ldh檢測方法

㈠ LDH是用來檢測什麼是啊

LDH是乳酸脫氫酶 LDH屬糖酵解酶，廣泛存在於各種組織中，以心肌、骨骼肌、腎臟、肝臟中含量最豐富檔伏，LDH測定常用於診斷心肌梗行者攜塞，肝病和某些惡性腫瘤。

增高見於：心肌梗塞，心肌梗塞後9～20h開始上升，36～60h達到高峰，持續6～10天恢復正常(比AST、CK持續時間長)，因此可作為急性心肌梗塞後期的輔助診斷指標；肝臟疾病，如急性肝炎、慢性活動性肝炎、肝癌、肝硬化、阻塞性黃疸等；血液病，如白血病、貧血、惡性淋巴瘤等；骨骼肌損傷、進行性肌萎縮、肺梗塞等；嫌握惡性腫瘤轉移所致胸、腹水中乳酸脫氫酶活力往往升高。

㈡ 血乳酸的醫學檢查

（1）全血乳酸測定（分光光度法）：在NAD存在下，LDH催化乳酸脫氫，氧化成丙酮酸。加入硫酸肼使丙酮酸不斷被轉換消除，並促進反應完成。反應完成後生成的NADH與乳酸為等摩爾，在340nm波長下測定NADH的量，計算乳酸的含量。
（2）血漿及血清乳酸測定（比色法）：以氧化型輔酶Ⅰ（NAD）作氫受體，LDH催化L-乳酸脫氫，生成丙酮酸，NAD轉變成還原型輔酶Ⅰ（NADH）。酚嗪二甲酯硫酸鹽（PMS）將NADH的氫傳遞給氯化硝基四氮唑藍（NBT），使其還原。在530nm波長的吸光度與乳酸含量呈線性關系。 （1）全血乳酸測定（分光光度法）：
①50g/L偏磷酸（MPA）：稱取5.0g MPA，溶於蒸餾水中，並稀釋到100ml，新鮮配製。
②30g/L偏磷酸：稱取3.0g MPA，溶於蒸餾水中，並稀釋到銷耐100ml，新鮮配製。
③Tris-硫酸肼緩沖液，pH9.6（Tris 79mmol/L；硫酸肼400mmol/L）；取1mol/L氫氧化鈉350ml，加入Tris 4.79g，硫酸肼26g，EDTA-Na2 0.93g，以1mol/L氫氧化鈉調至pH 9.6，用蒸餾水稀釋到500ml，4℃保存可穩定8天。
④27mmol/L NAD溶液：根據需要量稱取NAD溶於蒸餾水中，4℃可穩定48h。
⑤LDH溶液：取LDH原液，用生理鹽水稀釋成1500U/ml（如用SigmaⅢ型LDH，該製品從牛心提制，每毫升含10mg蛋白，每毫克蛋白具有LDH活性400～600U，用鹽水稀釋成3mg/ml蛋白即可）。
⑥1mmol/L（9.08mg/dl）乳酸標准液：精確稱取L-乳酸鋰9.6mg（或DL-乳酸鋰19.2mg），以少量蒸餾水溶解，加入25μl濃硫酸，用蒸餾水稀釋到100ml，4℃保存可長期穩定。
（2）血漿及血清乳酸測定（比色法）：
①0.1mol/L Tris-HCl緩沖液（pH 9.0）：取Tris 12.12g，溶於約800ml蒸餾水中，加入TritonX-100 40ml，混勻，以1mol/L鹽酸調節至pH9.0，蒸餾水稀釋至1L。
②無乳酸蛋白液：取Sephadex G25，用蒸餾水充分溶脹後裝柱。層析柱內徑16mm，裝柱高360mm。有蒸餾水反復流洗後，取20ml肝功能試驗正常的混合血清上柱，用蒸餾水洗脫。待洗脫物開始出現混濁時收集，共收集20ml，加入少許氯化鈉（約0.1g）及疊氮鈉20mg，置冰箱保存。按本法測定乳酸（即無乳酸蛋白液代替標本進行測定），測定管與對照管吸光度之差應小於0.015。可按100ml上述緩沖液加無乳酸蛋白液5ml，混合後置冰箱保存。
③乳酸脫氫酶溶液：用全血法。
④5mmol/L乳酸標准液：溶解DL-乳酸鋰96mg或L-乳酸鋰48mg於蒸餾水中並稀褲談釋至100ml，4℃保存。LDH只催化L（+）-乳酸。
