生化檢測的方法

『壹』 生化檢驗是怎樣的

生物化學是探討生命奧秘的一個科學分支，利用生物化學來對病人進行檢驗的方法就叫生物化學檢驗。

我們知道，人體是個復雜的有機體，大約由60億個細胞組成，而每個細胞又含有數目驚人的分子。人體中還有各種糖類、脂肪、蛋白質、維生素、無機鹽、礦物質、微量元素。人體為了維持生命和自身成分的穩定，無時無刻不在進行著化學反應。我們肚子餓時會吃個饅頭，饅頭通過唾液中的澱粉酶作用，經過一系列化學反應就變成了糖，糖再經過一系列化學反應變成了能量，能量可以維持人體的正常生命活動。在吃饅頭的過程中就發生了無數的化學反應。

我們人體內有多種物質，如果這些物質能保持一個均衡比例的話，人就是健康的；如果這些物質中有的多了，有的少了，就會引起疾病。通過對這些物質的監測，我們就能診斷疾病。生化檢驗就是做這項工作的，它通過對病人的血液、尿液、唾液、淚液、體腔積液等體液樣品的生化指標進行分析，幫助醫生診斷疾病、制定治療方案。生化檢驗不像B超、放射等檢查那樣需要病人的參與，它只要能取到病人的體液即可進行檢查，非常方便。

現在，人們已經研製出了全自動生化檢驗儀器，一台儀器就可以對人體做全部生化檢驗。檢查人員只要把樣品送入儀器，自動離心、分析、匯總、列印，這個過程一般10分鍾就能完成。而在未發明這種儀器之前，生化檢驗要做幾個小時，病人拿到報告就更慢了。

隨著生化檢查技術的提高，一些以前靠影像儀器診斷的疾病，現在也可以通過生化檢查來完成了，比如，心肌梗塞病人的血中會出現「心肌肌鈣蛋白」，通過化驗患者血液即可確診是否患有心肌梗塞。現在很多醫院就是用生化檢驗來進行臨床診斷的。

『貳』 臨床生化檢驗方法分幾級

臨床生化檢驗方法根據其准確度與精密度的不同可以分為決定性方法、參考方法、常規方法等三級。
1．決定性方法（definitive method） 是指准確度最高，系統誤差最小，經過詳細的研究，沒有發現產生誤差的原因或在某些方面不夠明確的方法。用於發展及評價參考方法和一級標准品。
2．參考方法（reference method） 是指准確度與精密度已經充分證實的分析方法，干擾因素少，系統誤差與重復測定的隨機誤差相比可以忽略不計，有適當的靈敏度、特異性及較寬的分析范圍。這類方法在條件許可的實驗室中應經常使用。用於評價常規方法和試劑盒，鑒定二級標准品。
3．常規方法（routine method） 指性能指標符合臨床或其他目的的需要，有足夠的精密度、准確度、特異性和適當的分析范圍，而且經濟實用。這類方法經有關學術組織認可後可稱為推薦方法（recommended method），推薦方法應具有足夠的實驗證據。

『叄』 自動生化分析儀常用分析方法有哪幾種

自動生化分析儀上常用的分析方法主要有以下三種：
(1)終點分析法(平衡法)包括一點終點法、兩點終點法和雙波廳猜長法終點法。
(2)連續監測法(又稱動態分析法、速率法或動力學法)是測定底物的消耗或產物生成速度的化學方法。
(3)比濁測定法是通過檢測物質對光的散射或透射強度來咐此測定物質的方衡伏迅法。另外，還有均相酶免疫分析法。

『肆』 常用生化檢測項目分析方法舉例及參數設置

常用生化檢測項目分析方法舉例及參數設置

常用生化檢測項目有哪些你知道嗎?你對常用生化檢測項目了解嗎?下面是我為大家帶來的關於常用生化檢測項目分析方法舉例及參數設置的知識，歡迎閱讀。

一、常用生化檢測項目

1.終點法檢測常用的有總膽紅素(氧化法或重氮法)、結合膽紅素(氧化法或重氮法)、血清總蛋白(雙縮脲法)、血清白蛋白(溴甲酚氯法)、總膽汁酸(酶法)、葡萄糖(葡萄糖氧化酶法)、尿酸(尿酸酶法)、總膽固醇(膽固醇氧化酶法)、甘油三酯(磷酸甘油氧化酶酶法)、高密度脂蛋白膽固醇(直接測定法)、鈣(偶氮砷Ⅲ法)、磷(紫外法)、鎂(二甲苯胺藍法)等。以上項目中，除鈣、磷和鎂基本上還使用單試劑方式分析因而採用一點終點法外，其它測定項目都可使用雙試劑故能選用兩點終點法，包括總蛋白、白蛋白測定均已有雙試劑可用。

2.固定時間法苦味酸法測定肌酐採用此法。

3.連續監測法對於酶活性測定一般應選用連續監測法，如丙氨酸氨基轉移酶、天冬氨酸氨基轉移酶、乳酸脫氫酶、鹼性磷酸酶、γ谷氨氨醯基轉移酶、澱粉酶和肌酸激酶等。一些代謝物酶法測定的項目如己糖激酶法測定葡萄糖、脲酶偶聯法測定尿素等，也可用連續監測法。

4.透射比濁法透射比濁法可用於測定產生濁度反應的項目，多數屬免疫比濁法，載脂蛋白、免疫球蛋白、補體、抗"O"、類風濕因子，以及血清中的其他蛋白質如前白蛋白、結合珠蛋白、轉鐵蛋白等均可用此法。

二、分析參數設置

分析儀的一些通用操作步驟如取樣、沖洗、吸光度檢測、數據處理等，其程序均已經固化在存儲器里，用戶不能修改。各種測定項目的分析參數(analysisparamete)大部分也已設計好，存於磁碟中，供用戶使用;目前大多數生化分析儀為開放式，用戶可以更改這些參數。生化分析儀一般另外留一些檢測項目的空白通道，由用戶自己設定分析參數。因此必須理解各參數的確切意義。

