目的基因檢測與鑒定四步方法

❶ 目的基因的檢測與鑒定過程是什麼

目的基因的檢測是看看目的基因進入受體細胞沒，所以先利用基因探針檢查受體細胞中是否含有目的基因；其次需要考慮，受體細胞中有了目的基因後是否能順利轉錄，因此還是基因探針來檢查信使RNA；含有信使RNA後還得考慮是否能翻譯形成蛋白質，利用抗原-抗體雜交來檢測蛋白質。最後，考試中經常考察最後的一步，有了蛋白質後是否就有了滿意的性狀，即個體生物學水平上的檢測，例如，我國的抗蟲棉經過了多次基因改造後才得到我們滿意的性狀。

❷ 關於目的基因的檢測與鑒定（高二生物）

如果目的基因沒有插入到染色體上的話，即使檢測到蛋白質或mRNA也不一定代表這是基因的產物，並且該性質不一定能穩定遺傳。
有可能生物體內本身能少量表達這種蛋白質，那即使檢測到mRNA或目的蛋白，也不代表基因重組成功了。
如果不檢測mRNA，而直接測目的基因和蛋白質，則不能確定蛋白質是由細胞本身基因所表達的還是外源的蛋白質。
如果不檢測蛋白質，即使目的基因在染色體上，並且能轉錄出mRNA，也不能保證此mRNA能正確翻譯。
上面的埋晌3步是必不可茄臘少的，缺少任何一步的實驗都是不嚴謹的顫液滑，沒有科學意義的。如樓上所說的，做科學是要有嚴謹的思維，每一部都是環環相扣的。

❸ 基因的表達和鑒定

大學的課本上用的是基因的表達和檢測
兩個都可以,只不過側重點不同

❹ 如何對目的基因進行檢測與鑒定

可以從三方面對目的基因進行鑒定：
1直接測定：按照目的基因組成製作DNA分子探針進行配對；
2 mRNA測定：根據目的基因組得出其哪銷轉錄的mRNA組成,利用探針檢測；
3蛋白測定：可旦讓應用PCR相應技術測定目的基因翻譯的相關蛋白,也可採用免疫化學法李遲游導入蛋白抗體檢測蛋白.

❺ 基因工程的主要步驟

什麼是基因工程？它包括哪些主要步驟
基因工程（genetic engineering）又稱基因拼接技術和DNA重組技術，是以分子遺傳學為理論基礎，以分子生物學和微生物學的現代方法為手段，將不同來源的基因按預先設計的藍圖，在體外構建雜種DNA分子，然後導入活細胞，以改變生物原有的遺傳特性、獲得新品種、生產新產品。第一步，獲取目的基因。第二步，目的基因與運載體結合。第三步，將目的基因導入受體細胞。第四步，目的基因的檢測與鑒定。
基因工程操作過程的主要步驟有哪些
一，目的基因的獲取。二，基因表達載體的構建。三，導入受體細胞。四，目的基因的檢測與鑒定。

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基因工程的操作過程的主要步驟包括哪些
提取目的基因、目的基因與運載體結合、將目的基因導入受體細胞、目的基因的檢測與表達。