⑤呈色劑：溶解NBT82mg於20ml蒸餾水中，可稍加熱助溶，不溶物需離心去除。再加入NAD200mg，最後中入PMS 5mg，混合後置棕色瓶中，4℃保存，至少可用6個月。 （1）全血乳酸測定（分光光度法虧純春）①應在空腹及休息狀態下抽血。不用止血帶，不可用力握拳。如用止血帶，應在穿刺後除去止血帶2min後再抽血。最好用肝素化的注射器抽血，抽取後立即注入預先稱量的含冰冷蛋白沉澱劑的試管中。如用血漿測定，每毫升血用10mg氟化鈉及2mg草酸鉀抗凝，立即冷卻標本，並在15min內離心。
抽血前試管編號，稱重（Wt）並記錄。加入6ml MPA（50g/L），再稱重（Wm）後放入冰浴中，每份標本最好作雙管分析。抽血後，立即注入上述試管中，每管2ml。顛倒混合3次，不可產生氣泡。待試管溫度與室溫平衡後，再稱重（Wb）。靜置至少15min後，離心沉澱（400r/min，15min）。上清液必須澄清。計算稀釋因數D：
D=Wb－Wt/Wb－Wm
②偏磷酸在水溶液易中形成多聚體（HPO3），水化成正磷酸（HPO3+H2O→H3PO4）。正磷酸不沉澱蛋白質，偏磷酸溶液沉澱蛋白的能力在4℃時僅能維持大約1周。
③本法線性范圍達5.6mmol/L（50mg/dl）。
④本法不用過氯酸作蛋白沉澱劑。
⑤一般乳酸鋰未標明L-或DL-者，均為DL-型，L-型乳酸鋰價格昂貴。
（2）血漿及血清乳酸測定（比色法）混勻後，用分光光度計在530nm波長，10mm光徑比色杯，以蒸餾水調零讀取各管吸光度。
①本法條件下，NBT還原生成物在反應液中十分穩定，無混濁和沉澱，吸光度久置不變。
②肝素抗凝血漿、血庫ACD保養液抗凝血漿、腦脊液、尿液、胃液等均可用本法測定。
③加入蛋白質對反應及生成物溶液的穩定是必要的。同時加入蛋白質及表面活性劑，可提高靈敏度及穩定性。Brij-35和TritonX-100有同樣效果。人血清白蛋白中含乳酸濃度較高，不適用。因人血清白蛋白的顯色強度平均較牛血清白蛋白高1.06倍，如用牛血清白蛋白，且僅加於標准管中時，標准管吸光度須乘此數。
④無乳酸蛋白液可與緩沖液預先混合後再加入1ml，代替表2中分別加入。
⑤本法線性范圍達8.0mmol/L（73mg/dl）。
⑥吸光度隨孵育時間延長而增加，必須准確10min。加入0.1mol/L鹽酸後吸光度不變。
⑦抗凝劑用肝素-氟化鈉較好（1mg肝素，6mg氟化鈉可抗凝5ml血）。血液抽出後，血標本管置冰浴中送檢，盡快分離血漿，放冰室保存待測。草酸鉀對LDH有一定抑製作用，抽血較少而草酸鉀相對多時尤為明顯。 （1）全血乳酸測定（分光光度法）：全血乳酸0.5～1.7mmol/L（5～15mg/dl）。尿液乳酸為5.5～22mmol/24h。
（2）血漿及血清乳酸測定（比色法）：小於2.4mmol/L（22.0mg/dl，呈正偏態分布，95%百分位數上限）。 組織嚴重缺氧可導致三羧酸循環中丙酮酸需氧氧化的障礙，丙酮酸還原成乳酸的酵解作用增強，血中乳酸與丙酮酸比值增高及乳酸增加，甚至高達25mmol/L。這種極值的出現標志著細胞氧化過程的惡化，並與顯著的呼吸增強、虛弱、疲勞、恍惚及最後昏迷相聯系。即使酸中毒及低氧血症已得到處理，此種高乳酸血症常為不可逆的。見於休克的不可逆期、無酮中毒的糖尿病昏迷和各種疾病的終末期。
在休克、心失代償、血液病和肺功能不全時，常見的低氧血症同時有高乳酸血症，在低氧血症及原發條件處理後常是可逆的。在肝臟灌流量降低的病例，乳酸由肝的移除顯著降低，會出現乳酸酸中毒。

