血清中維生素d檢測方法

A. 維生素D測定法簡介

目錄

• 1 拼音
• 1.1 第一法
• 1.2 第二法
• 1.3 第三法

1 拼音

wéi shēng sù D cè dìng fǎ

本法系用高效液相色譜法測定維生素D(包括維生素D<[2]>和D<[3]>,下同)及其制劑、維生素AD制劑或魚肝油中所含維生素D及前維生素D經折算成維生素D的總量，以單位表示，每單位相當於維生素D0.025μg。

測定應在半暗室中及避免氧化的情況下進行。

無維生素A醇及其他雜質干擾的供試品可用第一法測定，否則應按第二法處理後測 定；如果按第二法處理後，前維生素D峰仍受雜質干擾，僅有維生素D峰可以分離時，則應按第三法測定。

1.1 第一法

對照品貯備溶液的制備

根據各制劑中所含維生素D的成分,精密稱取相應的維生素D<[2]>或D<[3]>對照品25mg,置100ml棕色量瓶中，加異辛烷80ml，避免加熱，用超聲處理助溶1分鍾使完全溶解，加異辛烷至刻度，搖勻，充氮密塞，避光，0℃以下保存。

測定維生素D<[2]>時，應另取維生素D<[3]>對照品25mg，同法製成維生素D<[3]>對照品貯嘩數備溶液，供系統適用性試驗用。

內標溶液的制備

稱取鄰苯二甲酸二甲酯25mg，置25ml量瓶中，加正己烷至刻度，搖勻。

色譜條件與系統適用性試驗

用硅膠為填充劑，正己烷－正戊醇（997∶3）為流動相，檢測波長為254nm。量取維生素D<[3]>對照品貯備溶液5ml，置具攜轎塞玻璃容器中，通氮後密塞，置90℃水浴中加熱1小時，取出迅速冷卻，加正己烷5ml， 搖勻，置1cm具塞石英吸收池中，在2支8W主波長分別為254和365nm的紫外光燈下， 將石英吸收池斜放成45°,並距燈管5～6cm,照射5分鍾,使溶液中含有前維生素D<[3]>、反式維生素D<[3]>、維生素D<[3]>和速甾醇D<[3]>；取此溶液注入液相色譜儀，測定維生素D<[3]>的峰值，先後進樣5次,相對標准偏差應不大於2.0％；前維生素D<[3]>(與維生素D<[3]>的比保留時間約為0.5)與反式維生素D<[3]>(與維生素D<[3]>的比保留時間約為 0.6)以及維生素D<[3]>與速甾醇D<[3]>(與維生素D<[3]>的比保留時間約為1.1)的峰分離度均應大於1.0。

校正因子測定

精密量取對照品貯備溶液和內標溶液各5ml,置50ml量瓶中，加正己烷至刻度，搖勻；取一定量注入液相色譜儀，計算維生素D的校正因子f<[1]>。

另精密量取對照品貯備溶液5ml置50ml量瓶中，加入2,6－二叔丁基對甲酚結晶1粒,通氮排除空氣後，密塞，置90℃水浴中加熱1．5小時，取出迅速冷卻至室溫，精密加內標溶液5ml，加正己烷至刻度，搖勻；取一定量注入液相色譜儀，計算前維生素D折算成維生素D的校正因子f<[2]>。

