❶ 鑒別纖維素分解菌採用什麼染色法
1、剛果紅能給纖維素染色，第一種方法是在菌落長出來以後加的剛果紅，產纖維素酶的菌落周圍的纖維素被水解了，因此染色較淺或沒有被染色，從而分辨出產纖維素酶並改前的菌落；而第二種方法是在培養基中直接加入剛果紅，因為培養絕清基中有澱粉物質殲基的存在，產澱粉酶的菌落在水解澱粉的同時可能會使剛果紅的染色變淺，出現水解圈，即假陽性現象。
2、是在培養基中加入剛果紅。
❷ 纖維素酶活的活性檢測方法及使用說明是什麼
這些是在索萊寶官網上借鑒的：（僅供參考）
纖維素酶活的活性檢測方法
1. 纖維素CMC酶
1.0標題
用3.5一二硝基水楊酸法測定纖維素CMC酶活性單位。 2.0范圍
生產分析和質量控制部門適用。 3.0原理
纖維素CMC酶（EC3.2.1.4）水解羧基纖維素分子中β－1.4葡萄糖苷鍵,釋放出的還原糖(以葡萄糖計)與3.5二硝基水楊酸(DNS)反應,產生顏色變化,這種顏色變化與釋放還原糖(以葡萄糖計)的量成正比關系,即與酶樣品中的酶活性成正比。通過在550nm的光吸收值查對標准曲線(以葡萄糖為標准物)可以確定還原糖產生的量,從而確定出酶的活力單位。 4.0試劑
4.1無水醋酸鈉(分析純) 4.2冰醋酸(分析純) 4.3 3.5－二硝基水楊酸 4.4無水葡萄糖
4.5四水酒石酸鉀鈉(分析純) 4.6氫氧化鈉(分析純) 4.7重蒸苯酚(分析純) 4.8無水亞硫酸鈉(分析純) 4.9疊氮化鈉(分析純) 4.10羧甲基纖維素鈉 5.0儀器
5.1水浴鍋(恆溫)50±1℃ 5.2電熱乾燥箱80±1℃ 5.3 722型分光光度機計 5.4分析天平感量0.1㎎ 5.5一級玻璃製品 5.6電冰箱 6．0試劑的准備
6．1乙酸－乙酸鈉緩沖溶液（PH=4.8）
溶液A：量取冰醋酸6ml，定容至1000ml，製成0.1M醋酸鈉溶液。 溶液B：稱取8.2g醋酸鈉，溶解後容至1000ml，製成0.1M醋酸鈉溶液。 以A：B=4：6的比例混合，低溫冷藏備用。 6.2 DNS試劑:
溶液A:稱分析純NaOH 104g溶於1300ml水中,加入30g分析純3.5一二硝基水楊酸。 溶液B:稱分析純酒石酸鉀鈉910g，溶於2500ml熱水中，再稱取25g重蒸苯酚和25g無水亞硫酸鈉加入酒石酸鉀鈉溶液。
將A、B溶液混合，定容至5000ml，貯存於棕色瓶中，暗處放置一星期後可使用。 6.3 CMC溶液：用羧甲基纖維素鈉（CMC）以PH4.8醋酸緩沖液配成1%的溶液。 7．0標准曲線製作：
7.1無水葡萄糖80℃烘乾至恆重。
7.2准確稱取1.000g溶於1000ml水中，加10mg疊氮化鈉防腐，4℃冷藏備用。 7.3標准葡萄糖曲線製作
纖維素酶的作用原理
1、纖維素酶在提高纖維素、半纖維素分解的同時,可促進植物細胞壁的溶解使更多的植物細胞內溶物溶解出來並能將不易消化的大分子多糖、蛋白質和脂類降解成小分子物質有利於動物胃腸道的消化吸收熊譜成1996.
2、纖維素酶制劑可激活內源酶的分泌,補充內源酶的不足,並對內源酶進行調整,保證動物正常的消化吸收功能,起到防病,促生長的作用（張國立,1996）.