一、分析參數介紹

(一)必選分析參數

這類參數是分析儀檢測的前提條件，沒有這些參數無法進行檢測。

1.試驗名稱 試驗名稱(test code)是指測定項目的標示符，常以項目的英文縮寫來表示。

2.方法類型(也稱反應模式) 方法類型(assay)有終點法、兩點法、連續監測法等，根據被檢物質的檢測方法原理選擇其中一種反應類型。

3.反應溫度 一般有30℃、37℃可供選擇，通常固定為37℃。

4.主波長 主波長(primary wavelength)是指定一個與被測物質反應產物的光吸收有關的波長。

5.次波長 次波長(secondary wavelength)是在使用雙波長時，要指定一個與主波長、干擾物質光吸收有關的波長。

6.反應方向 反應方向(response direction)有正向反應和負向反應兩種，吸光度增加為正向反應，吸光度下降為負向反應。

7.樣品量 樣品量(sampling volum)一般是2μl～35μl，以0.1μl步進，個別分析儀最少能達到1.6μl。可設置常量、減量和增量。

8. 第一試劑量 第一試劑量(first regengt volum)一般是20～300μl，以1μl步進。

9. 第二試劑量 第二試劑量(second regengt volum)一般也是20～300μl，以1μl步進。

10.總反應容量 總反應容量(total reacting volum)在不同的分析儀有一個不同的規定范圍，一般是180～350μl，個別儀器能減少至120μl。總反應容量太少無法進行吸光度測定。

11.孵育時間 孵育時間(incubate time)在終點法是樣品與試劑混勻開始至反應終點為止的時間，在兩點法是第一個吸光度選擇點開始至第二個吸光度選擇點為止的時間。

12.延遲時間 延遲時間(delay time)在連續監測法中樣品與反應試劑(第二試劑)混勻開始至連續監測期第一個吸光度選擇點之間的時間。

13.連續監測時間 連續監測時間(continuous monitoring time)在延遲時間之後即開始，一般為60～120s，不少於4個吸光度檢測點(3個吸光度變化值)。

14.校準液個數及濃度 校準曲線線性好並通過坐標零點的，可採用一個校準液(calibrator);線性好但不通過坐標零點，應使用兩個校準液;對於校準曲線呈非線性者，必須使用兩個以上校準液。每一個校準液都要有一個合適的濃度。

15.校準K值或理論K值 通過校準得到的K值為校準K值(calibrate coefficient)或由計算得出的K值為理論K值。

16.線性范圍 即方法的線性范圍(linearity range)，超過此范圍應增加樣品量或減少樣品量重測。與試劑/樣品比值有關。

17.小數點位數 檢測結果的小數點位數(decimal point digit)。

(二)備選分析參數

這類分析參數與檢測結果的准確性有關，一般來說不設置這類分析參數，分析儀也能檢測出結果，但若樣品中待測物濃度太高等，檢測結果可能不準確。

1.樣品預稀釋 設置樣品量、稀釋劑量和稀釋後樣品量三個數值，便可在分析前自動對樣品進行高倍稀釋。

2.底物耗盡值 底物耗盡值(substrate exhaust limit)在負反應的酶活性測定中，可設置此參數，以規定一個吸光度下降限。若低於此限時底物已太少，不足以維持零級反應而導致檢測結果不準確。

3.前區檢查 免疫比濁法中應用，以判斷是否有抗原過剩。將終點法最後兩個吸光度值的差別(ΔA)設置一個限值，如果後一點的吸光度比前一點低，表示已有抗原過剩，應稀釋樣品後重測。

4.試劑空白吸光度范圍 超過此設定范圍表示試劑已變質，應更換合格試劑。

5.試劑空白速率 連續監測法中使用，是試劑本身在監測過程中沒有化學反應時的變化速率。

6.方法學補償系數 用於校準不同分析方法間測定結果的一致性，有斜率和截距兩個參數。

7.參考值范圍 對超過此范圍的測定結果，儀器會列印出提示。

(三)某些參數的特殊意義

1.最小樣品量 最小樣品量是指分析儀進樣針能在規定的誤差范圍內吸取的最小樣品量。一般分析儀的最小樣品量是2μl，目前也有小至1.6μl的。在樣品含高濃度代謝產物或高活性酶濃度的情況下往往需採用分析儀的最小樣品量作為減量參數，從而使分析儀檢測范圍(與線性范圍不同)的上限得以擴大。

2.最大試劑量 方法靈敏度很高而線性上限低的檢測項目，如血清白蛋白的溴甲酚氯法測定，以往手工法操作時樣品量10μl，試劑量4ml，這樣試劑量/樣品量比例(R/S)為200，線性上限則為60g/L。此法移植到分析儀上後，R/S卻很難達到200，致使線性上限變低。因此對這類檢測項目最大試劑量非常重要。

3.彈性速率 在酶活性測定中，當酶活性太高，在連續監測期中已不呈線性反應時，有些儀器具有彈性速率(flexrate)功能，能自動選擇反應曲線上連續監測期中仍呈線性的吸光度數據計算結果，使酶活性測定的線性范圍得以擴大。如AST可從1000U/L擴展至4000U/L，從而減少稀釋及重測次數、降低成本。

4.試劑空白速率 當樣品中存在膽紅素時，膽紅素對鹼性苦味酸速率法或兩點法測定肌酐有負干擾。因為膽紅素在肌酐檢測的波長505nm有較高光吸收，而且膽紅素在鹼性環境中可被氧化轉變，因而在肌酐反應過程中膽紅素的光吸收呈下降趨勢。若在加入第一試劑後一段時間內設置試劑空白速率，因為此段中苦味酸尚未與肌酐反應，而膽紅素在第一試劑的鹼性環境中已同樣被氧化轉變，因而以第二試劑加入後的速率變化，減去試劑空白速率變化，便可消除膽紅素的負干擾，見圖7-8。

二、單波長和雙波長方式

(一)概念

採用一個波長檢測物質的光吸收強度的`方式稱為單波長(mono-wavelength)方式。當反應液中含有一種組分，或在混合反應液中待測組分的吸收峰與其它共存物質的吸收波長無重疊時，可以選用。在吸光度檢測中，使用一個主波長和一個次波長的稱雙波長方式。當反應液中存在干擾物的較大吸收、從而影響測定結果的准確性時，採用雙波長方式更好。

