轉基因檢測方法

『壹』 如何測試轉基因食品

為了保障消費者的知情權與選擇權，市場上的轉基因產品標識一般直接印製在產品標簽上，以轉基因大豆油為例，標注為「轉基因大豆加工品」或「加工原料為轉基因大豆」。

『貳』 利用轉基因測試紙檢測是否是轉基因食品

目前轉基因的檢測方法轉基因作物檢測方法大體分為兩種：一是檢測是否含有外源蛋白，即外源基因表達產物，主要採用酶聯免疫吸附法和試紙條法；二是檢測是否含有外源基因(DNA)，主要有Southern雜交技術、基因晶元法和PCR檢測法。理論上來說，以上所介紹的轉基因檢測方法，只要改變相應的檢測靶標，都可檢測不同的轉基因產品。但是實際應用中，以檢測外源蛋白的轉基因檢測方法存大很大的局限性，食品的復雜成分會干擾檢測效果，並且加工過的轉基因食品中的蛋白質抗原性很容易受破壞，從而會影響檢測結果的靈敏度。此外，該方法需要大量的抗體和抗原。目前，商品化的ELISA檢測試劑盒和膠體金試紙條只能檢測少數幾種轉基因產品，且一種試劑盒或試紙條只能針對某一特定轉基因產物，不能針對多種混合成分的食品樣品進行檢測。基因水平的檢測方法具有適用范圍廣的優勢，只要樣品中有DNA存在，就能被檢測，不受食品混合、復雜成分的干擾，適用於轉基因原料、初加工和深加工食品的檢測，而且有很好的特異性和靈敏度，已經發展為常用的轉基因食品檢測方法。目前，所有商業化的轉基因食品都有相應的PCR檢測方法標准。目前，轉基因PCR檢測產品多數產自國外，價格都比較高，國內就廣州有家迪澳生物，轉基因檢測產品在算是國內最齊全的，有儀器及配套試劑。

『叄』 轉基因作物檢測方法

轉基因作物檢測大體分為兩種：一是檢測是否含有外源蛋白，即外源基因表達產物，主要採用酶聯免疫吸附法和試紙條法；二是檢測是否含有外源基因(DNA)，主要有Southern雜交技術、基因晶元法和PCR檢測法。

『肆』 轉基因的植株要怎樣檢測

在植物遺傳轉化中，外源基因導入植物細胞的頻率是相當低的。在數量龐大的受體細胞群體中，通常只有為數不多的一小部分細胞獲得了外源DNA，而目的整合到基因組並實現表達的轉化細胞則更少。

因此，必須採用一定的檢測方法，才能篩選和鑒定出含有目的基因的重組體。目前已發展出一系列的轉基因植物的篩選和鑒定方法。在這些鑒定和篩選方法，根據檢測的基因功能來劃分，可分為調控基因（包括啟動子終止子等）檢測、選擇標記基因檢測和目的基因直接檢測。

根據檢測的不同階段區分，有整合水平檢測和表達水平的檢測，基因整合檢測方法主要有Southern雜交、PCR、PCR-Southern雜交、原位雜交和DNA分子標記技術法，表達水平的檢測包括轉錄水平檢測和翻譯水平檢測，轉錄水平的檢測法有Northern雜交和反轉錄PCR（reverse：transcribed：PCR，RT-PCR）檢測，翻譯水平的檢測有酶聯免疫吸附法（enzyme：linked：immuno：sorbent：assay，ELISA）和Western雜交等，其中最簡便和使用廣泛的表達水平的檢測是報告基因檢測法。由於這些方法的具體操作已在其他章節（課程）介紹過，這里只側重介紹基於選擇標記基因和報告基因的篩選和鑒定方法。

『伍』 轉基因作物檢測方法有哪些

轉基因作物檢測大體分為兩種：一是檢測是否含有外源蛋白,即外源基因表達產物,主要採用酶聯免疫吸附法和試紙條法；二是檢測是否含有外源基因(DNA),主要有Southern雜交技術、基因晶元法和PCR檢測法.

『陸』 轉基因食品的檢測方法有哪些各有什麼優缺點

目前轉基因成分的檢測方法主要有ELISA（酶聯免疫吸附法）和側向流動免疫測定法、普通聚合酶鏈式反應（PCR）的優缺點、實時熒光定量PCR（qPCR）、恆溫熒光PCR檢測方法等。

ELISA（酶聯免疫吸附法）
ELISA具備了酶反應的高靈敏度和抗原抗體反應的特異性，具有簡便、快速、費用低等特點，但易出現本底過高的問題，且只能檢測目的蛋白抗原性沒有明顯變化的粗加工產品。直接法和雙抗夾心法都要制備特異的酶標抗體，制備方法較繁瑣，且一種酶標抗體只能檢測一種蛋白，而適用於間接法的酶標抗抗體已有商品出售。一種轉基因蛋白的檢測試劑盒是否能在表達相同外源蛋白的不同植物之間通用還要進行試驗。

側向流動免疫測定法：
「側流」型免疫測定是最近15年發展起來的，該方法之前主要用於醫學領域。與ELISA相似，這種測定方法也是基於三明治夾心式技術原理，但該方法是在一種固相支持物上而不是在管子里進行，標記的抗原-抗體復合物側向遷移，直至遇到在一種固定表面上的抗體。目前市場上已出現了用於側向流動免疫測定並能用於野外測試的試劑盒。與DNA為基礎的檢測方法相比，該方法的樣品處理簡單。由於目標蛋白一般是水溶的且抗體具有高度專一性，因此檢測樣品僅需要初步處理便能達到測試的要求，具有快速、簡便、適合野外操作等優點。側向流動免疫測定試紙條是一種很快速簡便的定性檢測方法，將試紙條放在待測樣品抽提物中，5～10分鍾就可得出結果，不需要特殊儀器和熟練技能。但一種試紙條只能檢測一種蛋白質，且只能檢測有無存在外源蛋白而不能區分具體的轉基因品種。側向流動免疫測定方法是定性或是半定量。按照合適的采樣步驟，可以在給定的一批樣品中以99%的置信水平檢測出少於0.15%的轉基因成分。

