FPD）、分析含氮農葯和氨基甲酸酯類農葯採用氮磷檢測器（NPD）。高靈敏的檢測器可以檢出1×10-10～1×10-12g的組分，適合農葯微量和痕量分析。
氣相色譜—質譜聯用技術發揮氣相色譜的高分離能力，又可發揮質譜法的高高鑒別能力，適用於多組分混合物中未知組分的定性鑒定，簡化了多農殘檢測的分析步驟，而採用SIM模式僅對待測組分的定性離子進行採集，減少了雜質峰的干擾，提高了靈敏度。
2.4 液相色譜及其聯用技術
相對於GC，液相色譜的適用性更廣，可分析高沸點、熱不穩定、非揮發性化合物。液相色譜質譜聯用（LC-MS）對分析技術和儀器的要求高，具有檢測靈敏度高、選擇性好、定性定量同時進行、結果可靠等優點。但液相色譜與質譜之間的介面技術比較復雜，因此LC-MS在檢測農葯殘留方面落後於GC-MS。由於目前LC-MS介面技術還沒有真正地實現標准化，加之LC-MS對操作者的水平和儀器要求比較高，因此它在農殘檢測方面沒有GC-MS普及。但LC-MS的飛速發展已成為發達國家在各種基質中微量極性農葯檢測手段。在多農殘殘留分析中，LC-MS技術使用最多的是四極質量分析器。由於質譜儀通用性，LC-MS在多種類多成分的農葯殘留檢測中越來越廣泛，如我國標准GB/T 20776-2006建立的糧谷中372種農葯殘留的LC-MS方法和國外環境樣品中多農殘分析。
3.CTI華測檢測農葯殘留測試服務
CTI華測檢測作為食品檢測領域權威第三方檢測機構，在諸多農殘檢測技術具有國際先進檢測技術，同時獲得中國合格評定國家認可委員會（CNAS）和國家計量（CMA）資質認可。華測檢測可提供各國標準的農葯殘留檢測服務，助您的產品通往日本、歐美順利通關。根據企業的不同需求，華測檢測農葯殘留測試服務如下：水胺硫磷、氧化樂果、克百威等約500種農葯殘留掃描，多農殘檢測324項（應對日本「肯定列表制度」），應對日本通過檢測項目248項，日本厚生省57項有機磷農葯列表測試服務，中國與歐盟常見農葯185項，l 34項高毒農葯一齊分析
『陸』 農產品中有機磷農葯殘留量的測定方法有哪些
根據有機磷農葯的化學和毒理學性質,檢測有機磷農葯的分析方法有五大類：波譜法、色普法、酶抑製法、酶聯免疫法以及活體生物測定法。
波譜法。該方法是根據有機磷農葯中某些官能團或水解、還原產物與特殊的顯色劑在特定條件下發生氧化、磺酸化、酯化、絡合等化學反應,產生特定波長的顏色反應來進行定性或定量(限量) 測定。
高效液相色譜法是在液相色譜柱層析的基礎上,引入氣相色譜理論並加以改進而發展起來的色譜分析方法。高效液相色譜法在農葯殘留分析的應用越來越廣泛，是因為高效液相色譜法能適合分析沸點高而不太容易汽化、熱不穩定和強極性農葯及其代謝產物;且可以與柱前提取、純化及柱後熒光衍生化反應和質譜等聯用,易實現分析自動化;同時一些新型檢測器的問世在一定程度上提高了高效液相色譜法的檢測靈敏度。與氣相色譜法相比,不僅分離效能好,靈敏度高,檢測速度快,而且應用面廣。
酶抑製法。有機磷農葯對哺乳動物中毒作用的基礎,通常與它們抑制中樞和周圍神經系統的膽鹼酯酶的能力有關。酶抑製法是利用有機磷農葯的毒理特性建立的一種快速檢驗方法。由於有機磷農葯能抑制乙醯膽鹼酯酶的活性,使該酶分解乙醯膽鹼的速度減慢停止,再利用紙片或電極(即紙片法和膜電極法) 作為載體將乙醯膽鹼酯酶吸附在上面,如果酶的活性沒有被抑制,生成了基質水解產物,使用呈色劑或發色的基質而顯色。反之,如果被測樣品中含有農葯殘留,則酶的活性被抑制,基質就不被水解,遇顯色劑不顯色。這樣,通過紙片的顏色變化或電極的讀數指示變化上可以測定有機磷農葯與標准有機磷農葯比較則可定量。
酶聯免疫法是六十年代發展起來的一種新的檢測方法,該方法起初主要用於病毒、細菌、蛋白等較大結構或分子的檢測,應用范圍主要集中於醫學方面。七十年代後期,隨著科技的發展,酶聯免疫檢測方法開始向檢測生物毒素、農葯殘留、抗生素殘留等小分子物質方向延伸。
『柒』 水果蔬菜中的有機農葯殘留量的測定方法
4.