㈢ ldh檢測為什麼要測細胞內活性

國外檢敗褲孝測體外細胞毒性比較常用的方法有MTT比色法，XTT比色法，利用線粒體內部酶的活性，將特定的四唑鹽類進行轉化，然後通過酶標儀進行檢測
LDH法，通過檢測細胞培察稿養上純型清中LDH的酶活性，來檢測細胞毒性
其他還有細胞增殖度法，檢測鹼性磷酸酶活性等。

㈣ LDH在醫學名詞里是什麼意思

LDH在醫學名詞里是乳酸脫氫酶。

乳酸脫氫酶（lactate dehydrogenase，LDH）幾乎存在於所有組織中，以心、骨骼肌和稿跡腎臟最豐富，其次為肝、脾、胰腺、腦、肺臟等。

採用電泳法可將人組織中的乳酸脫氫酶同工酶分離出5種同工酶區帶，根據其電泳遷移率的快慢，依次為LDH-2、LDH-1、LDH-3、LDH-4、LDH-5。乳酸脫氫酶同工酶分布存在明顯的特異性，可用於心肌疾病的診斷。

(4)ldh檢測方法擴展閱讀：

乳酸脫氫酶的測定方法：

1、乳酸脫氫酶的測定

乳酸脫帶敬滲氫酶催化乳酸氧化為丙酮酸為可逆反應，正反兩個方向的反應均能測蠢脊定。但逆反應測得的乳酸脫氫酶活性比正反應高得多，所以採用不同的測定方法得出的結果也會不同。

2、乳酸脫氫酶同工酶測定

乳酸脫氫酶同工酶的測定方法有電泳法、離子交換柱層析法、免疫法、抑製法和酶切法。

㈤ 尿素的測定方法

尿素的測定方法有色譜法、分光光度法、電化學法和儀器分析法。

1、色譜法：色譜法是目前尿素測定的常用方法。將尿素水解後釋放出來的NH3，經過適當的前處理後，用氣相色譜儀進行測定。

2、分光光度法：該方法通過利用尿素和溴酸反應獲得反應產物的吸收值來測量尿素的含量。

3、電化學法：利用尿素的水解即可以產生氨氣的性質，將含尿素的拍岩樣品進行加溫水解，所得的NH3通過導電池中傳導到電極，利用所測量的電流或電勢來計算樣品中尿素的含量。

4、儀器分析法：目前有一些儀器，如自動生化世賀寬儀，能夠通過測定乳酸脫氫酶（LDH）催化尿素水解，生成氨氣並計算尿素的含量。

測量尿素的注意事項

需要注意的是，不同測定方法具有自身的優點和適用范圍，應根據具體情況來選擇合適的測定方法。另外，在進行尿素的測定時，需要根據尿液或者血液樣品進行前處理，避免干擾物質對測定結果的影響。

㈥ 漿膜腔積液檢驗的LDH測定

1.LDH（乳酸脫氫酶）檢測主要用於滲出液和漏出液的鑒別。當漿膜腔積液中LDH與血清LDH之比值≥0.6時，多為滲出液；反之則為漏出液。
2.當胸水或腹水中LDH與血清LDH比值>1時，對胸、腹膜惡性腫瘤或轉移癌的診斷有一定意義。