3、消除抗營養因子,促進生物健康生長.半纖維素和果膠部分溶於水後會產生粘性溶液,增加消化物的粘度,對內源酶造成障礙,而添加纖維素酶可降低粘度,增加內源酶的擴散,提高酶與養分接觸面積,促進飼料的良好消化.
4、纖維素酶制劑本身是一種由蛋白酶、澱粉酶、果膠酶和纖維素酶等組成的多酶復合物,在這種多酶復合體系中一種酶的產物可以成為另一種酶的底物,從而使消化道內的消化作用得以順利進行.也就是說纖維素酶除直接降解纖維素,促進其分解為易被動物所消化吸收的低分子化合物外,還和其他酶共同作用提高奶牛對飼料營養物質的分解和消化.
5、纖維素酶還具有維持小腸絨毛形態完整,促進營養物質吸收的功能.
❸ 纖維素酶的測定方法
土壤樣品應為<2mm，即過10號篩，我們常用20目篩。
❹ 篩選纖維素分解酶的方法
（1）纖維素酶是一種復合酶，包括C 1 酶、C X 酶和葡萄糖苷酶，前兩種酶使纖維素分解成纖維二糖，第三種酶將纖維二糖分解成葡萄糖．纖維素分解菌可以用剛果紅染液進行鑒別，剛果紅可以與纖維素這樣的多糖物質形成紅色復合物，能夠產生透明圈的菌落就是纖維素分解菌．因此，剛果紅染色法能通過顏色反應直接對微生物進行篩選．
（2）為了確定是纖維素分解菌，還需要進行發酵產纖維素酶的實驗．纖維素酶的發酵方法有液體發酵和固體發酵兩種．
（3）進行菌種保藏時，若採用臨時保藏，將菌種接種在斜面培養基上，放人4℃冰箱中可保藏3～6個月；若要長期保存，可將菌液與滅菌的甘油混勻，放在-20℃的冰箱中保存一年．
故答案為：
（1）復合 葡萄糖
（2）剛果紅染色法 液體發酵 固體發酵
（3）將菌種接種在斜面培養基上，放人4℃冰箱中 將菌液與滅菌的甘油混勻，放在-20℃的冰箱中
❺ 纖維素酶活力用什麼方法測定
纖維素酶活力的測定 一、目的學習和掌握3,5-二硝基水楊酸（DNS）法測定纖維素酶活力的原理和方法，了解纖維素酶的作用特性。二、原理纖維素酶是一種多組分酶，包括C1 酶、CX 酶和�0�7�0�0-葡萄糖苷酶三種主要組分。其中C1酶的作用是將天然纖維素水解成無定形纖維素，CX 酶的作用是將無定形纖維… 3．C1 酶活力的測定 將5mg/mL 的原酶液稀釋10～15 倍後用於測定C1 酶活力，以脫脂棉為底物。取4 支洗凈烘乾的20mL具塞刻度試管，編號後各加入50mg 脫脂棉，加入1.5mL 0.05MpH5.0 的檸檬酸緩沖液，並向1 號試管中加入1.5mL DNS 溶液以鈍化酶活性，作為空白對照，比色時調零用。將4 支試管同時在45℃水浴中預熱5～10min，再各加入適當稀釋後的酶液0.5mL，45℃水浴中保溫24h。取出後立即向2、3、4 號試管中各加入1.5mL DNS溶液以終止酶反應，充分搖勻後沸水浴5min，取出冷卻後用蒸餾水定容至20mL，充分混勻。以1 號試管溶液為空白對照調零點，在540nm 波長下測定2、3、4 號試管液的光密度值並記錄結果。 根據3 個重復光密度的平均值，在標准曲線上查出對應的葡萄糖含量，按下式計算出C1 酶活力（U/g）。在上述條件下反應24h，由底物生成1�0�7�0�0mol 葡萄糖所需的酶量定義為一個酶活力單位（U）。 式中：24 為酶活力定義中的24h。 4．CX 酶活力的測定 將5mg/mL 的原酶液稀釋5 倍後用於測定CX 酶活力，以CMC 為底物。 