(二)雙波長的作用

雙波長(di-wavelength)測定優點是①消除噪音干擾;②減少雜散光影響;③減少樣品本身光吸收的干擾。從光源，到比色杯、單色器、檢測器的整個光路系統中，均存在著隨時間發生變化的不穩定的檢測信號，即噪音，而雙波長檢測是同時進行的，兩種波長檢測產生的噪音基本上相同，因而能消除噪音干擾。當樣品中存在非化學反應的干擾物如甘油三酯、血紅蛋白、膽紅素等時，會產生非特異性的光吸收，而干擾測定結果的准確性。採用雙波長方式測定可以部分消除這類干擾，提高檢測的准確性。

(三)次波長的確定方法

當被測物的主波長確定之後，再選擇次波長。如根據甘油三酯等干擾物吸收光譜特徵，選擇次波長，使干擾物在主、次波長處有盡可能相同的光吸收值，而被測物在主、次波長處的光吸收值應有較大的差異。一般來說，次波長應大於主波長100nm。以主波長與次波長吸光度差來計算結果。

(四)雙波長的具體應用

對於某些反應速度快且無法設置為兩點終點法的分析項目，尤其是單試劑分析中，可以利用雙波長的方式來部分消除樣品本身的光吸收干擾。目前用單試劑法測定的項目應用雙波長的為血清總蛋白(雙縮脲法)主波長500nm，次波長576nm;血清白蛋白(溴甲酚氯法)主、次波長分別為600和700nm;鈣(偶氮砷Ⅲ法)主、次波長分別為 660、770nm;磷(紫外比色法)主、次波長為340、405nm，鎂(二甲苯胺藍法)主、次波長為505和 600nm。

三、單試劑和雙試劑方式

反應過程中只加一次試劑稱單試劑方式，加兩次試劑便為雙試劑方式。目前的生化分析儀大多可用雙試劑方式分析，其優點是：①可提高試劑的穩定性，多數雙試劑混合成單一工作試劑時，其穩定時間縮短;②能設置兩點終點法，來消除來自樣品本身的光吸收干擾;③在某些項目檢測時能消除非特異性化學反應的干擾。如血清ALT測定，血清中的內源性丙酮酸及其它酮酸也可與試劑中的指示酶(乳酸脫氫酶)起反應，使結果偏高。若先加入缺乏α-酮戊二酸的第一試劑，使其它酮酸與指示酶反應之後再加入含有α-酮戊二酸的第二試劑，啟動真正的ALT酶促反應生成丙酮酸，而丙酮酸與乳酸脫氫酶的反應消耗的NAD+能真正反映ALT的活性，從而消除以上副反應的影響。

四、測定過程的自動監測

各種自動生化分析儀或多或少都具有對測定過程進行各種監測的功能，以便在沒有人"監督"化學反應的情況下提高檢測的准確性。高檔分析儀的監測功能更強。

1.試劑空白監測 每種試劑都有一定的空白吸光度范圍，試劑空白吸光度的改變往往提示著該試劑的變質：如利用Trinder反應為原理的檢測試劑會因酚被氧化為醌而變為紅色;鹼性磷酸酶、γ-谷氨醯轉移酶、澱粉酶等檢測試劑會因基質分解出硝基酚或硝基苯胺而變黃;有些試劑久置後變渾濁。這些情況均可使空白吸光度升高。丙氨酸氨基轉移酶、天冬氨酸氨基轉移酶等負反應檢測項目，其試劑在放置過程中空白吸光度會因NADH自行氧化為NAD+而下降等。

試劑空白的測定方法有兩種：①每瓶試劑在使用前通過對試劑空白校準來確定試劑空白吸光度，這種方式適用於先取樣品後加試劑的分析儀。②每個樣品測定前均檢測試劑空白吸光度，適用於先加試劑後取樣品的分析儀。

2.試劑空白變化速率監測 一些酶試劑在反應溫度下不穩定，其空白吸光度可隨著時間逐漸發生變化，這種變化的主要原因與工具酶或輔酶的純度有關，且因試劑的組成和生產廠家的不同而不同。這種變化會影響測定結果的准確性，一般使結果偏高。如果設置此項監測，分析儀在結果計算時會自動減去試劑空白變化速率。在以監測NAD(P)H減少為指示反應的酶活性測定中，空白速率可監測並消除由NADH自身氧化所造成的吸光度下降;在色素原為底物的酶活性測定中，空白速率可監測並消除底物自身分解造成的吸光度升高。有關空白速率監測在膽紅素對鹼性苦味酸速率法測定肌酐負干擾消除中的作用，已如前述。

3.樣品信息監測 由於樣品的溶血、脂濁、黃疸會對測定結果產生非化學反應的干擾。根據溶血、脂濁、黃疸的光譜吸收特性，用雙波長或多波長檢測其性質和程度，一般是測定樣品在600nm/570nm、700nm/660nm和505nm/480nm吸光度比值的大小來分別判斷樣品溶血、脂濁和黃疸程度。然後在結果計算時自動減去這部分干擾，這將有利於提高分析結果的可靠性。

4.結果可靠性監測

(1)終點監測：終點法測定要判斷所選的測光點是否到達終點或平衡點。一些分析儀在所選終點後再選一個測光點，比較這兩點吸光度的差異來判斷反應是否到達終點。

(2)線性期監測：連續監測法選擇時間-吸光度反應曲線上的線性期來計算酶活性或被測物濃度，因此儀器要確定此連續監測期是否呈線性。其監測方法為①將連續監測到的各吸光度值進行線性回歸，計算出各點的方差，根據方差值的大小來判斷是否呈線性;②取連續監測期開始若干點的變化速率與連續監測期最後若干點的變化速率進行比較，來判斷是否為線性期。

5.底物消耗的監測 在連續監測法測定酶活性時，如果在監測期內吸光度上升或下降超過其底物耗盡值，則說明該樣品酶活性非常高，底物將被耗盡，監測期的吸光度將偏離線性，使測定結果不可靠。此時不列印結果或列印結果同時也列印出底物耗盡提示，該樣品應稀釋一定的倍數重新測定。此監測對於採用負反應分析酶活性的方法甚為重要。見圖7-9

6.方法線性范圍監測 每種待測物分析都有一個可測定的濃度或活性范圍，樣品結果若超過此范圍，分析儀將顯示測定結果超過線性范圍的提示，多數分析儀會自動將樣品減量或增量重新測定。