f<[2]>＝(A<[s]>·m<[r]>－f<[1]>m<[s]>A<[r1]>)／A<[r2]>·m<[s]>

式中

A<[s]>為內標的峰值；

m<[r]>為加入對照品的量；

f<[1]>為維生素D的校正因子；

m<[s]>為加入內標物質的量；

A<[r1]>為維生素D的峰值；

A<[r2]>為前維生素D的峰值。

含量測定

取各該制劑項下制備的供試品溶液進行測定,按下列公式計算維生素D及前維生素D折算成維生素D的總量。

mi＝(f<[1]>·A<[i1]>＋f<[2]>A<[i2]>)·m<[s]>／A<[s]>

式中

A<[i1]>為維生素D的峰值；

A<[i2]>為前維生素D的峰值；

m<[s]>為加入內標物質的量；

A<[s]>為內標的峰值。

1.2 第二法

精密稱取供試品適量(相當於維生素D總量600單位以上，重量不超過2.0g)，置皂化瓶中，加乙醇30ml、抗壞血酸0.2g與50％(g／g)氫氧化鉀溶液3ml[若供試量為3g，則加50％(g／g)氫氧化鉀溶液4ml]，置水浴上加熱迴流30分鍾，冷卻後，自冷凝管頂端加水10ml沖洗冷凝管內壁，將皂化液移至分液漏斗中，皂化瓶用水60～100ml分數次洗滌,洗液並入分液漏斗中，用不含過氧化物的乙醚振搖提取3次，第一次60ml,以後每次40ml，合並乙醚液亂隱首，用水洗滌數次，每次約100ml，洗滌時應緩緩旋動，避免乳化,直至水層遇酚酞指示液不再顯紅色，靜置，分取乙醚提取液，加入乾燥濾紙條少許振搖除去乙醚提取液中殘留的水分，分液漏斗及濾紙條再用少量乙醚洗滌，洗液與提取液合並，置具塞圓底燒瓶中，在水浴上低溫蒸發至約5ml，再用氮氣流吹乾，迅速精密加入甲醇3ml，密塞，超聲處理助溶後，移入離心管中，離心，取上清液作為供試品溶液A。

凈化用色譜柱系統分離收集維生素D

精密量取上述供試品溶液A 500μl,注入以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑的液相色譜柱，以甲醇－乙腈－水(50∶50∶2) 為流動相進行分離，檢測波長為254nm，從計錄儀上觀察色譜圖，要求維生素D與前維生素D為疊 峰，並能與維生素A及其他干擾含量測定的雜質分開；准確收集含有維生素D及前維生素D混合物的全部流出液，置具塞圓底燒瓶中，用氮氣流迅速吹乾,精密加入已知內標濃度的正己烷溶液適量(不少於2ml，並使每1ml中含維生素D為50～140單位,內標物質與維生素D的重量比約為4∶1)，密塞，超聲處理助溶，即為供試品溶液B。

取供試品溶液B，按第一法進行含量測定，進樣量為100～200μl。

1.3 第三法

供試品溶液的制備

取各該制劑項下制備的供試品溶液A,按上述第二法凈化用色譜柱系統分離維生素D項下的方法處理,至「用氮氣流迅速吹乾」後, 加入異辛烷2ml溶解,通氮排除空氣後，密塞，置90℃水浴中，加熱1.5小時後，立即通氮在2分鍾內吹乾，迅速精密加入正己烷2ml，溶解後，即為供試品溶液C。

對照品溶液的制備

精密量取對照品貯備溶液適量,加異辛烷定量稀釋製成每1ml中約含維生素D 50單位，精密量取2ml置具塞圓底燒瓶中，照供試品溶液制備項下的方法,自「通氮排除空氣後」起，依法操作，得對照品溶液。

含量測定

B. 如果身體缺乏維生素ABCD，有什麼辦法可以自查

如果身體缺乏維生素ABCD，有什麼辦法可以自查？

維生素是體內必不可少的微量元素之一，如檢查維生素缺乏，需要到正規的三甲醫院掛內分泌科或者普內科行常規檢查。

c

維生素是人體內必須的一種化合物質，缺乏維生素會導致人體出現各種各樣的疾病例如表麵皮膚乾燥、缺乏彈性、人體內缺乏營養物質，甚至會導致胃腸道功能減退及對營養物質的吸收、代謝能力降低從而引發各種繼發性疾病，引發胃潰瘍、胃炎等疾病，除此之外會導致患者精神狀態不佳、脾氣暴躁、記憶力下降等精神系統疾病，幼兒缺乏維生素會導致身體發育障礙。所以，缺乏維生素應該進行血液檢查，價格在20-50元不等，可以有效檢查出身體內缺乏的維生素。

