食品微生物檢測采樣的方法

❶ 食品微生物的檢測方法有哪些

目前主要有普通培養法（簡稱國標方法）一般出報告的要用，儀器法、核酸檢測法（PCR）、還有目前的快速檢測法（主要包括：免疫磁珠、酶聯免疫試劑盒、金標檢測卡等。這個根據自己的需求來選擇吧。

❷ 冷凍食品取樣的方法

取樣是質量控制過程中重要的一環，是實驗室檢驗工作中的「頭等大事」。只有取樣的樣品具有代表性，才能根據其分析結果得出整批產品質量的准確結論。

但是在實際操作中常會遇到如下情況：

樣品檢測結果出現了異常，進行了檢測流程方面的排查並沒有出現偏差，結果顯示樣品在取樣時就已受到污染。

對於以上問題，需要從規范取樣操作開始。

同時由於不同類型的樣品，採取取樣操作也不相同，為了保證取樣的科學性。應針對不同樣品進行不同的取樣操作，以下將進行不同樣品取樣操作的分類闡述。

01 液體樣品

一般情況下，液體樣品比較容易獲得代表性樣品。液態食品一般盛放在大罐中，取樣時可連續或間歇攪拌。對於較小的容器，可在取樣前將液體上下顛倒，使其完全混勻。

取得的樣品應放在已滅菌的容器中送往實驗室，實驗室在取樣檢測之前應當把液體再徹底混勻一次。

02 固體樣品

根據所取樣品材料的不同，所使用的的工具也不同。固態樣品常用的取樣工具有解剖刀、勺子、軟木鑽、鋸、鉗子等，使用前均須滅菌。

例如麵粉或奶粉等已經混勻的食品，其成分質量均勻穩定，可以抽取少量樣品檢測。但散裝樣品就必須從多個點取樣，且每個點都要單獨處理，在檢測前要徹底混勻。

肉類、魚類或類似食品既要在表皮取樣，又要在深層取樣，深層取樣時要小心不要被表面污染。

有些食品，如新鮮肉類或熟肉可用滅菌的解剖刀和鉗子取樣；

冷凍食品在不解凍的狀態下用鋸、木鑽或電鑽，一般斜角鑽入來獲得深層樣品；

粉末狀樣品取樣時，可用滅菌的取樣器斜角插入箱底，樣品填滿取樣器後提出箱外，再用滅菌勺從取樣器的上、中、下部位采樣。

03 水樣

取水樣時，最好選用帶有防塵磨口瓶塞的廣口瓶。對於氯氣處理過的水，取樣後在100mL水樣中加入0.1mL的2%的硫代硫酸鈉溶液。

取樣時應特別注意防止樣品的污染，樣品應完全地充滿取樣瓶。如果樣品時從水龍頭上取得，龍頭嘴的里外都應擦乾凈。

打開水龍頭讓水流幾分鍾，關上水龍頭並用酒精燈灼燒，再次打開水龍頭讓水流1-2min後再接樣並裝滿取樣瓶。

這樣的取樣方法能確保供供水系統的細菌學分析的質量，但如果檢測的目的是用於追蹤微生物的污染源建議還應在水龍頭滅菌前取樣會在龍頭的里外用棉拭子塗抹取樣，以檢測水龍頭自身污染的可能性。

從水庫、池塘、井水、河流等取水樣時，用無菌的器械或工具拿取瓶子和打開瓶塞，在流動水中取樣品是瓶嘴應直接對著水流。

大多數國家的官方取樣程序中已明確規定了取樣所用器械，如果不具備適當的取樣儀器或臨時取樣工具，只能用手操作，但取樣時，應特別小心，防止用手接觸水樣或取樣瓶內部。

04 帶包裝食品

直接食用的小包裝食品盡可能取原包裝，直到檢測前不要開封防止污染；

桶裝或者大容器包裝的液體或固體食品應用無菌取樣器由幾個不同部位採取，一起放入一個滅菌容器內，不要過度潮濕，以防食品中固有的細菌繁殖；

對於桶裝或大容量包裝的冷凍食品，應從幾個不同的部位用滅菌工具抽樣，使之有充分的代表性，將樣品送達實驗室前，要始終保持樣品處於冷凍狀態。若樣品一旦融化，不可使其再冷凍，保持冷卻即可。