取4 支洗凈烘乾的20mL 具塞刻度試管，編號後各加入1.5mL 0.51％CMC 檸檬酸緩沖液，並向1 號試管中加入1.5mL DNS 溶液以鈍化酶活性，作為空白對照，比色時調零用。 將4 支試管同時在50℃水浴中預熱5～10min，再各加入稀釋5 倍後的酶液0.5mL，50℃水浴中保溫30min 後取出，立即向2、3、4 號試管中各加入1.5mL DNS 溶液以終止酶反應，充分搖勻後沸水浴5min，取出冷卻後用蒸餾水定容至20mL，充分混勻。以1 號試管溶液為空白對照調零點，在540nm 波長下測定2、3、4 號試管液的光密度值並記錄結果。 根據3 個重復光密度的平均值，在標准曲線上查出對應的葡萄糖含量，按下式計算出CX 酶活力（U/g）。在上述條件下，每小時由底物生成1�0�7�0�0mol 葡萄糖所需的酶量定義為一個酶活力單位（U）。 5．�0�7�0�0-葡萄糖苷酶活力的測定 取4 支洗凈烘乾的20mL 具塞刻度試管，編號後各加入1.5mL 0.5％水楊酸苷檸檬酸緩沖液，並向1 號試管中加入1.5mL DNS 溶液以鈍化酶活性，作為空白對照，比色時調零用。將4 支試管同時在50℃水浴中預熱5～10min，再各加入酶液0.5mL，50℃水浴中保溫30min，取出後立即向2、3、4 號試管中各加入1.5mL DNS 溶液以終止酶反應，充分搖勻後沸水浴5min，取出冷卻後用蒸餾水定容至20mL，充分混勻。以1 號試管溶液為空白對照調零點，在540nm 波長下測定2、3、4 號試管液的光密度值並記錄結果。 根據3 個重復光密度的平均值，在標准曲線上查出對應的葡萄糖含量，按下式計算出�0�7�0�0-葡萄糖苷酶活力（U/g）。在上述條件下，每小時由底物生成1�0�7�0�0mol 葡萄糖所需的酶量定義為一個酶活力單位（U）。五、結果計算 1．葡萄糖（G）標准曲線的製作（表2） 表2 標准曲線測定數據列表
❻ 剛果紅鑒別纖維素測定方法，氯化鈉沖洗什麼濃度
用這方法判斷酶活力大小的,實際上剛果紅是結合到培養基的多糖底物,但分解纖維素的細菌可以產纖維素酶,能分解這個多糖底物成為寡糖,這樣剛果紅就不能結合上去了,氯化鈉呢就可以使結合不牢的剛果紅洗去,這樣就留下大大小小的透明圈,大的透明圈當然分解纖維素的能就強。
剛果紅染色法的原理
剛果紅能與培養基中的纖維素形成紅色復合物.當纖維素被纖維素酶分解後,剛果紅—橘迅—纖維素的復合物就無法形成,培養基中會出現以纖維素分解菌為中心的透明圈,通過是否產生透明圈來篩選纖維素分解菌.
剛果紅染色法：
常用的剛果紅染色法有兩種,一種是先培養微生物,再加入剛果紅進行顏色反應,另一種是在倒平板時就加入剛果紅.
方法一 在長出茵落的培養基上,覆蓋質量濃度為1 mg／mI.的CR溶液,10～15 min後,倒去CR溶液,加入物質的量濃度為l mol／I.的NaCI溶液,15 min後倒掉NaCl溶液,此時,產生纖維素酶的茵落周圍將會出現透明圈.
方法二 配製質量濃度為10 mg／mI.的CR溶液,滅菌後,按照每200 mI.培養基加入1 mI.的比例加入CR溶液,混勻後倒平板.等培養基上長出茵落後,產生纖維素酶的菌落周圍將會出現明顯的透明圈.