C. 25羥基維生素d

25-羥基維生素D水平低增加大動脈硬度的潛在作用; ; 作者:國際循環;日;期:9/28/2010;3:13:10;PM;點擊：346;;;;第0期; 國際循環網版權所有，謝絕任何形式轉載，侵犯版權者必予法律追究。 目地：越來越多的證據表明，維生素D對心血管系統發揮重要的病理生理影響。有一些關於低維生素D水平與心血管風險增加有關的報告。我們的目的是建立與維生素D及動脈血管硬化的關聯。由於機制合理，我們也旨在證明，基質金屬蛋白酶9（MMP9）多態性是否在該關聯中發揮協同作用。 ;;;;方法：576位受試者，基於postMONICA普通人群的隨機子樣本被列入該橫斷面研究。使用Sphygmocor設備通過主動脈脈搏波速度（APWW）量化動脈硬度。使用試劑盒測定血清中25-維生素;D(25(OH)-D3;)。兩個MMP9的多態性（C1569T和G836A）通過PCR技術進行了估算。 ;;;;結果：在我們的試驗中，我們發現APWW在25（OH）-;D3四分位中有明顯下降趨勢。處於25-(OH)-D3四分位底部受試者（

D. 人體維生素怎樣檢測

人體缺少維生素會有以下幾個症狀，要是有這幾個症狀就說明缺少維生素。

1、皮膚粗糙

體內缺乏維生素會令皮膚粗糙,甚至還會長痘痘。此時,應該保持規律、均衡的飲食生活習慣,並及時補充維生素B、C、E等。比如多吃瘦肉、魚、雞蛋、牛奶等食物。當體內有足夠的維生素後可使毛細血管暢通,並不斷供給皮膚所需要的營養,以促進健康和柔嫩肌膚的成長。

2、口腔潰瘍

口腔潰瘍屬於常見口腔疾病,常與人體中缺乏維生素有密切關系。這類維生素主要是維生素B群,其中重要的是維生素B2,維生素C,應及時補充。如果長時間不能痊癒,日常生活中需要注意飲食的調理。盡量保持清淡飲食,多吃些容易消化的食物,不可以吃辛辣刺激、生冷的食物,多吃新鮮的蔬菜水果。

3、掉發脫發嚴重

掉發、脫發嚴重也是體內維生素缺乏的表現。經常掉發脫發的人,可能是由於體內缺乏維生素B7造成的。維生素B7是一種維持人體自然生長、發育和正常人體機能健康必要的營養素。在缺乏後,容易引起神經功能失調,會使人頭皮屑增多,出現掉發、少年白發等症狀。

4、記憶力減退

記憶力逐漸減退並不是只有年齡增大這一條原因,如果營養不足、維生素缺乏也會影響到我們的記憶力。通常,可以對抗大腦老化,提高記憶力的維生素主要包括維生素B1、B6、B12和葉酸等。

此外,補充抗氧化維生素也可以幫助大腦對抗衰老,維生素C、維生素E和β-胡蘿卜素可以消除大腦產生的自由基,避免大腦功能受損,尤其是維生素E格外重要,具有保護腦神經細胞、預防老年痴呆症的功能,是大腦的保護劑。

(4)血清中維生素d檢測方法擴展閱讀：

還有長皮疹，掉頭發。如果臉上長鱗屑紅斑性皮疹，頭發掉得也異常多，說明人體可能缺乏維生素B7，這是一種水溶性維生素，容易流失，需要人體每日從飲食中攝取，如果有吃生雞蛋習慣，更會雪上加霜，因為生雞蛋的蛋白質會抑制人體吸收維生素B7。

肌肉抽筋。如果平時經常自覺腿部肌肉抽筋，這表明可能缺乏鉀、鈣、鎂等礦物質。若同時是運動愛好者，大運動量會通過出汗令人體流失更多這些礦物質，從而加重症狀。

參考資料來源：人民網-出現這些徵兆,說明身體內缺乏維生素

E. 維生素d檢查之前吃飯喝水嗎

維生素d檢查之前可以吃飯喝水，對檢查結果沒影響，但是不能用食用維生素D3的維生素片等，檢查時要求應放鬆心情，配合醫生做好檢查。
維生素D(vitamin D)是類固醇的衍生物，分為迅此豎維生素D2和維生素D3。檢測維生素D主要通過以下方法測定：
1、血清25-羥維生素D3測定：25-羥維生素D3是維生素D3的主要代謝產物，測定其具有早期診斷的價值。
2、血畝大液生化檢查：其改變比X線影像顯示的骨扒御骼改變早。