實驗步驟：
4.1
樣品的處理
取A、B、C三種蔬菜樣品，各1g左右，放入三個潔凈的燒杯中。
加入5mL提取液，震盪混勻10min
取待測液2.5mL，加入酶液0.1mL，顯色劑0.1mL，混勻靜止10min
在比色管中加入2.5mL樣品提取液，待用
4.2
對照溶液測試
取提取液2.5mL，加入酶液0.1mL，顯色劑0.1mL，混勻靜止10min
立即加入0.1mL底物搖勻，此時檢液開始顯色反應，立即放入儀器比色皿中，按照儀器操作規范，點擊對照按鈕，在3號通道進行測定，3min後記錄抑制率。
4.3
樣品溶液測試
立即加入0.1mL底物搖勻，此時檢液開始顯色反應，立即放入儀器比色皿中，按照儀器操作規范，點擊對照按鈕，在3號通道進行測定，3min後記錄抑制率。
四.注意事項
1.
所有使用液使用前都要搖勻，用一瓶取一瓶，防止其他物質污染，以免溶液中毒失效。
2.
反應瓶及反應容器應該用去污粉洗滌後再用自來水及蒸餾水洗滌，不能用酸性溶液洗滌，最好也不使用洗潔精。
3.
取樣時需要注意典型性和代表性，去除不可食用部位。
4.
取用反應液及酶液的器具需要專用並做好標記，所有溶液做到只進不出。
五.實驗結果
我們組的實驗結果失敗，用的第2小組的數據：
當蔬菜樣品提取液對酶的抑制率大於50%時，表示樣品中有高劑量有機磷或氨基甲酸甲酯類農葯存在可判定樣品為陽性結果。
實驗測定的結果為：
樣品
質量m/g
抑制率%
陽性（抑制率<50%）
A
1.094
6.39
陰性
B
1.114
63.17
陽性
C
1.037
15.47
陰性
從測定的結果來看，B號樣品的有機磷農葯表現為陽性，A、C號樣品的有機磷農葯表現為陰性，初步可以判定B號樣品中農葯殘留不合格。但要確定其使用農葯種類和數量必須通過其他手段進一步定性和定量。
從抑制率來看，B>C>A，從而可以初步判斷，樣品中有機磷的含量依次為B>C>A。有機磷農葯在蔬菜上的殘留與吸收能力依次為：根菜類>葉菜類>果菜類，本次實驗選用的蔬菜是捲心菜與生菜，都是屬於葉菜類的蔬菜，比較容易積累和吸收有機磷農葯
『捌』 有機磷和氨基甲酸酯類農葯農殘標准
蔬菜中有機磷和氨基甲酸酯類農葯殘留快速檢測方法標准1. 范圍本標准要求了由酶抑製法測定蔬菜中有機磷和氨基甲酸酯類農葯殘留量快速檢驗方法。本標准適適用於蔬菜中有機磷和氨基甲酸酯類農葯殘留量快速篩選測定。測試方法 酶抑制率法2. 原理在一定條件下，有機磷和氨基甲酸酯類農葯對膽鹼酯酶正常功效有抑製作用，其抑制率和農葯濃度呈正相關。正常情況下，酶催化神經傳導代謝產物（乙醯膽鹼）水解，其水解產物和顯色劑反應，產生黃色物質，用分光光度計在410nm處測定吸光度隨時間改變值，計算出抑制率，經過抑制率能夠判定出樣品中是否有高劑量有機磷或氨基甲酸酯類農葯存在。3.試劑3.1 pH8.0緩沖溶液：分別取43.5g無水磷酸氫二鉀和2.2g磷酸二氫鉀，用510mL蒸餾水溶解。3.2 顯色劑：分別取160mg二硫代二硝基苯甲酸（DTNB）和15.6mg碳酸氫鈉，用20mL緩沖溶液溶解，4°C冰箱中保留。3.3 底物：取25.0mg硫代乙醯膽鹼，加3.1mL蒸餾水溶解，搖勻後置4℃冰箱中保留備用。保留期不超出十天。3.4 乙醯膽鹼酯酶：依據酶活性情況，用緩沖溶液溶解，3 min吸光度改變D A0值應控制在0. 3以上。搖勻後置4℃冰箱中保留備用，保留期不超十天。3.5 可選擇由以上試劑制備試劑盒。乙醯膽鹼酯酶ΔA0值應控制在0.3以上。4 儀器4.1 分光光度計或對應測定儀。4.2常量天平。