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『伍』 生化實驗方法分類尿素實驗算哪一類

生化實驗方法分類尿素實驗算哪一類❓
正確答案：利友絕塵用生物化學方法檢測細菌代謝產物的試驗稱為細菌的生化反應常用於鑒定細菌。 (1)常用檢好禪測細菌糖代謝的生化反應試驗有：①糖發酵試驗；②VP(V)試驗；③甲基紅宏賣(M)試驗；④枸櫞酸鹽利用(C)試驗等。 (2)常用檢測蛋白質代謝產物的試驗有：①吲哚(靛基質)試驗；②硫化氫試驗；③尿素分解試驗等。
利用生物化學方法檢測細菌代謝產物的試驗,稱為細菌的生化反應,常用於鑒定細菌。(1)常用檢測細菌糖代謝的生化反應試驗有：①糖發酵試驗；②VP(V)試驗；③甲基紅(M)試驗；④枸櫞酸鹽利用(C)試驗等。(2)常用檢測蛋白質代謝產物的試驗有：①吲哚(靛基質)試驗；②硫化氫試驗；③尿素分解試驗等。

『陸』 生化分析儀檢測方法中的終點法、兩點法、雙波長法有什麼區別

我們在購買生化儀的時候，生化分析儀的參數上的檢測方法可能存在多個，包括終點法、固定時間法（兩點法）、連續察野監測法（速率法）、雙波長法等等，這些檢測方法有什麼不同，各有什麼作用呢？

終點法：被測物質在反映過程中完全被轉變為產物，到達反映終點，根據終點吸光度的大小求出被測物濃度，稱終點法。此方法參數設置簡單，反映時間一般比較長，精密度好。

固定時間法（兩點法）：指在【時間-吸光度曲線】上選擇兩個測光點，次兩點既不是初始吸光度點，也不是終點吸光度點，用這兩個值吸光度差值計算。

連續監測法（速率法）：是在測定酶活性或用酶法測定代謝產物時，連續選取【時間-光度曲線】（各兩點吸光度差值相等）的吸光度值，並以此線性期的耽誤吸光度變化值計算結果。

雙波長法：採用一個主波長一個次波長的檢測方法：1、消除噪音干擾；2、減少雜散光影響；3、減少樣品本身光吸收的干擾，檢測結果更准確。次波長大於主波長100nm，主次波長處有盡可能相同的光吸收值。

這些測試方法各有優勢，從多個方面取長補短，是生化分析儀的檢測數據的准確性加以完善，更能反映人體的健康狀況拿沒納和一些潛在疾病的風險。

康宇醫療生化分析儀目前分為全自動和半自動的多個型號消沒，全自動的生化分析儀其中也包含了多種檢測方法，使檢測結果更加准確，適用於各類綜合醫院、婦幼保健院、兒童醫院、鄉鎮衛生院、診所的醫療

『柒』 生化分析儀的幾種基本分析方法

生化分析儀已經成為醫院檢驗科必備的檢測設備，按照生化分析儀的結構原理，生化分析儀可以分為管道連續流動式、分立式、離心式和乾片式等幾種，目前臨床最常用的是分立式生化分析儀，其常用檢測方法包括終點法、固定時間法和連續監測法。
1、終點法
2、固定時間法
3、連續監測法
通常情況下，全自動的生化分析儀是幾種檢測方法並存，如康宇醫療全自動生化分析儀檢測方法就包括終點法、動力學法、免疫比濁發、固定時間發、雙試劑法等，儀器檢測范圍寬泛，是基層醫院首選的醫療設備。

『捌』 全自動生化分析儀常見的檢測方法有哪些，各有什麼優勢

雙波長法：使用一個主波長和一個次波長檢測物質的光吸收強度的方式稱為雙波長法。當反應液中存在干擾物的較大吸收，從而影響測量結果的准確性時，採用雙波長方式更好。終點法：完全被轉化成產物，不再進行反應達到終點，取反應終點的吸光度來計算被測物質的濃度。生化檢驗中除酶和BUN、CRE外幾乎都用終點法來進行檢測。透射比濁法：又稱濁度測定法。為測量透過懸浮質點介質的光強度來確定懸浮物質濃度的方法，這是一種光散射測量技術分類：免疫比濁法，散射比濁法，光掃描比濁法，乳膠比濁法，光電比濁法，微生物比濁法等十餘類。固定時間法（兩點法）：是取尚在反應中的兩點間的差值來計算結果。此兩點既不是反應起始點也不是終點。主要用於檢測一些非特異性的項目，如肌酐。連續監測法（動力學法、速率法）：是在測定酶的活性或酶代謝產物時，連續取反應曲線中呈線性變化吸光度值（△；A/min）來計算結果。因在反應線性時間內各點間的吸光度差值為零故又稱謂零級反應。針對以上這些檢測方法的對比，我們可以看出在生化分析儀的檢測過程中如何正確應用這些檢測方法的。康宇醫療的全自動生化分析儀同時兼顧好幾種測試方法，在檢測過程中，根據所需，以長補短，使測試結果更准確，保證儀器的准確度。