05 表面采樣

通過惰性載體可以將表面樣品上的微生物轉移到合適的培養基中進行微生物檢測，這陣惰性載體既不能引起微生物的死亡，也不應使其增殖。這樣的載體包括清水、拭子等。

要達到微生物既不死亡又不增殖很困難，因此取樣後應當盡快進行檢測。表面取樣技術只能直接轉移菌體，不能做系列稀釋，只有在菌體數量較少的時候適用，其最大的優點是取樣過程不破壞樣品。

常用的表面取樣技術包括棉拭子、淋洗法、膠帶法等，這里以棉拭子法為例。

定性檢測時，只要塗抹全部需要檢測的表面即可。而進行的定量檢測時，必須先用滅菌取樣框確定被測試的區域。用乾燥的棉花纏在4cm長，直徑1-1.5mm的木棒或不銹鋼棒上做成棉拭子（為了方便也可使用一次性棉簽），放進合金試管中，蓋上蓋子後滅菌。

取樣時先將拭子在稀釋液中浸濕，然後再待測樣品表面緩慢旋轉拭子平行用力塗抹兩次。塗抹過程中應保證拭子在取樣框內。取樣後拭子重新裝回有10mL取樣溶液的試管中。

以上是相關樣品進行無菌抽樣時的相關操作流程及注意事項。無菌取樣的意義重大，無菌取樣的規范性是保證樣品檢測准確性的前提。

因此我們更應該在取樣時應規范操作，確保從源頭杜絕污染。

❸ 食品檢測流程有哪些

食品檢驗的一般步驟，樣品的採集 樣品的處理 樣品的分析檢測 分析結果的記錄與處理如送檢樣品感官檢查已不符合食品衛生標准或已腐敗變質，可不必再進行理化檢驗。樣品的採集又稱采樣、樣品的制備，是指抽取有一定代表性的樣品，供分析化驗用。樣品的採集一般包括三個內容：即抽樣、取樣和制樣。采樣時必須注意樣品的生產日期、批號、代表性和均勻性。采樣數量應能滿足檢驗項目對試樣量的需要，采樣容器根據檢驗項目，選用硬質玻璃瓶或聚乙烯製品。采樣一般步驟為：①原始樣的採集；②原始樣的混合；③縮分原始樣至需要的量。對於不同的樣品應採用不同的方法進行樣品的採集。液體樣品的採集：對於大型桶裝、罐裝的樣品，可採用虹吸法分別吸取上、中、下層樣品各0.5L，混勻後取0.5~1.0L。對於大池裝樣品可在池的四角、中心各上、中、下三層分別采樣0.5L，充分混勻後0.5~1.0L。固體樣品的採集：應充分均勻各部位樣品的原始樣，以使樣品具有均勻性和代表性。對於大塊的樣品，應切割成小塊或粉碎、過篩、粉碎，過篩時不能有物料的損失和飛濺，並全部過篩，然後將原始樣品充分混勻後，採用四分法進行縮分，一直至需要的樣品量，一般為0.5~1.0kg。

❹ 食品微生物檢驗內容與檢測技術方法

食品微生物檢驗內容與檢測技術方法

近年來，世界各地出現了諸多嚴重的食品安全事故，由於食品微生物污染而造成的質量事故嚴重威脅著人們的身體健康，如何做好食品微生物檢驗，確保食品質量安全，就需要社會各界共同努力。根據國際和國內衛生組織的相關規定和要求，所有的食品生產廠商都要對食品的質量進行嚴格的檢驗，對於生產出來食品的菌落種類、細菌數量、大腸菌群、沙門氏菌、金黃色葡萄球菌等進行檢測，必須達到要求的合格標准才能進入市場進行出售。下面是我為大家帶來的食品微生物檢驗內容與檢測技術方法的知識，歡迎閱讀。

需要注意的問題

一是工作人員及活動規定。必須保證參加檢測的人員具有相應的資格，並通過相關的考試後，持證上崗才能開展相關活動。同時要求工作人員不僅需要具有高超的專業技術，還應該有良好的職業道德修養，盡可能降低人為問題的制約。檢測過程需要按照相關的活動規范和流程進行，使用無菌設備認真地進行抽樣活動，採用先進技術獲取相關信息。二是存放裝置。若想檢測過程順利進行，除了確保實驗室有必要的設施外，還應該重點考慮裝置存放的條件和要求。三是裝置和葯品的配置。在各項裝置進行安裝時應該對氣溫進行調節，確保其安穩，對裝置氣溫穩定性合乎規定要用的具體時間詳細記錄。同時在規定的時間內對各種裝置進行消毒處理，並通過感應設備對其運作狀態進行監測。對於葯品的配置，培養基往往在121℃下採用高壓濕熱滅菌法滅菌15分鍾;較為敏感的'培養基一般採用膜過濾法。四是樣本的處理。在樣本收集過程中，需要確保抽樣活動是在無菌環境下展開的，有效避免了樣本被污染。在樣本輸送時，應該防止樣本受到光線的影響而出現污染現象，抽樣之後就應該及時將其送至測試場地。一般樣本輸送時間要控制在3h內，如果無法及時送到，要確保在近乎之前的氣溫時將其完整的存放。