4.3 恆溫水浴或恆溫箱5 分析步驟5.1 樣品處理：選擇有代表性蔬菜樣品，沖洗掉表面泥土，剪成1cm左右見方碎片，取樣品1g，放入燒杯或提取瓶中，加入5mL緩沖溶液，靜制十五分鍾，之間需振盪幾次，待用。5.2 對照溶液測試： 先於試管中加入2.5mL緩沖溶液，依次加入0.lmL酶液、0.1mL顯色劑、0.lmL底物搖勻，此時檢液開始顯色反應，應立即放入儀器比色池中，統計反應3 min吸光度改變值ΔA0。5.3 樣品溶液測試：先於試管中加入2.5mL樣品提取液，其它操作和對照溶液測試相同，但在加底物之前必需放置15分鍾，統計反應3min吸光度改變值ΔAt。
6 結果表述計算6.1 結果計算檢測結果按公式計算：抑制率(%)=[ (ΔA0-ΔAt)/ ΔA0]×100式中：ΔA0 －對照溶液反應3min吸光度改變值；ΔAt －樣品溶液反應3min吸光度改變值；6.2 結果判定結果以酶被抑製程度（抑制率）表示。當蔬菜樣品提取液對酶抑制率≥50%時，表示蔬菜中有高劑量有機磷或氨基甲酸酯類農葯存在，樣品為陽性結果。陽性結果樣品需要反復檢驗2次以上。對陽性結果樣品，可用其它方法深入確定具體農葯品種和含量。7 附則7.1酶抑制率法技術指標7.1.1 靈敏度指標：酶抑制率法對部分農葯檢出限見表2酶抑制率法對部分農葯檢出限表2 酶抑制率法對部分農葯檢出限
農葯名稱 檢出限mg/kg 農葯名稱 檢出限mg/kg
敵敵畏 0.1 氧化樂果 0.8
對硫磷 1.0 甲基異柳磷 5.0
辛硫磷 0.3 滅多威 0.1
甲胺磷 2.0 丁硫克百威 0.05
馬拉硫磷 4.0 敵百蟲 0.2
樂果 3.0 呋南丹 0.05
7.1.2 符合率：在檢出抑制率≥50％30份以上樣品中，經氣相色譜法驗證，陽性結果符合率應該在80％以上。8說明8.1蔥、蒜、蘿卜、芹菜、香菜、茭白、蘑菇及番茄汁液中，含有對酶有影響次生物質，輕易產生假陽性。處理這類樣品時，可採取整棵蔬菜萃取或採取表面測定法。對部分含葉綠素較高蔬菜，也可採取整株蔬菜萃取方法，降低色素干擾。8.2 當溫度條件低於37度，酶反應速度隨之放慢，加入酶液和顯色劑後放置反應時間應對應延長，延長時間確實定，應以膽鹼酯酶空白對照測試3min吸光度改變差值在0.3以上，即可往下操作。注意樣品放置時間應和空白對照溶液放置時間一致才有可比性。膽鹼酯酶空白對照測試3min吸光度改變差值在0.3以下原因：一是酶活性不夠，二是溫度太低。
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蔬菜中有機磷和氨基甲酸酯類農葯殘留快速檢驗方法統一標准
蔬菜中有機磷和氨基甲酸酯類農葯殘留快速檢測方法標准
1. 范圍
本標准要求了由酶抑製法測定蔬菜中有機磷和氨基甲酸酯類農葯殘留量快速檢驗方法。
本標准適適用於蔬菜中有機磷和氨基甲酸酯類農葯殘留量快速篩選測定。
測試方法 酶抑制率法
2. 原理
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在一定條件下，有機磷和氨基甲酸酯類農葯對膽鹼酯酶正常功效有抑製作用，其抑制率和農葯濃度呈正相關。正常情況下，酶催化神經傳導代謝產物（乙醯膽鹼）水解，其水解產物和顯色劑反應，產生黃色物質，用分光光度計在410nm處測定吸光度隨時間改變值，計算出抑制率，經過抑制率能夠判定出樣品中是否有高劑量有機磷或氨基甲酸酯類農葯存在。
3.試劑
3.1 pH8.0緩沖溶液：分別取43.5g無水磷酸氫二鉀和2.2g磷酸二氫鉀，用510mL蒸餾水溶解。