『玖』 常規生化檢查有哪些

生殖器官的檢查包括對陰莖、尿道、睾丸、附睾、精索、前列腺等器官的視診、觸診等。查看陰莖是否為嚴重包莖，有無硬結炎症、腫瘤、發育異常等。尿道排尿困難、瘺孔、下裂、硬結及狹窄。對前列腺檢查其大小，有無肥大、硬結、腫物，取前列腺液送實驗室檢查。測量睾丸的大小、硬度，有無硬結、壓痛、鞘膜積液、腫物，是否為隱睾。輸精管的硬度，有無結節、壓痛以及有無精索靜脈曲張等。
睾丸體積的檢查常用以下方法：
（1）卡尺測量法。此法所測結果較准確，但比較繁瑣。方法為用卡尺分別測量睾丸的長徑、寬徑、厚徑；然後用各種公式計算出睾丸體積。
（2）測量子比較法。睾丸體積測量子為不同體積的狀如睾丸的橢圓形硬物，依其大小標為1～25號。測量時將被測睾丸拉起，綳緊陰囊皮膚，將測量子於睾丸旁逐一與之比較，與睾丸大小最相近的測量子體積，即可視為睾丸體積。
正常男子睾丸體積的個體變異很大，左右兩側的兩個睾丸亦有一定差異，因而所測結果只能作為參考。對睾丸發育狀況以及生殖能力的估計須經多方面檢查加以綜合分析，才能得出結論。
據調查，正常成年男子的睾丸體積（包括陰囊皮膚在內）大多相當於15至25號測量子的體積。
精液檢查是男性不育的必查項目。檢查包括精液量、顏色、粘稠度、酸鹼度：液化情況、精子密度、活力、形態等。
（1）顏色。正常人精液顏色是灰白色，禁慾時間長精液呈淺黃色。若精液呈乳白色或略帶黃綠色，常是由於生殖道或副性腺感染，精液中含有白細胞之故，精液發紅或夾有血絲血凝塊，稱血性精液。
（2）精液量。正常健康男子，每次性交射出的精液量為15～6毫升，精液體積異常一是過少，少於1毫升；二是過多，超過8毫升。精漿是精子的營養來源，其中含有穩定精液酸鹼度的緩沖物，能保護精子在酸性陰道分泌物內的存活。精子只佔精液量的1％，精液體積異常一般是精漿成分出現變化。如果精液量過少，精漿不能稀釋精子，精子往往失去活力，從而造成不育；精液過多時，精子密度降低，精液過稀，易於從陰道內流失，不利於受孕。
排精量不足1毫升或只有二三滴時，稱之為精液量過少。性交次數過於頻繁時，精液可以顯著減少，可禁慾5～7天重新測定。如果取精不得當，使精液失去，也可能造成精液量過少。造成精液量過少的原因還有：
①附性腺因素：包括睾丸功能障礙；附性腺出現感染或其他病變時。
②射精管梗阻：可因尿道狹窄、尿道憩室引起，也可能因感染水腫造成。
③膀胱括約肌功能紊亂，或局部神經支配失調時，可出現部分性逆行射精。
精液量過多可見於精囊炎，當炎症分泌物過多時，精囊液顯著增加。大多數原因不明的少精子症患者，可採用分段射精和離心分離精子的方法取精，將精液離心濃縮精子後進行人工授精。
如果患者睾丸發育不良、射精管道完全阻塞、不射精、逆行射精時則根本無精液排出。
（3）酸鹼度。正常酸鹼度為pH72～80。過高或過低都可影響精子的活動和代謝。若超過85，常說明精囊有炎症，或精液放得時間過久。若低於7，則是射精管阻塞，也可能是精液被尿污染。
（4）液化。精液剛射出時是粘稠的液體，但因受精囊分泌的凝固酶的作用很差，或畸形精子超過30％，常可造成不育。
（5）精液理化性狀異常。正常精液射出後很快凝成膠凍狀，在以後的15～30分鍾內又全部液化。如果精液射出後不凝固，或液化不全，過稠或膿性分泌物使精子活力下降，造成生育能力低下。生殖道感染也可引起不育。精液中致病菌大於103個／毫升，非致病菌大於103個／毫升，均可引起不育。
生精障礙（1）性染色體異常可使睾丸等性器官分化不良，造成真假兩性畸形以及生精障礙；常染色體異常可導致性腺及生精細胞代謝紊亂。造成不育。
（2）隱睾症或雙側睾丸發育不全者無生精能力。單側睾丸功能正常者，仍可生育。
快凝結成膠凍狀，繼而在15～30分鍾內又因前列腺分泌的液化酶而恢復成液狀。這種過程稱為精液液化。若超過30分鍾還不液化，即為不正常。精液不液化，精子不能自由活動，當然也就不會生育。精液不液化的原因，大多是由於前列腺的液化功能障礙所致。
精液粘度和液化時間是精液正常與異常的重要指標之一，主要取決於男性生殖腺中蛋白溶解酶的活性。無論精液粘稠度增高或降低，都可改變精子在精液中的活動能力。精液粘度和液化時間的異常與生殖道炎症、酒精中毒、酶原疾病等有關。
精液電描記圖是測定精液粘度和液化時間的一種方法。把精液置於裝有凝固描記儀的空氣恆溫器內檢測，記錄精液液化的電描記圖，判斷精液的粘度和液化時間。精液電描記圖測定排除了主觀因素和環境因素的影響，整個過程由電子描記顯示圖形，較為准確可靠，可用於診斷因精液物性質障礙有關的男性不育症和觀察治療效果。
（3）精子數量。精子的數量一是指每毫升精液中的精子數；二是指一次射出的精液中的總精子數。精子數量的個體差異很大，與其年齡、健康狀況以及近日是否有過射精有關。檢查前應禁慾3～10天。一般成人每毫升精液中精子數量為2000萬～15億／毫升。要反復檢查多次。一般認為，如果多次檢查精子數量均低於2000萬／毫升，應視為精子過少。這類患者即使精子形態、活力等均正常，生育能力亦較常人低，甚至造成不育。大於25億／毫升者稱為精子過多症。
精子數量減少的原因，可因睾丸本身發育障礙、外界環境因素、內分泌疾病等原因所致。精子密度過高也會影響精子的活動，發生流產的機會也比較多。有些人雖然精子密度低於2000萬／毫升，但精子活動力強，畸形率低，依然能生育；有些人盡管精子數量並不少。但活動精子百分率低，畸形精子多，結果也不能生育。一般認為，精子計數的最低限度，密度是1000萬／毫升；每次排出精子總數是5000萬。低於這個標准，基本上無生育力。