普通聚合酶鏈式反應（PCR）的優缺點
優點：
1)准確度較高
2)靈敏度高
3)價格低
缺點：
1)操作復雜需要一定的專業背景
2)電泳時使用的染料對人體有一定危害
3)只能檢測一個指標

實時熒光定量PCR（qPCR）的優缺點
優點
1)靈敏度高
2)准確度高
3)高通量
4)可以實現實時監控
5)可以實現定量判斷
缺點
1)價格高昂
2)操作復雜
3)配套產品少
4)維護費用高

恆溫熒光PCR檢測方法：
恆溫PCR技術的特點可以概括為比PCR更准確、快速、易於實現。因實現恆溫擴增，特殊的引物設計，使得檢測更准確；無變性、退火等環節，全過程均在進行DNA片段的復制，沒有時間損耗，使檢測更快速；無熱循環需求，設備簡單，更易於推廣應用。為PCR技術推廣應用創造了全新的空間。目前主流的實時恆溫熒光PCR儀有廣州迪澳生物Deou—308C恆溫熒光檢測儀、3M Molecular Detection System、Optigene Genie II 和 Genie III、Qiagen TuberScaner II、Envirologix DNAble等。

『柒』 轉基因的檢測方法比較

目前常用的轉基因檢測方法有試紙條法、普通聚合酶鏈式反應（PCR）、實時熒光定量PCR、恆溫熒光PCR、數字PCR
試紙條：簡單、快速，但對於深加工食品不適用
普通聚合酶鏈式反應（PCR）：准確度較高，靈敏度高，價格低，缺點是專業性要求高，電泳的染料對人體有害，只能檢測一個指標
實時熒光定量PCR：靈敏度高、准確度高、高通量、可實時監控，可定量判斷、自動化程度高，缺點是儀器價格高昂、操作復雜、配套產品少、維護費用高
恆溫熒光PCR：靈敏度高、特異性強、快速還可實時監控，儀器性價比高，利於推廣
數字PCR：准確度高、重現性好、可絕對定量、檢測通量高、靈敏度好，但儀器價格昂貴

『捌』 轉基因生物檢測有哪些方法

轉基因就是通過生物技術，將某個基因從生物中分離出來，然後植入另一種生物體內，從而創造一種新的人工生物。例如，科學家認為北極魚體內某個基因有防凍作用，於是將它抽出，再植入蕃茄之內，製造新品種的耐寒蕃茄就是一種轉基因生物。含有轉基因生物成份的食品稱為轉基因食品。
轉基因生物具有外來的基因，對大自然生態系統來說是全新品種，若釋放到環境，會改變物種間的競爭關系，破壞原有自然生態平衡，導致物種滅絕和生物多樣性的喪失。轉基因生物會在自然界中自我繁殖，並和其近親品種雜交，從而使得外來基因在自然中以不可控制方式傳播，造成不可挽回的基因污染。

『玖』 轉基因植物有哪些分析鑒定方法

分析、確定了75個品種的轉基因構建成分,為開展轉基因檢測奠定了基礎。

2、不同類型的植物提取基因組DNA的方法略有差異,該研究優化了CTAB、SDS快速提取法,並選擇了磁珠吸附試劑盒法,成功提取了適合於PCR反應的植物基因組DNA。

3、以植物內源基因18SrRNA為靶標,設計、優化後篩選出特異性引物和探針,建立了以18SrRNA為目標的檢測植物基因組DNA提取質量的PCR與熒光PCR鑒定體系。

4、首次以CaMV35S、FMV啟動子、NOS終止子、標記基因NPTII、抗除草劑基因EPSPS、PAT、抗蟲基因CryIAb為檢測目標,設計、篩選出特異性引物,優化實驗參數,建立了轉基因植物PCR定性檢測方法體系,靈敏度達0。

1﹪。

5、克隆了CaMV35S、FMV啟動子、NOS終止子、標記基因NPTII、抗除草劑基因EPSPS、PAT、抗蟲基因CryIAb的陽性質粒作為轉基因植物檢測的陽性對照。

6、於反應體系中引入UNG酶,建立了無污染的熒光PCR擴增體系。

7、首次以FAM熒光素標記探針5端作為發光基團,以TARMA標記探針3端為淬滅基團,以CaMV35S、FMV啟動子、NOS終止子、標記基因NPTII、抗除草劑基因EPSPS、PAT、抗蟲基因CryIAb為檢測目標,設計、篩選出特異性引物和探針,優化實驗參數,建立了轉基因植物通用性熒光PCR定性檢測方法體系。

8、以FAM和TET兩種熒光素標記外源基因和內源基因,建立了轉基因大豆抗除草劑基因EPSPS和轉基因玉米抗蟲基因CryIAb的熒光PCR定量檢測體系,兩體系的靈敏度均達到0。

1﹪以上。

9、首次利用反向PCR技術擴增出華番1號基因組未知DNA序列,並通過DNA測序,利用BLAST軟體進行同源性比較,找出載體與基因組整合位點DNA序列。

10、利用熒光PCR技術,設計出特異性引物與探針,優化實驗參數,建立了一種靈敏、精確、定量和鑒定華番1號品種特異性的高效檢測體系。

這在國內為首次利用整合位點進行轉基因植物檢測和品種特異性鑒定的方法……