F. 維生素D3有那些方法學可以檢測出來

方法名稱：
維生素D3的測定—高效液相色譜法
應用范圍：
本方法採用高效液相色譜法測定維生素D3的含量。
本方法適芹啟用維生素D3。
方法原理：
供試品和內標均製成甲醇溶液，進入高效液相色譜儀進行色譜分離，用紫外吸收檢測器，於波長254nm處檢測維生素D3（C27H44O）和內標鄰苯二甲酸二甲酯的吸收值，計算出其含量。嫌友如
試劑：
1.異辛烷
2. 正己烷
3. 正戊醇
儀器設備：
1. 儀器
1.1 高效液相色譜儀
1.2 色譜柱
硅膠為填充劑，維生素D2峰與內標物質峰的分離度應符合要求。
1.3 紫外吸收檢測器
2. 色譜條件
2.1 流動相：正己烷+正戊醇= 997 3
2.2 檢測波長：254nm
2.3 柱溫：室溫
試樣制備：
1. 稱取供試品
精密稱取本品25mg，置100mL棕色量瓶中。
2. 對照品溶液的制備
精密稱取維生素D3對照品和維生素D3對照品25mg，置100mL棕色量瓶中，加異辛烷80mL，避免加熱，超告游聲處理1分鍾使完全溶解，並加異辛烷至刻度，搖勻，沖氮密塞，避光，0℃以下保存。
3. 內標溶液的制備
取鄰苯二甲酸二甲酯25mg，置25mL量瓶中，加正己烷溶解並稀釋至刻度，即得。
4. 供試品溶液的制備
上述供試品加三甲基戊烷80mL，避免加熱，用超聲處理1分鍾使溶解，加三甲基戊烷稀釋至刻度，搖勻，即得供試品溶液。
註：「精密稱取」系指稱取重量應准確至所取重量的千分之一。「精密量取」系指量取體積的准確度應符合國家標准中對該體積移液管的精度要求。
操作步驟：
分別精密吸取上述供試品溶液與對照品溶液，20μL 注入高效液相色譜儀，用紫外吸收檢測器，於波長254nm處測定維生素D3和內標鄰苯二甲酸二甲酯的吸收值，按內標法以峰面積計算，即得。

G. 葯明奧測維生素D檢測創新解決方案好不好

目前，全國多地正在推進疫情常態化，這促進了診療場景的進一步拓展，在社區、在第三方檢測機構、在轎慧塵家中，方便快捷地採集、檢測，已成為廣大人民群眾的普遍需求。葯明奧測維生素D檢測創新解決方案，開創性地利用了干血斑樣本（dried blood spot，DBS）進行血清總25-羥維生素D水平檢測，檢測者無需去醫院抽血，⌄在院外即可輕松完成采樣。其「金標准」質譜法，碧扮結果精準、過程便捷，DBS樣本與血液樣本檢測結果一致性達95%以上，打破了診療場閉禪景的局限，實現了高質量醫療服務的更廣覆蓋。

H. 如何檢查維生素D

這說數歷明：維生素D對直腸癌的預防有一定積極作用。而整日在寫字樓內不見陽光、出門又乘汽車的磨亮白領，體內維生素D的含薯游搜量肯定有限。既然缺乏由陽光合成的維生素D，

I. 維生素D的測定

病情分析：你好，你說的情況發我看見了，25-羥維生素d3是膽固醇的衍生物，也稱膽鈣化醇，主要是參與血鈣代謝，你的寶寶是69.31，應該是正常值。
指導意見：你好，建議你1正常的25-羥維生素d3含量為40——90你的寶寶在正常值之內。

J. 如何判斷孩子是否缺乏維生素D

如果需要到醫院檢查維生素D是否缺乏，殲掘州可以通過血清25-羥維生素D3測定，以及血液生化檢查兩種醫療手段獲得答案。但是，一般只要飲食均衡，身體健康，加上有氏蔽適當的運動，再配合合理的日照時間來幫助合成維生素D。散型