食品微生物檢驗內容

一是檢驗食品污染程度指示菌。細菌總數即菌落總數，是食品和生活飲用水檢樣處理後，在特定培養條件下，所得1g或者1mc檢樣中所含有的細菌菌落個數，這就是判斷食品和生活飲用水污染程度的關鍵指標。大腸菌群系是在37℃下培養24h的一群發酵乳糖、產氣、產配以及需氧或者厭氧的革蘭氏染色陰性無芽胞桿菌。這種菌群主要來源於人和牲畜的糞便，因此，可以用糞便的污染指標菌對食品的衛生質量進行評價。二是檢測食品中治病菌。在食品微生物相關檢驗標准中已經明確規定某些微生物的數量，因此在對食品污染程度指示菌檢測的同時，還應該對一些治病菌進行測定，如沙門氏菌、金黃色葡萄球菌等。

食品微生物檢測技術方法

很長時間以來，開展的此項檢測活動，是按照瓊脂平板的措施來進行的，通常要兩到三天的時間才可以完成。最近，許多的專家和組織都不斷地對工藝以及措施進行深化分析，獲取了非常高的成就，對許多措施進行了改進，切實提升了檢測的精準性以及安穩性特徵，而且獲取了許多全新的工藝，具體有如下的措施：

1.採用電阻抗法。具體的講，它是指細菌繁衍的時候，將會使培養基中的火分電惰性物質如碳水化合物、蛋白質和脂類等，代謝為具有電活性的小分子物質，其能增加培養基的導電性，進而導致阻抗出現改變，因此，可以通過檢測培養基的電阻抗變化情況來判定細菌在培養基中的生長繁殖特性，即可檢測出相應的細菌。

2.採用快速酶觸反應及代謝產物的檢測。細菌在生長繁殖過程中可合成和釋放某些特異性的酶，所以根據其特性來選用相對應的底物和指示劑，而且合理的記載信息。

3.採用分子生物學技術。它涵蓋兩項內容：1)核酸探針技術。結合鹼基互補相關的概念，使用獨特的措施來對物體進行標注。2)聚合酶鏈式反應(PCR)技術。其原理為通過加熱使雙鏈DNA經裂解成兩條單鏈，成為引物和DNA聚合酶的模板;接下來把氣溫變低，使寡聚核苷酸引物與DNA分子上的互補序列退火。通常狀態中，當退火的氣溫非常高的話，它的擴增特性就十分的優秀。

4.採用免疫學方法檢測細菌抗原和抗體的技術。具體有三項措施：1)熒光抗體檢測技術(IFA)，它又有兩種，分別是直接的以及間接地。其中第一種是直接在樣本上滴加已知特異性熒游標記的抗血清，然後對其清洗，進而獲取信息。而後一種措施是在檢樣上滴加已知細菌特異性抗血清，等到發生反映之後再仔細地清洗，再加入熒游標記的抗體後在熒光顯微鏡下觀察結果。2)免疫酶技術(EIA)，其是將抗原、抗體特異性反應和酶的高效催化作用原理結合，此法非常的獨特，而且功效非常好。通過共價結合將酶與抗原或抗體結合，形成酶標抗原或抗體，或通過免疫方法使酶與抗酶抗體結合，形成酶抗體復合物。3)免疫磁珠分離法(IMS)，即應用抗體包被的免疫磁珠，用一個磁場裝置收集鐵珠。

5.採用儀器法。1)微型全自動熒光酶標分析儀(Mini-VIDAS)，其主要採用具有優異的敏感性和特異性的酶聯熒光技術(ELFA)，得到的熒光和抗原的比例是一種順向的關系。2)全自動微生物分析系統(Vietk-AMS)。它能夠一次對非常多的樣本開展分析，而且檢測的時間不需要非常久，通常在兩到三個小時即可，此法的效率非常好，同時也將成為檢測行業全行的發展趨勢。