基因工程的操作步驟
工具（1）酶：限制性核酸內切酶、DNA連接酶、（2）載體：質粒載體、噬菌體載體、Ti質粒、人工染色體1.提取目的基因獲取目的基因是實施基因工程的第一步。如植物的抗病（抗病毒 抗細菌）基因，種子的貯藏蛋白的基因，以及人的胰島素基因干擾素基因等，都是目的基因。要從浩瀚的「基因海洋」中獲得特定的目的基因，是十分不易的。科學家們經過不懈地探索，想出了許多辦法，其中主要有兩條途徑：一條是從供體細胞的DNA中直接分離基因；另一條是人工合成基因。直接分離基因最常用的方法是「鳥槍法」，又叫「散彈射擊法」。鳥槍法的具體做法是：用限制酶將供體細胞中的DNA切成許多片段，將這些片段分別載入運載體，然後通過運載體分別轉入不同的受體細胞，讓供體細胞提供的DNA（即外源DNA）的所有片段分別在各個受體細胞中大量復制（在遺傳學中叫做擴增，如使用PCR技術），從中找出含有目的基因的細胞，再用一定的方法把帶有目的基因的DNA片段分離出來。如許多抗蟲抗病毒的基因都可以用上述方法獲得。用鳥槍法獲得目的基因的優點是操作簡便，缺點是工作量大，具有一定的盲目性。又由於真核細胞的基因含有不表達的DNA片段，一般使用人工合成的方法。人工合成基因的方法主要有兩條。一條途徑是以目的基因轉錄成的信使RNA為模版，反轉錄成互補的單鏈DNA，然後在酶的作用下合成雙鏈DNA，從而獲得所需要的基因。另一條途徑是根據已知的蛋白質的氨基酸序列，推測出相應的信使RNA序列，然後按照鹼基互補配對的原則，推測出它的基因的核苷酸序列，再通過化學方法，以單核苷酸為原料合成目的基因。如人的血紅蛋白基因胰島素基因等就可以通過人工合成基因的方法獲得。2.目的基因與運載體結合基因表達載體的構建（即目的基因世旦與運載體結合）是實施基因工程的第二步，也搜禪擾是基因工程的核心。將目的基因與運載體結合的過程，實際上是不同來源的DNA重新組合的過程。如果以質粒作為運載體，首先要用一定的限制酶切割質粒，使質粒出現一個缺口，露出黏性末端。然後用同一種限制酶切斷目的基因，使其產生相同的黏性末端（部分限制性內切酶可切割出平末端，擁有相同效果）。將切下的目的基因的片段插入質粒的切口處，首先鹼基互補配對結合，兩個黏性末端吻合在一起，鹼基之間形成氫鍵，再加入適量DNA連接酶，催化兩條DNA鏈之間形成磷酸二酯鍵，從而將相鄰的脫氧核糖核酸連接起來，形成一個重組DNA分子。如人的胰島素基因就是通過這種方法與大腸桿菌中的質粒DNA分子結合，形成重組DNA分子（也叫重組質粒）的。3.將目的基因導入受體細胞將目的基因導入受體細胞是實施襲賣基因工程的第三步。目的基因的片段與運載體在生物體外連接形成重組DNA分子後，下一步是將重組DNA分子引入受體細胞中進行擴增。基因工程中常用的受體細胞有大腸桿菌，枯草桿菌，土壤農桿菌，酵母菌和動植物細胞等。用人工方法使體外重組的DNA分子轉移到受體細胞，主要是借鑒細菌或病毒侵染細胞的途徑。例如，如果運載體是質粒，受體細胞是細菌，一般是將細菌用氯化鈣處理，以增大細菌細胞壁的通透性，使含有目的基因的重組質粒進入受體細胞。目的基因導入受體細胞後，就可以隨著受體細胞的繁殖而復制，由於細菌的繁殖速度非常快，在很短的時間內就能夠獲得大量的目的基因。4.目的基因的檢測和表達目的基因導入受體細胞後，是否可以穩定維持和表達其遺傳特性，只有通過檢測與鑒定才能知道。這是基因工程的第四步工作。以上步驟完成後，在全部的受體細胞中，真正能夠攝入重組DNA分子的受體細胞是很少的。因此，必須通過一定的手段對受體細胞中是否導入了目的基因進行檢測。檢測的方法有很多種，例如，大腸桿菌......
基因工程技術包括哪些基本步驟
目的基因的提取、基因表達載體的構建、把目的基因導入受體細胞、目的基因的鑒定與檢測

❻ 基因工程的四個步驟

基因工程技術的基本步驟：
（1）目的基因的獲取：方法有從基因文庫中獲取、利用PCR技術擴增和人工合成．
（2）基因表達載體的構建：是基因工程的核心步驟，基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等．
（3）將目的基因導入受體細胞：根據受體細胞不同，導入的方法也不一樣．將目的基因導入植物細胞的方法有農桿菌轉化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因導入動物細胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因導入微生物細胞的方法是感受態細胞法．
（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術；②檢測目的基因是否轉錄出了mRNA--分子雜交技術；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質--抗原-抗體雜交技術．個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等．
由於基因工程按照人們的意願，進行嚴格的設計，所以在育種過程中能夠定向改變生物的性狀．
故答案為：目的基因的獲取  基因表達載體的構建   將目的基因導入受體細胞    目的基因的檢測與鑒定     定向