兩種剛果紅染色法的比空伍較
剛果紅在篩選纖維素分解菌上的應用已經有超過20年的歷史,課本中給出了兩種方法斗伍或.方法一是傳統的方法,缺點是操作繁瑣,加入剛果紅溶液會使菌落之間發生混雜；其優點是這樣顯示出的顏色反應基本上是纖維素分解菌的作用.方法二的優點是操作簡便,不存在菌落混雜問題,缺點是由於在纖維素粉和瓊脂、土豆汁中都含有澱粉類物質,可以使能夠產生澱粉酶的微生物出現假陽性反應.但這種只產生澱粉酶的微生物產生的透明圈較為模糊,因為培養基中纖維素佔主要地位,因此可以與纖維素酶產生的透明圈相區分.方法二的另一缺點是：有些微生物具有降解色素的能力,它們在長時間培養過程中會降解剛果紅而形成明顯的透明圈,與纖維素分解菌不易區分.
❼ 嗜鹼纖維素酶活力的測定方法
CMC法和濾紙法。嗜鹼纖維素酶活力的測定方法有兩種，一種是適用於CX酶的陵仿CMC法，另悶舉一種是適用於C1酶螞汪碧的濾紙法。纖維素酶一種復合酶，是能夠將纖維素降解為葡萄糖的的總稱。
❽ 纖維素酶的檢測方法
1 酶的活力測試方法現狀：�纖維素酶是由黴菌等培養得到的一個自然的多組份混合物，它的生物催化作用可以使纖維素纖維發生水解，有效地控制水解速度和水解率可以得到纖維素纖維織物的不同處理要求，纖維素酶對纖維素纖維的作用分四個程序；滲入，內切，外切，糖化。�滲入決定於酶的分子量大小和纖維的內表面可及度，內切(在任意部位把纖維素苷鍵切斷)主要決定於組份中Cx酶的活力，外切(在纖維素的一端順序切下一個個雙糖)主要決定於C1酶的活力，糖化決定於把多糖轉化為單糖的葡萄糖酶Co的活力。多種組分的各自活力和協調構成了單位時間內纖維素纖維的降解糖化量，酶的活力測定對織物酶處理工藝設計有重要意義。� 酶的活力測定，有稱作催化活力測定，測定方法有；濾紙崩潰法，總糖比色法，粘度法……等。濾紙崩潰法屬於定性檢測，總糖比色法重點反映C1與Co的協調作用，粘度法重點反映Cx與C1的協調作用，兩者都可以用作定量測定。至今活力測定尚未有統一的方法，表示活力大小的計量單位更是多種多樣，丹麥NOVODISK(諾和諾得公司)早期採用總糖比色法（AF187．2／1－GB 82－08－10）一分鍾水解產生1μmol葡萄糖稱為一個NCU活力單位（NCU＝NOVO Cellulase Unit）。後來又採用粘度法（AF275／1－GB 1989－02－03）用一種活力為880EGU的內切葡聚糖酶，以其作用於CMC的粘度曲線為對比標准，測得的對應值以EGU／克作為一個內切酶活力單位（EGU＝Endo Glucase Unit）。
❾ 纖維素酶的鑒定方法
在纖維素分解菌的鑒定實驗中，纖維素酶的測定方法一般是對纖維素酶分解纖維念缺素後所產生的葡萄糖進行定量戚高檔測定高亂．
故選：B．
❿ 纖維素酶活力用什麼方法測定
纖 維 素 酶 是 一 種 復 合 酶 。 酶 系 包 括 外 切 B-1.4- 葡 聚 糖 酶 （ ExoB-1.4glucanase,EC3.2.1.9 ） 內 切 B-1.4 葡 聚 糖 酶 （ Endo β -1.4-glucanase,EC1.2.1.4） 和纖維二糖酶。纖維素酶在一定溫度和 PH 條件下， 將纖維素酶底物（濾紙或羥甲基纖維素鈉）水解，釋放出還原糖。在鹼性，煮沸 條件下，3.5-二硝基水楊酸（DNS 試劑）與還原糖發生顯色反應，其顏色的深淺 與還原糖（與葡萄糖汁）含量成正比。通過在 540nm 測定吸光度，可得到產生還 原糖的量，計算出纖維素酶的 FPA 酶和 CMCA 酶活力，以此代表纖維素酶的酶活 力。