（4）精子活力：一般取已液化的精液一滴，在顯微鏡下觀察，並計數，大約計算出活動與不活動精子的百分率。一般可將精子的活動力分為五級：
1級精子毫無活動，全部為死精子。
2級精子原地打轉，動作遲鈍。
3級精子能活動，但不活潑，緩慢向前游動，方向不呈直線。
4級精子以中等速度直線向前游動。
5級精子活潑，快速直線向前游動。
精子活力包括精子活率和精子活動力。
精子爬高試驗是測定精子活動速度的一項試驗，是判斷男子生育力的一項指標。取塑料管灌滿含有果糖的精液營養液，管的上端結扎。下端垂直插入含有少量精液的試管內。放入37℃恆溫水浴箱中8小時，取出，將塑料管剪成1厘米長12段，依次把每段精液溶化後滴於計數盤上作精子計數，計算精子上升的高度及數字，以判斷精子活力。
此法簡單易行。對測定精子運動速度、判斷生育能力有一定的價值。
（5）存活率。通常在射精後1小時內，能活動的精子至少佔70％，若少於50％則為不正常。輸精管道及附屬性腺的炎症、精液標本放置在過熱或過冷的環境中、盛放精液容器中的影響、長期禁慾、精子受免疫影響而導致精子凝集等原因可致精子活動能力及存活率減弱。
（6）精子形態。形態正常的精子不應少於85％以上。如畸形精子在10％以下時，對生育無顯著影響；在20％以下時，仍有生育可能，若超過20％則可能造成不育。
精子分頭、體、尾三部分，正常精子長約50～60微米，外形如蝌蚪狀。頭部正面為卵圓形，前面是扁平的，側面是梨狀的。前緣銳薄，尾部長而彎曲，能作搖擺狀活動，於液體中以每秒25微米的速度向前移動。正常精子頭部可以變異為大頭、小頭、圓頭及尖頭等不同形態。幼稚型精子可呈小頭狀，可見頭部胞質殘余及體部胞質殘余等。衰老的精子在頭部胞漿內可見深染顆粒、頭部深染或不著色等。
①頭部：精子頭長35～50微米，寬20～30微米；精子頭呈規則橢圓形。只要精子其他形態正常。精子頭大小不是重要因素。精子頭部異常包括：圓錐形（長寬分別小於5和2微米，或長超過5微米，寬小於3微米）、不規則形、雙頭和「梨形」。
②中段：中段長50～70微米，寬10微米。寬超過2微米多反映胞漿小滴未完全退化，如果胞漿小滴大於精子頭的一半，意味著精子不成熟，屬異常，若小於或等於頭的一半應屬正常。中段斷裂也屬異常。
③尾部：尾長45微米。尾部異常常見為斷裂、雙尾或捲曲。捲曲可能與鋅元素含量有關。其他缺陷可能與無症狀生殖系統感染有關。
一個精子可能有多種缺陷，可以按其主要缺陷統計。精子形態判斷時應包括以下內容。
>60％的正常橢圓形精子頭（包括半數左右的可疑者），若<30％不正常；<6％的圓錐形精子頭，若超過10％不正常；<86％的不規則精子頭。若超過50％不正常；<05％的不成熟精子，增多意味著精子生成或精子成熟過程出現障礙；20％尾部畸形，若超過25％不正常。
如果形態異常的精子超過70％，特別是妻子有習慣性流產時，男方很可能具有染色體異常。如果異常精子少於70％，也許是精索靜脈曲張、職業或環境接觸毒物、放射線、微波、服用葯物、感染及應激等因素影響了睾丸生精過程。精子形態異常時，因為頭過大或其他形態異常不利於穿透宮頸粘液所形成的微小通道。宮頸粘液中常可見到頭特別小的精子，多數因為無頂體存在。如果畸形精子症找不出任何明確原因時則為原因不明的睾丸生精障礙，可以採用中醫葯治療方法促進生精。
精液異常的原因有：
（1）睾丸疾患：
（1）有隱睾病史者，無精子症發生率顯著升高，即使有精子，精液質量也異常。
②睾丸損傷，伴有陰囊血腫或血尿，無精子症或精液異常發生率顯著增加。
③曾發生過睾丸扭轉可有無精子症和少精子症。
④睾丸炎和附睾炎的病人，其精子密度和活動率顯著降低。
（2）泌尿生殖道疾病：
（1）性傳播疾病一般不影響精子密度。但精子活動率下降。
②泌尿生殖系統炎症常使異常精液質量，精子形態和活動率較低。
（3）其他系統疾病：
（1）青春期前後發生腮腺炎可引起無精子症，精液異常。
（2）支氣管炎特別是支氣管擴張無精子症發生率顯著增高。氣管炎患者的精'液分析異常率增高；③糖尿病與射精功能障礙相關，但不引起精液質量異常。
④6個月內曾發高燒的可使精液異常率明顯升高。
（4）其他：
①長期服用對生育產生影響的葯物。無精子率顯著升高，如各種細胞毒及抗腫瘤葯物、某些磺胺葯等。
②高溫工作中缺乏適當勞動保護條件，產棉區長期食用未經處理的棉籽油。常見到睾丸萎縮、少精子、死精子或無精子症患者。
3體外異種受精實驗：常規精液分析的各項指標完全正常，有時也不一定能使精子具有受精能力。目前常用人精子穿透倉鼠卵子的異種受精實驗。驗證男性不育者的實際生育能力。
精子穿透倉鼠卵試驗是根據倉鼠卵去除透明帶後，幾乎不再具有種屬特異性的特點而設計的，用人精子穿入倉鼠卵的百分率來評價精子的受精能力。
一般從4～12周齡的雌性倉鼠獲取卵子，經處理放入含有一定數量已獲能精子，在370c溫度中孵育3～5小時，然後吸出卵子在顯微鏡下觀察。凡卵子卵漿內有腫大的精子、頭並附有尾部者認為已受精，並且計數。
這種方法是診斷男性不育症一種很有實用價值的方法。
精子宮頸粘液穿透試驗是：
（1）玻片法：使精子與宮頸粘液直接接觸，試驗不能真實地反映客觀情況，並難以標准化及定量。
（2）毛細管法：將粘液放入一端封閉的毛細管中，另一端直立浸在粘液中，觀察精子群的活動能力。
精子穿透宮頸粘液能力與精子活動力的大小有關。宮頸粘液有篩選形態異常精子的能力，不合格的精子不能穿透宮頸粘液。如果精子在試驗中穿透能力正常，常提示不孕是由女方宮頸粘液異常所致。