❼ 高二生物中的目的基因的檢測與鑒定

目的基因的檢測與鑒定分分子水平檢測和個體水平鑒定。
個體水平鑒定簡單說就是把導入了目的基因的生物體培養出來，看生物個體中是否能表達出你所需要的性狀。
分子水平檢測就相當麻煩了，它有三個步驟。
首先，要檢測轉基因生物的DNA上是否插入了目的基因。方法是採用DNA分子雜交技術，即將轉基因生物的基因組DNA提取出來，同時，在外面（像基因文庫中）取一段新的含有目的基因的DNA片段，用放射性同位素等作標記，以此來作為探針，將探針與基因組DNA雜交，來檢測。（實際上就是DNA復制的情況，DNA復制時，一條雙鏈的DNA分子解旋成了兩條單鏈的DNA，而探針也是一條雙鏈的DNA片段解旋成了兩條單鏈的DNA片段，因為探針上也有目的基因，基因組的DNA上也有目的基因，在重新形成新的2條DNA，也就是復制時，鹼基互補配對，則含目的基因的探針上的單鏈能與同樣含目的基因的基因組DNA單鏈配對，形成一條新的DNA雙鏈分子，一旦形成新的DNA分子後，放射性標記能在新的DNA分子中含目的基因處發出熒光，從而表明目的基因已導入。）
其次，就是大大你說的檢測目的基因是否轉錄出了mRNA，方法和上面一樣，但不同之處是，從轉基因生物中提取出的是mRNA，同樣，同時，在外面（像基因文庫中）取一段新的含有目的基因的DNA片段，用放射性同位素等作標記，以此來作為探針，將探針與mRNA雜交，來檢測。（這里實際上和DNA的轉錄翻譯有點像，畢竟mRNA是單鏈的，實際上是探針DNA解旋成兩條單鏈的DNA片段，就像轉錄一樣，這時的mRNA會與單鏈的DNA鹼基互補配對，顯現出標記的同位素熒光，表明mRNA上有目的基因。）所以說，mRNA與目的基因雜交，是和DNA雜交，不是mRNA與目的基因的轉錄出的mRNA雜交。
最後要檢驗的就是看目的基因能否翻譯成蛋白質，就不多說了。
不知道講的清不清楚，語文表達有限，希望你能理解啊。

❽ 重組DNA技術包括哪四個步驟

重組DNA技術主要包括四個步驟：提取目的基因、目的基因與運載體結合、將目的基因導入受體細胞、目的基因的檢測和表達。

1、提取目的基因

獲取目的基因主要有兩條途徑：一條是從供體細胞的DNA中直接分離基因；另一條是人工合成基因。直接分離基因最常用的方法是「鳥槍法」，又叫「散彈射擊法」。

2、目的基因與運載體結合

目的基因與運載體結合的過程實際上是不同來源的DNA重新組合的過程，是基因工程的核心。

3、將目的基因導入受體細胞

用人工方法使體外重組的DNA分子轉移到受體細胞，主要是借鑒細菌或病毒侵染細胞的途徑。目的基因導入受體細胞後，就可以隨著受體細胞的繁殖而復制，由於細菌的繁殖速度非常快，在很短的時間內就能夠獲得大絕舉量的目的基因。

4、目的基因的檢測和表達

目的基明歷因導入受體細胞後，是否可以穩定維持和表達其遺傳特性，只有通過檢測與鑒定才能知道。受體細胞必須表現出特定的性狀，才能說明目的基因完成了表達過程。

(8)目的基因檢測與鑒定四步方法擴展閱讀

重組DNA技術是指將一種生物體（供體）的基因與載體在體外進行拼接重組，然後轉入另一種生物體（受體）內，使之按照人們的意願穩定遺傳並表達出新產物或新性狀的DNA體激宏搜外操作程序，也稱為分子克隆技術。因此，供體、受體、載體是重組DNA技術的三大基本元件。

重組DNA技術使用的酶有限制性核酸內切酶、DNA連接酶。常用的載體有質粒載體、噬菌體載體、Ti質粒、人工染色體。

❾ 目的基因的檢測與鑒定

目的基因的檢測枝消此是檢測標記基因,而其鑒定是觀測目的基猛迅因所表達出來的性狀。
所謂檢測,就是看目的基因是否已經成功導入受體細胞橋培,要看的是標記基因。導入細胞後,基因並不一定會遺傳給後代並表達出來,所以要再鑒定目的基因的性狀。注意!一定是先檢測,後鑒定。因為受體細胞表達的不一定是整合到細胞核內的,即不一定是能傳給下一代的,所以要先檢測篩選掉沒有標記基因的(剩下的都可以穩定遺傳)再檢測,選出能夠表達的。
羅嗦了半天,不知樓主明白了沒有。。。