前列腺液檢查正常前列腺液為白色，呈微酸性，pH63～65。內含總脂286毫克％，其中磷脂佔65％。白細胞數在10個以內，並可見到少許上皮細胞、澱粉樣物體及精子。患前列腺炎時，鏡檢白細胞數增加，或見成堆的膿細胞，卵磷脂顆粒減少。
內分泌檢查目前常用的方法有：血漿睾酮水平測定；人體絨毛膜促性腺激素刺激試驗；促性腺激素釋放激素刺激試驗。
克羅米芬是合成的女性激素衍生物，此葯可誘發排卵和產生精子，臨床常用於治療少精子症。應用克羅米芬以後能增強丘腦下部促性腺激素釋放激素的分泌，睾丸分泌睾酮也因而增加。所以克羅米芬刺激試驗，是檢查丘腦下部功能的良好辦法。
試驗需時12天，在服克羅米芬之前，先查兩天血漿和黃體生成素的基礎水平。從第三天開始連續服克羅米芬10天，用量為200毫克／日，一次或分次口服。在服葯後第九、十兩天測定血漿睾酮和黃體生成索的濃度。正常用此葯10天後與對照值相比較，黃體生成素的增長幅度為72％～245％，卵泡刺激素為45％～130％，睾酮為40％～220％。從增長幅度可以看出。卵泡刺激素增長幅度不如黃體生成素及睾酮明顯，因此陽性指標是以黃體生成素及睾酮的增長幅度為主。青春期前兒童的刺激試驗反應為陰性時，提示青春期尚未開始，但不能預示是否開始發育。16歲時一般呈陽性反應，若年齡超過17歲，興奮反應不明顯，則應進行垂體功能檢查。在青春期少年或青春期後成年，若克羅米芬刺激試驗是陰性，那麼，一般來說，年齡越大，則垂體功能低下的可能性越大。成年男性病人患單純垂體性幼稚症，可以本試驗陰性作為診斷參考。至於原發性睾丸功能低下病人，一般是黃體生成素值偏高，用葯興奮後不再上升。原發性無精子或精子稀少的病人，本試驗呈陽性。
人體絨毛膜促性腺激素刺激試驗人體絨毛膜促性腺激素（HCG）是由胎盤分泌的激素。HCG能促進男性胎兒的睾丸分泌少量睾酮，對男性胎兒的副性器官發育有意義。雖然在妊娠終未HCG已降至很低水平，但已成熟的睾丸已能分泌睾酮，足以使睾丸正常下降。HCG也能促進女性卵巢分泌雌激素和排卵，臨床上常用此葯治療不育症。為男病人進行HCG刺激試驗，可檢查體內的睾丸組織是否具有分泌功能。檢查結果如為陽性，表明體內睾丸組織有分泌功能。如檢查結果反應偏低，應考慮為隱睾症或原發性睾丸功能低下。如為陰性反應，也不能立即作出相反的診斷。女性病人檢查HCG的變化，目的在於診斷早期妊娠、葡萄胎及絨毛膜上皮癌等疾病。
促性腺激素釋放激素刺激試驗。在下丘腦的神經分泌物中，含有促性腺激素釋放素（GnRH）。若GnRH神經元損傷或垂體功能低下時，睾酮的分泌會有明顯減少。GnRH刺激試驗的目的，在於檢查垂體的功能。
血漿睾酮水平測定血漿中睾酮的濃度個體差異很大。正常壯年期男性（20～50歲）的水平最高，平均約為570～7009微克％，50歲以後，其濃度逐漸減少。血漿睾酮的水平在晝夜間有差異，早晨8～10時最高，午夜2時最低。睾酮分泌過多，原因可為睾丸的良性問質細胞瘤，血漿睾酮比正常人多100倍，因而表現為肌肉和骨骼的生長過快，性器官過早發育和副性徵過早出現。睾酮分泌不足，可見於因手術、感染、化學中毒、放射線損傷或發育不全等原因而致睾丸功能低下。也可能繼發於垂體病變，因促性腺激素減少。以致睾丸間質細胞發育不良。目前測定血漿中睾酮含量的方法很多。如放射免疫法，由於血漿用量較少，誤差也少，有一定優越性。
睾丸活組織檢查男性能否生育首先檢查睾丸組織是否受到過損害，生精功能是否正常。進行睾丸活組織檢查，除診斷男性不育外，還可診斷睾丸其他疾病。睾丸活組織檢查有兩種方法。
（1）穿刺法。用針管及針頭，抽吸少許睾丸組織。
（2）切開法。陰囊皮膚作2厘米左右的小切口，剪下一小塊睾丸組織。
睾丸組織切片檢查時可見，在正常情況下，青春期前曲細精管細小，無基底膜，僅有原始生殖細胞和支持細胞，間質細胞不明顯。青春期後則表現為曲細精管直徑加寬，有較薄的基底膜。上皮細胞能顯示精子發育成熟的各個時期。精原細胞靠近基底膜，成熟的生殖細胞靠近白細胞管管腔，管腔內可有較多精子。睾丸的生殖病理變化，主要出現在曲細精管生精上皮和曲細精管基底膜。
男性不育症經睾丸活動組織檢查，一般常見的病變如下：睾丸不成熟，其組織為青春期前的組織；精子發生低下，各時期精子都有，但數量減少；曲細精管變性，曲細精管透明變性或纖維化；克氏綜合症，可見曲細精管細小，無生精細胞，唯有支持細胞的基底膜增厚，有時表現為透明；單純支持細胞綜合症，無各期生殖細胞，僅有支持細胞：成熟障礙或生精阻滯生精過程被阻止在初級精母細胞或精原細胞階段；睾丸組織接近正常，不育的原因應考慮輸精管道被阻塞。
總之，睾丸活組織檢查，是確診男性不育症的重要方法。
輸精管、精囊造影常用於男性不育症的檢查通過尿道或陰囊部注入造影響劑，使射精管、精囊、輸精管及附睾顯影，以了解各部輸送通道梗阻、炎症、結核、先天性畸形及其臨近組織的有關病變。
常用的輸精管、精囊造影方法有下述兩種。
（1）經輸精管法。切開陰囊外上部，顯露輸精管，用注射針刺入輸精管注入造影劑15～5毫升。
（2）經尿道逆行插管法。先用尿道鏡或膀胱鏡插入尿道後，在精阜兩旁找到射精管開口，將細導管插入1～3厘米，然後注入造影劑2～5毫升。
輸精管、精囊造影對於診斷男性不育的原因有著重要意義，可以發現精子運輸通道的先天性畸形、炎症、腫瘤等疾病，另外對前列腺病變的診斷也有一定的幫助。
多普勒超聲檢查對可疑的精索靜脈曲張及隱性精索靜脈曲張患者，通過一般物理檢查不易確診時用多普勒超聲儀檢查能獲得較為准確的結果。
免疫學檢查目前最常用的抗精子抗體測定技術有精子凝集試驗、毛細血管內凝集試驗、胎盤內凝集試驗、補體依賴性精子制動試驗以及抗體標記熒光免疫技術等。
精子凝集試驗的血清精子凝集抗體滴度取1∶32作為有臨床意義的低限標准。低於1∶32者生育力稍有減低。1∶64～1∶512為中滴度，可以生育，但生育力較低，1∶512以上為高滴度，表明被檢者無生育力。精漿中的抗精子抗體滴度與血清中的滴度也不完全一致。精漿的精子凝集抗體滴度1∶16，生育力顯著降低。但並不是不能生育；滴度高於1∶32，可能不育。這些滴度數值只適用於精子計數每毫升2000萬以上的男性不育患者。
漢光免疫法檢測，不管其他方法檢測抗精子抗體是否陽性，它總是約有30％的患者出現陽性反應。所以，臨床上價值不大。
混合抗球蛋白反應試驗，此法特異性較強。測定抗精子抗體的准確性超過90％。由於操作技術簡單，可作為一種篩選試驗。
染色體檢查染色體異常者一般生育功能都受到影響。如果一個不育患者的睾丸體積小於12毫升，或者兩性畸形都應該檢查染色體，因其染色體異常的可能性很大。另外，妻子有習慣性流產或畸胎史時，夫妻雙方應做染色體鑒定。
染色體異常有兩種情況：一種是染色體的數目異常；另一種是染色體的結構畸變。
在男性不育中，性染色體數異常引起的病症常見的是先天性曲細精管發育不全綜合症，其典型核型是47XXY，還有47XXY／46XY嵌合型。在女性不育中，性染色體異常的疾病有性腺發育不全。而染色體結構畸變中，染色體易位是引起不育症的一個主要的原因。如果夫婦有一方是染色體平衡易位攜帶者，雖然他本身並無異常表現，但可能給後代帶來染色體異常的危險性。這樣的胚胎在妊娠早期流產的可能性很大，倖存者可能是染色體病患者。因而在妊娠20周左右應做產前診斷，通過羊水細胞培養鑒定胎兒的染色體的結構和數目是否正常，異常時應及早做人工流產。
檢查染色體一般是從患者靜脈采血15毫升，鑒定核型和分辯染色體的數H和形態結構。染色體檢查為遺傳疾病以及某些其他疾病的病因、發病機制、診斷、預防以至預後等提供了科學依據。
交媾試驗：交媾試驗是檢查精子是否能穿過宮頸的試驗方法。
精子射進陰道後要穿過宮頸。宮頸粘液由宮頸腺體分泌。宮頸粘液的量和性質隨月經周期中雌激素和孕激素水平出現周期性變化。在月經中期，宮頸粘液大且稀薄、拉絲長，使精子易穿過。如果精子活動能力差，或宮頸粘液少而粘稠，或存在抗精子抗體等，將會影響精子穿透宮頸粘液。
（1）試驗的時間：在月經周期中，宮頸粘液能夠允許精子穿透的時間的長度每個婦女不同。同一個婦女的每個周期也有差異。應因人而異確定出進行精子穿透試驗的最佳時間。可採用B超監測排卵來判斷排卵日期。試驗應該盡可能靠近排卵期進行，可以根據基礎體溫、宮頸粘液的變化和陰道細胞學檢查來確定排卵時間。
每對夫婦在進行試驗前應該至少禁慾2天。在同房前24小時內禁止陰道內用葯或沖洗。上床前把大小便排盡，避免同房後幾小時內上廁所。性交後仰卧，屈膝，墊高臀部休息至少30分鍾，防止精液流出。試驗應在性交後6～8小時進行，18～24小時進行也是可以的。
（2）性交後試驗技術：醫生將沒有塗抹滑潤劑的陰道窺器插入陰道，用不帶針頭的注射器、吸管，分別吸取陰道後穹窿、宮頸外口和宮頸內口的宮頸粘液，高倍顯微鏡下觀察精子情況。
①陰道後穹窿樣本。由於陰道內酸性環境，精子在陰道內僅能存活2小時，檢查陰道樣本的目的在於證實精液確實進入陰道內。
②宮頸外口樣本。宮頸外口精子數目隨著性交後時間延長而減少。性交後2～3小時，在宮頸下段積聚大量的精子。在宮頸粘液中，根據精子移動情況可以分為4級：1迅速和直線向前運動；2緩慢直線或非直線運動；3非向前運動；4不活動精子。
一對正常夫婦性交後，在宮頸內樣本通常用400倍視野可以觀察到25個以I級和Ⅱ級活動精子，如果用高視野有10個以上I級活動精子，即可以認為是良好的；如果僅有5個活動精子，並且為遲鈍緩慢或轉圈運動形式，則說明精液中精子數目少和活動率差，或者宮頸粘液異常。
性交後4小時開始，宮頸外口的精子數目逐漸減少。所以在4小時以上間隔時間檢查，從宮頸下段收集到的宮頸粘液中僅可發現很少的精子。
③宮頸內口樣本。在射精後，少數精子迅速到達宮頸內口，而且數目逐漸增多。約在2～3小時後達到一個高峰。在24小時之內，精子數目相對穩定。
所以在性交後6～10小時，用高倍視野具有I和Ⅱ級活動度的精子數目大多為10個，即屬於正常范圍。在性交後10～24小時，可檢測到的精子數目與6～10小時相似。
（3）試驗結果：性交後試驗的目的，不僅在於檢查性交後數小時以後，在宮頸粘液中活動的精子數目，而且還要評價精子的活動狀況。在性交後6～10小時宮頸內存在適當數量的活動精子，就可排除由宮頸因素引起的不育。
試驗陰性不能輕易下結論，因為有可能選擇的時間不當。有時由於性交後試驗進行得太早或太晚，可以造成假陰性結果。如果不能利用准確可靠的時間來確定排卵時間，則有必要在一個周期中重復作幾次性交後試驗。
一旦證實性交後試驗為陰性，可以進一步確定是精子質量問題，或是由於宮頸粘液的有害因素，並且可測定宮頸粘液中是否存在抗精子抗體。對於性交後試驗陰性的不育夫婦，可以利用人工授精辦法，幫助他們受孕。

『拾』 食品病原微生物的檢測方法有幾種生化檢測方法分別有什麼試驗

食品病原微生物的檢測方法有幾種？生化檢測方法分別有什麼試驗？

正確答案：答：分別有生化檢測方法核兄乎和分子生物學檢測方法。生化檢測方法有：糖酵解試驗，澱粉塵慧水解試驗，V-P試驗，靛基質實改悉驗，硝酸鹽還原試驗，明膠液化試驗，尿素酶試驗，氧化酶試驗，硫化氫試驗和三糖鐵瓊脂試驗。